肾综合征出血热的实验室早期诊断

肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal syndrome，HFRS）是由汉坦病毒（hantavir—US，HV）引起的一种急性自然疫源性疾病，鼠为主要传染源。HV基因组为分节段的单股负链RNA，由大（L）、中（M）、小（S）3个片段组成，分别编码RNA聚合酶、囊膜糖蛋白（GP）G1和G2及核衣壳蛋白（NP）。GP位于病毒外层包膜，其表面有血凝素抗原和中和抗原位点；NP则位于核心，无中和抗原位点，但能诱导强烈的体液免疫和细胞免疫。根据病毒分类国际第七次会议的HV分型标准，目前HV至少有30个血清型或基因型，而且新的血清型不断地被检测出来。引起HFRS的HV病毒主要是Hantaan（HTNV）、Seoul（SEOV）、Puumala（PUUV）以及Dobrava（DOBV）。

TGF-β_1、BMP-7 mRNA在实验性肝纤维化中的表达及意义

目的:检测转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)mRNA在实验性大鼠肝纤维化中的表达,并研究其与病程的关系。方法:采用复合因素建立肝纤维化动物模型,HE染色观察肝脏组织病理表现,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应技术(RealTimeRT-PCR)检测TGF-β1、BMP-7mRNA的表达水平,并分析两指标与病程的相关性。结果:肝纤维化动物TGF-β1mRNA明显高于正常对照组,而BMP-7mRNA水平明显低于正常对照组。随着病程的延长,TGF-β1mRNA表达水平呈明显上升趋势,而BMP-7mRNA则呈下降趋势。结论:肝纤维化的进程与TGF-β1mRNA水平升高和BMP-7mRNA表达下降有一定关系。

核苷类似物早期病毒学应答慢性乙型肝炎患者血清sTRAIL水平变化及意义

目的:探索核苷类似物早期病毒学应答慢性乙型肝炎患者(CHB)血清sTRAIL水平变化及意义。方法:60例CHB均接受核苷类似物抗病毒药物治疗(拉米夫定或替比夫定),根据治疗24周末HBVDNA水平将患者分为完全病毒学应答组、部分病毒学应答组、无病毒学应答组,设正常对照组。采集治疗前、治疗4、12、24周末患者的血清,检测血清sTRAIL水平,同时检测IFN-γ、ALT水平。结果:患者治疗前sTRAIL、IFN-γ及ALT水平均较正常对照组升高(P<0.05或P<0.01)。sTRAIL水平在完全应答组治疗4周末、部分应答组治疗12周末下降。与治疗前比,差异均有统计学意义(P<0.05),在治疗4周末完全应答组sTRAIL水平低于同期部分应答组(P<0.05)。IFN-γ水平在完全应答组治疗4周末、部分应答组治疗12周末升高,与治疗前比差异均有统计学意义(P<0.05),但完全应答组IFN-γ水平在治疗4周末与同期部分应答组差异无统计学意义。ALT水平在三组的治疗过程中均逐步下降,各时间点间差异均有统计学意义(p<0.05)。完全应答组治疗前sTRAIL水平与IFN-γ水平、ALT水平呈正相关(P<0.01),治疗后sTRAIL水平与IFN-γ水平呈负相关(P<0.05)。结论:CHB血清sTRAIL水平升高;核苷类似物抗病毒治疗早期病毒学应答者血清sTRAIL水平下降,尤其是完全应答者在疗程的第4周就有明显的变化。sTRAIL在CHB免疫损伤中起重要作用,在其核苷类似物抗病毒治疗免疫恢复中也起重要作用,可作为核苷类似物治疗CHB早期应答指标预测远期疗效。

肝纤维化的发病机制及研究进展

肝纤维化是指各种致病因素刺激肝脏实质细胞坏死，组织内细胞外基质（extracellular matrix，ECM）异常增多和过度沉积的病理过程。器官纤维化的发生是组织损伤后机体的修复反应，以保持组织和器官结构的相对完整性。但当这种修复过程过度、过强及失控时，过量的ECM成分沉积在组织内，出现器官纤维化。肝纤维化和肝硬化是同一病理过程的不同发展阶段，肝纤维化是发展成为肝硬化乃至肝癌的重要中间环节。经过大量的研究证明，肝纤维化是可以逆转的。本文就肝纤维化的发病机制及研究进展作以下探讨。

TGF-β1重组腺病毒载体的快速构建及鉴定

目的应用简化的两步法细菌内同源重组高效制备TGF-β1基因重组腺病毒载体,为下一步的基因治疗奠定基础。方法应用PCR技术扩增TGF-β1-pcDNA3.1质粒中的目的基因片段,将TGF-β1目的基因片段定向克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV中,转化DH5a感受态细胞,用卡那霉素平板筛选阳性克隆,提取质粒,将酶切鉴定正确的质粒用PmeI线性化后采用两步法同源重组:先将pAdEasy-1转化入BJ5183细菌中,制备pAdEasy-1-BJ5183感受态细胞,再将PmeI线性化的pAdTrack-CMV-TGF-β1转入其中,进行同源重组,用卡那霉素平板筛选小的阳性克隆,提取质粒,酶切或PCR鉴定。结果经酶切,PCR鉴定成功构建了TGF-β1重组腺病毒载体。结论运用简化的两步法细菌内同源重组可以在大肠杆菌中快速高效地构建重组腺病毒载体。