化疗药物体外干预乳腺癌MCF-7细胞株的耐药基因表达

目的体外评价蒽环类及紫杉类化疗药物与乳腺癌耐药相关基因MDR1(多药耐药基因)和BCRP(乳腺癌相关耐药基因)表达的关系。方法利用RT-PCR技术和荧光定量PCR技术检测体外化疗药物干预后乳腺癌细胞株MCF-7的耐药相关基因表达情况。结果蒽环类药物与MDR1基因表达量间有密切关系,随蒽环类药物浓度的增加和作用时间的延长,MDR1基因表达量也随之增加。而蒽环类药物与BCRP基因间及紫杉类药物与MDR1、BCRP间都无明显的量效关系。结论蒽环类药物是MDR1基因编码的p-gp蛋白的特异性底物之一。临床可能通过检测MDR1的表达量较准确的预测蒽环类药物的疗效,并为个体化的选择敏感性药物提供一定的实验依据。

甲状腺癌分子靶向治疗的现状和前景展望

分子靶向治疗是指在分子水平上对肿瘤病因学、基因、受体等认识的深入而发展起来的治疗方法。分子靶向药物对甲状腺癌治疗的途径主要包括:VEGFR酪氨酸激酶抑制剂途径;原癌基因RET靶向治疗途径;R-RAF基因靶向治疗途径及EGFR抑制剂途径。甲状腺癌分子靶向治疗发展迅速,靶向治疗药物应用前景广阔,在传统疗法的疗效达到平台时,为甲状腺癌的治疗开辟了新的方向。

手术治疗单侧喉返神经麻痹的甲状腺肿瘤

目的分析术前单侧喉返神经麻痹的甲状腺肿瘤患者的临床、病理特点，探讨合理处理受侵喉返神经的方法。方法回顾分析2004年5月～2008年12月收治的2174例甲状腺肿瘤患者的临床资料，其中19例术前诊断单侧喉返神经麻痹，包括结节性甲状腺肿2例，甲状腺恶性肿瘤17例。13例行根治性切除手术，包括双侧甲状腺切除＋颈淋巴结清除术12例，双侧甲状腺切除＋全喉切除术1例，其中6例保留喉返神经，1例切除受侵段神经后予以吻合，另6例切除病变神经；4例行姑息性切除，患侧喉返神经均切除；2例结节性甲状腺肿患者行双侧甲状腺全切除术，喉返神经保护。结果19例患者均无围手术期死亡病例。淋巴结转移者10例。19例均获随访，时间平均64（37～91）月。2例结节性甲状腺肿和6例甲状腺癌术中保留喉返神经者，术后声音改善明显，另1例健侧代偿。6例切除神经者和4例姑息性手术切除喉返神经者术后声音无改善。结论术中探明喉返神经受肿瘤侵犯程度，尽可能保留神经，可以改善患者生活质量，取得较满意治疗效果。

PARP-1抑制剂作为^(131)I辅增敏剂在甲状腺癌治疗中的应用

目的:探讨131I照射以及联合PARP-1抑制剂(PJ-34)对于甲状腺癌细胞系BCPAP增殖与凋亡的影响。方法:常规培养人甲状腺癌细胞BCPAP,采用CCK-8法检测BCPAP的增殖、流式细胞术检测细胞凋亡,并用Western blot法检测Bcl-2、Bax的表达。结果:131I和PJ-34均能抑制BCPAP细胞的增殖,且与浓度呈相关性,而且两者联合作用比单独应用131I有更好的抑制效果。流式细胞术检测结果显示131I和PJ-34的联合作用比单独用131I有更高的凋亡率。Western blot结果显示随着131I中加入的PJ-34浓度的升高,Bax表达量逐渐升高,而Bcl-2的表达量呈降低趋势。结论:131I和PJ-34联合作用比单独应用131I对BCPAP有更好的抑制效果和更强的促凋亡作用,这为131I和PJ-34联合治疗甲状腺癌提供了初步的实验依据。

122例甲状腺癌围手术期应激反应类型及其与生活质量的相关性

目的探讨甲状腺癌围手术期应激反应类型及其与生活质量的相关性。方法对2018年2—12月122例行手术治疗的甲状腺癌患者进行研究,用自制一般情况调查表、创伤后应激障碍筛查量表(平民版)、创伤后成长评定量表、McGill生活质量量表(中文版)进行现场问卷调查,对患者创伤后应激障碍及创伤后成长与生活质量进行相关性分析。结果调查对象创伤后成长各维度平均得分以对生活的欣赏维度条目得分最高,新的可能性维度得分最低(P均<0.05)。创伤后应激障碍评分以再体验维度条目得分最高,回避反应得分最低(P均<0.05)。23例患者出现创伤后应激障碍,发生率为18.85%。McGill生活质量得分中社会支持维度最高,其次为心理维度、个人存在维度与生理维度,各维度对比差异均具有统计学意义(P均<0.05)。甲状腺癌患者围手术期创伤后成长与生活质量呈正相关(P均<0.05),创伤后应激障碍与生活质量呈负相关(P均<0.05)。结论甲状腺癌患者生活水平受患者围手术期创伤成长及创伤后应激障碍的影响,临床上可通过制定相应措施提高患者创伤后成长水平,减轻创伤后应激障碍以提高患者生活质量。

外周血CK19、MMP-9和MDR1水平评定体外药敏的价值

目的检测乳腺癌患者外周血中细胞角蛋白19(CK19)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和多药耐药基因1(MDR1)的表达量,评定参照体外药敏选择化疗方案的价值。方法采用荧光定量RT-PCR技术,检测117例乳腺癌患者化疗前后外周血中CK19mRNA、MMP-9mRNA和MDR1mRNA的表达量。结果实验组较对照组外周血中CK19、MMP-9和MDR1mRNA的表达量ΔCt值变化有显著差异,平均差值分别为-5.2105/-3.9938、-5.3312/-2.6930和0.6750/3.6140。结论实验组较对照组,外周血中CK19、MMP-9mRNA的表达量显著下降,而对照组MDR1表达量的增高较实验组更显著,提示在现行的循证医学基础上增加体外药敏实验结果这一参考因素,有可能选择更敏感的化疗药物,提高个体化治疗的效果。

β-catenin反义寡核苷酸对MCF-7细胞增殖和紫杉醇敏感性的影响

目的探讨β-catenin反义寡核苷酸(ASODN)对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响,及其与紫杉醇(paclitaxel)联合时对MCF-7细胞的抑制作用。方法不同浓度的β-catenin ASODN和错义对照(SODN)作用于MCF-7细胞48 h后,测定细胞凋亡比例。以终浓度为10μmol/L的ASODN、SODN和空白对照培养细胞10 d后,计算各自的集落形成率。按不同组合分别在培养细胞中加入ASODN、SODN、紫杉醇,于培养24、48 h用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测β-catenin mRNA表达,培养72 h后MTT法计算各组细胞存活率。结果MCF-7细胞凋亡比例随β-cateninASODN作用浓度升高而略有升高,与SODN、空白对照组比较差异有显著性意义(均P<0.05)。ASODN组平均集落形成率(12.5%)与SODN组(34.0%)和空白对照组(37.0%)差异有统计学意义(均P<0.05)。MTT实验和荧光定量RT-PCR结果显示,ASODN联合紫杉醇组与单用ASODN组或单用紫杉醇组比较,细胞生长抑制率明显增高,β-cateninmRNA表达相对值明显降低,均存在显著性差异。结论β-catenin ASODN抑制MCF-7细胞增殖,促进凋亡,并且同紫杉醇联合作用时显著抑制细胞生长和β-catenin mRNA表达。

MCF-7与MDA-MB-231细胞逃避巨噬细胞杀伤能力的实验研究

目的:研究乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231逃避巨噬细胞杀伤能力的差异。方法:将巨噬细胞上清液分别加入MCF-7和MDA-MB-231细胞培养液中培养48 h,再加入CCK-8孵育,使用酶标仪检测吸光度值。结果:MDA-MB-231细胞存活率高于MCF-7细胞[(124.03±4.86)%vs(44.22±1.38)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论:巨噬细胞对肿瘤细胞的作用与肿瘤细胞的分子分型有关,MDA-MB-231细胞株较MCF-7细胞株有更强逃避巨噬细胞杀伤的能力。

甲状腺手术中喉返神经损伤原因及预防

目的探讨甲状腺手术中喉返神经损伤的医源性原因和防治措施。方法回顾性分析华中科技大学同济医学院附属协和医院2003年6月至2006年8月间手术治疗甲状腺疾病1174例的临床资料,分析喉返神经损伤41例和再次手术与喉返神经在术中是否被分离显露的关系。结果初次手术、再次手术和2次以上手术暂时性喉返神经损伤率分别为2.1%、3.8%、9.5%,永久性喉返神经损伤率为1.0%、1.5%、4.8%。手术中解剖喉返神经和未解剖喉返神经的暂时性喉返神经损伤率为2.3%、2.5%;永久性喉返神经损伤率为0.2%、2.3%。结论甲状腺癌和甲状腺再次手术容易造成喉返神经损伤。术中常规解剖喉返神经可减少永久性喉返神经损伤。术中喉返神经完整解剖者,术后声嘶多为暂时性,保守治疗可恢复。对原因不明的喉返神经麻痹,应早期手术探查,尽量恢复神经功能。

甲状腺癌再次手术72例临床分析

目的分析甲状腺癌再次手术原因,探讨再次手术的时机和方式。方法回顾性分析2003年6月至2006年8月间收治的72例甲状腺癌再次手术患者的临床资料。再次手术原因主要为首次手术不当致肿瘤残留、肿瘤复发或颈淋巴结转移和^(131)Ⅰ治疗前的甲状腺清除。再次手术方式:病灶≤2cm 的单个肿瘤,行患侧加峡部切除;其余行双侧甲状腺全切;怀疑及确诊为淋巴结转移者,加选择性颈淋巴结清扫术。结果术后病理证实,腺体肿瘤残留率47.1%(32/68),淋巴结肿瘤残留率81.4%(35/43)。术后暂时性和永久性喉返神经损伤发生率分别为5.6%(4/72)及1.4%(1/72)。暂时性和永久性甲状旁腺损伤发生率分别为26.4%(19/72)及1.4%(1/72)。结论对于有肿瘤残留或复发的甲状腺癌患者,再次手术是必要的。最佳手术方式是双侧甲状腺全切加中央组淋巴结清扫和术中冰冻切片检查。

吉西他滨对复发性乳腺癌患者的化疗作用

目的探讨吉西他滨在乳腺癌化疗中的作用。方法取得不同患者的乳腺癌组织标本,采用胶原酶消化法获取乳腺癌原代细胞,应用原代培养和MTT法检测各种化疗药物在体外对乳腺癌原代细胞的杀伤效果。结果对原发性乳腺癌患者,紫杉类药物的疗效优于蒽环类药物和吉西他滨(P<0.01);对复发性乳腺癌患者,吉西他滨的疗效则明显优于蒽环类和紫杉类药物(P<0.01)。结论吉西他滨可以作为乳腺癌化疗的二线药物应用于复发性患者。

乳腺癌干细胞逃逸化疗机制的研究

目的探讨乳腺癌干细胞与乳腺癌化疗失败的相关性。方法测定9例人乳腺癌组织标本和MCF-7中不同细胞亚群的MDR1表达和化疗药物在体外对不同细胞亚群的杀伤效果，以及化疗药物干预后乳腺癌干细胞含量和MDRl表达的变化情况。结果人乳腺癌原代细胞中的MDR1表达主要见于乳腺癌干细胞；化疗后MCF-7中乳腺癌干细胞比例由32．62％升至58．79％～89．21％（P〈0．01），同时乳腺癌干细胞MDR1的表达也上升了5．45—25．30倍（P〈0．01）。结论乳腺癌干细胞在乳腺癌化疗中占有重要的地位，它不但比其他乳腺癌细胞更容易在化疗中发生治疗逃逸，并且能够通过变异获得耐药性，而化疗后乳腺癌干细胞的自我更新加速将促进乳腺癌的复发。