经导管二尖瓣置换技术难点概述

二尖瓣反流(MR)是最常见的心脏瓣膜疾病之一,经导管二尖瓣置换术(TMVR)逐步成为治疗MR的重要研究及发展方向。本文阐述了TMVR产品目前研发遇到的技术难点以及TMVR未来的发展趋势,对多款国内外TMVR产品设计特点进行比较分析,概括了TMVR产品设计开发时需要考虑的重点与难点,如锚定、瓣周漏、流出道梗阻等。最后对TMVR产品未来的市场前景进行了展望。

TRAIL在重型肝炎患者PBMC和血清中的表达及血浆置换治疗前后的变化

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)在重型肝炎发病机制中的作用以及血浆置换治疗前后变化的意义.方法:采用实时荧光定量PCR反应检测30例重型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)TRAILmRNA的水平,采用ELISA法检测其血清可溶性TRAIL(sTRAIL)的水平,并与肝功能相关指标进行相关性分析.观察血浆置换(PE)治疗前后TRAIL的变化,比较治疗有效组和治疗无效组之间TRAIL水平差异.结果:重型肝炎患者PBMCTRAILmRNA的水平及血清sTRAIL的水平均明显高于健康对照组(0.0622±0.0227vs0.0059±0.0023,P<0.05;9.1058±3.2260vs2.4552±1.7485,P<0.01).mTRAIL和sTRAIL与肝功能相关指标总胆红素(TB)、白蛋白(ALB)以及凝血酶原时间(PT)均无直线相关性,膜型TRAIL(mTRAIL)和sTRAIL之间也无直线相关性.PE治疗后,肝功能相关指标改善;PBMCTRAILmRNA水平下降,治疗前后有显著性差异(0.0622±0.0227vs0.0214±0.0140,P<0.001);而血清sTRAIL水平在PE治疗前后无明显变化.治疗有效组PBMCTRAILmRNA水平、血清sTRAIL水平均低于治疗无效组,差异显著(0.0154±0.0076vs0.0320±0.0178,P<0.01;8.0476±3.5599vs11.0479±2.6694,P<0.05).结论:TRAIL介导的细胞凋亡在重型肝炎病理损害过程中起着重要的作用,TRAIL的水平在一定程度上能反映患者的肝脏损伤程度.从近期观察,PE治疗能降低患者PBMCTRAILmRNA水平,但不能降低血清sTRAIL水平.

罗格列酮对日本血吸虫病肝纤维化小鼠肝组织核因子-κB和过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响

目的:观察日本血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏肝组织核因子-κB(NF-κB)的活性和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达,及PPARγ配体罗格列酮对其表达的影响.方法:50只昆明小鼠,随机分为正常对照组、感染对照组、吡喹酮治疗组、罗格列酮治疗组及罗格列酮加吡喹酮治疗组.除正常对照组外,其余各组均建立血吸虫病肝纤维化小鼠模型.用HE染色观察肝组织光镜下的病理改变.用Western blot方法,实时荧光定量PCR反应观察小鼠肝组织NF-κB的活性变化与PPARγmRNA的表达.结果:罗格列酮加吡喹酮治疗组小鼠肝脏的炎性反应和纤维化病理改变较其他模型组轻(P<0.05).感染对照组NF-κB活性(141.11±15.37)最强,明显高于其余各组(正常对照组:78.89±18.12;吡喹酮组:112.89±20.17;罗格列酮组:108.89±20.47;罗格列酮加吡喹酮组:88.89±19.34)(P<0.05).感染对照组[-27.315±(-6.348)]及吡喹酮治疗组[-25.647±(-5.694)]PPARγmRNA表达较正常对照组[-16.557±(-3.022)]及罗格列酮治疗组[-18.217±(-4.498)]、罗格列酮加吡喹酮治疗组[-18.212±(-3.909)]显著减弱(P<0.05).结论:PPARγ及NF-κB在血吸虫病肝纤维化形成中起一定作用.PPARγ配体罗格列酮有明显的抗日本血吸虫病肝纤维化效应,其抗纤维化机制与PPARγ配体激活PPARγ表达的同时抑制NF-κB的活性有关.

TLR8受体的配体逆转NSCLC患者CD4^+CD25^+Treg功能的机制研究

目的初步探讨TLR8激动剂CpG-A对非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD4+CD25+Treg功能的影响及Foxp3表达的调控。方法①MACS分离CD4+CD25+Treg及CD4+CD25-Teff并体外培养;流式细胞术检测CpG-A处理后CD4+CD25+Treg的功能变化。②RT-PCR检测CpG-A处理后CD4+CD25+Treg细胞的TLR8及Foxp3基因的转录和表达。③采用激光共聚焦技术检测CD4+CD25+Treg细胞Foxp3蛋白表达及定位变化。结果①CD4+CD25+Treg和CD4+CD25-Teff共培养,加入CpG-A后CD4+CD25-Teff细胞增殖比率增高,平均荧光强度(MFI)明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。②CpG-A能够明显下调Foxp3mRNA相对表达量。③CpG-A处理后CD4+CD25+Treg细胞Foxp3蛋白荧光强度较对照组明显减弱。结论 CpG-A激活TRL8信号可以逆转NSCLC患者体外培养的CD4+CD25+Treg对CD4+CD25-Teff的抑制能力,其机制可能与下调Foxp3的表达相关。

罗格列酮对小鼠日本血吸虫病肝纤维化基质金属蛋白酶-2的影响

目的:研究PPARγ配体罗格列酮治疗小鼠血吸虫病肝纤维化,血清MMP-2与TIMP-2的变化及肝组织MMP-2与TIMP-2的基因表达方法:昆明小鼠50只,随机分为正常对照组A、感染对照组B、吡喹酮治疗组C、罗格列酮治疗组D及罗格列酮加吡喹酮治疗组E.除正常对照组外,其余各组均建立血吸虫病肝纤维化小鼠模型.用ELISA法检测血清MMP-2及TIMP-2的含量,实时荧光定量PCR反应观察小鼠肝组织MMP-2 mRNA及TIMP-2 mRNA的表达.结果:D,E组血清MMP-2的含量(306.0±62.3μg/L,312.0±54.3μg/L)及肝组织MMP-2 mRNA的表达[-19.1±(-6.0),-20.4±(-6.2)]高于A组[221.3±39.2μg/L,-26.3±(-5.3):P<0.051,但明显低于B组[411.3±57.5μg/L,-12.2±(-4.4),P<0.05]和C组[402.9±57.2μg/ L,-12.8±(-4.0),P<0.051.B,C,D和E组血清TIMP-2的含量及肝组织TIMP-2 mRNA的表达均显著高于正常对照组[209.3±60.5μg/L,-20.5±(-4.7);213.5±66.0μg/L,-19.9±(-5.1);223.6±65.3μg/L,-18.8±(-5.5);224.5±64.4μg/L,-19.7±(-4.3) vs 150.4±46.5μg/L,-27.2±(-6.0),P<0.05],但这4组间TIMP-2值无显著性差异(P>0.05).结论:MMP-2在血吸虫病肝纤维化形成中起促进作用,PPARγ配体罗格列酮的抗肝纤维化机制与其下调MMP-2的表达有一定关系.

姜黄素抗血吸虫病肝纤维化及其机制的实验研究

目的探讨姜黄素抗血吸虫病肝纤维化的作用及可能机制。方法小鼠随机分为4组:对照组、感染模型组、吡喹酮治疗组和姜黄素治疗组,除对照组外,各组建立血吸虫病肝纤维化小鼠动物模型,用实时荧光定量PCR反应观察小鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA的表达。应用HE染色,免疫组化法及多媒体病理图文定量分析,观察各组小鼠肝脏的病理改变及转化生长因子β1(TGF-β1),α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化。结果姜黄素可显著减轻肝脏纤维组织增生。感染模型组及吡喹酮治疗组PPARγmRNA表达较对照组及姜黄素治疗组显著减弱(P<0.05);姜黄素治疗组TGF-β1,-αSMA及Ⅰ、Ⅲ型胶原水平均明显低于吡喹酮治疗组和感染模型组(P<0.05)。结论姜黄素有明显的抗日本血吸虫病肝纤维化作用,其抗纤维化机制与其激活PPARγ的表达、抑制肝星状细胞(HSC)表达-αSMA及分泌TGF-β1,并减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成有密切关系。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在重症肝炎医院感染患者血清中的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)在重症肝炎并发医院感染患者血清中的表达及意义。方法重症肝炎患者50例,分为发生医院感染组和非医院感染组,以20例健康献血者作为正常对照组,根据抗感染治疗效果又将感染组分为治疗有效组与治疗无效组;分别在治疗前、治疗第7、14天抽取静脉血;用ELISA法检测血清sTRAIL水平,同时检测肝功能相关指标。结果重症肝炎感染组、非感染组血清sTRAIL水平分别为(10.23±3.31)、(7.43±2.88)pg/ml,正常对照组为(2.38±1.63)pg/ml,感染组和非感染组均明显高于正常对照组(P<0.01),感染组又明显高于非感染组(P<0.01);感染组血清总胆红素(TB)、血清白蛋白(ALB)、外周血白细胞(WBC)、中性粒细胞(N)分别为(580.49±140.95)μmol/L、(30.42±3.72)g/L、(8.54±3.58)×109/L、(6.68±3.11)×109/L,非感染组分别为(479.02±145.29)μmol/L、(33.98±4.04)g/L、(6.11±1.82)×109/L、(4.75±2.11)×109/L,感染组TB、WBC、N水平均高于非感染组,ALB水平低于非感染组(P<0.05或P<0.01),但血清sTRAIL水平与TB、ALB、WBC、N均无相关性;感染组抗感染治疗有效者在治疗过程中血清sTRAIL水平逐渐下降,治疗前为(10.12±3.11)pg/ml、疗程的第7天为(8.19±2.65)pg/ml、疗程的第14天为(6.72±2.83)pg/ml,疗程的第14天明显低于治疗前(P<0.01);无效组治疗前为(10.36±3.64)pg/ml、疗程的第7天为(10.51±2.97)pg/ml、疗程的第14天为(11.74±3.44)pg/ml,3个时间点的差异无统计学意义;在疗程的第7、14天有效组血清sTRAIL水平均低于同时间点无效组(P<0.05、P<0.01)。结论 TRAIL可能在重症肝炎医院感染的发生与发展中起重要的作用,可以通过检测血清sTRAIL水平了解重症肝炎医院感染的发生及转归。

石斛碱对IL-1β诱导的软骨细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的探讨石斛碱(DNLA)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法原代分离培养人膝关节软骨细胞,采用IL-1β诱导软骨细胞建立细胞损伤模型,不同剂量DNLA作用于软骨细胞;CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡率;qRT-PCR检测miR-155-5p表达量;anti-miR-NC、anti-miR-155-5p分别转染至软骨细胞后用IL-1β处理细胞,miR-NC、miR-155-5p mimics分别转染至软骨细胞后用DNLA、IL-1β共同处理细胞;Western blot检测增殖(Ki-67、PCNA)、凋亡(cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9)相关蛋白表达量。结果IL-1β作用条件下,不同剂量DNLA可降低细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9蛋白水平(P<0.05),并可降低miR-155-5p表达量(P<0.05),Ki-67、PCNA蛋白水平升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;转染anti-miR-155-5p可降低IL-1β诱导的软骨细胞增殖抑制率、凋亡率、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9蛋白水平(P<0.05),Ki-67、PCNA蛋白水平升高(P<0.05);转染miR-155-5p mimics可拮抗DNLA对IL-1β诱导的软骨细胞增殖、凋亡的作用。结论DNLA可减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其机制与抑制miR-155-5p表达而促进细胞增殖及抑制细胞凋亡有关。

重症急性胰腺炎患者早期或晚期手术时外周血有核细胞Toll样受体表达差异及意义

目的 探讨重症急性胰腺炎患者早期或晚期手术时外周血单核细胞Toll样受体 2、 4mRNA的表达差异 ,及其与患者并发症发生率和预后的相关性。方法 随机选取重症急性胰腺炎患者 2 9例 ,分成早期或晚期手术组 ,于手术后第 5天分离外周血有核细胞 ,利用逆转录聚合酶联反应 (RT PCR)法检测TLR2、TLR4基因的变化 ,同时测量血浆内毒素水平的变化 ,并与并发症发生率和病死率的差别作相关性分析。结果 早期手术组与晚期组的病死率分别为 2 5 % (3/12 )和 5 % (1/17) ,χ2 =15 2 1,P <0 0 1;并发症发生率分别为 10 0 %和 35 % ,χ2 =5 34,P <0 0 5 ;TLR2mRNA的表达水平分别为 (119 82± 11 13)和(75 15± 6 34) (t =12 5 4 ,P <0 0 1) ;TLR4mRNA的表达水平为 (98 11± 5 16 )和 (6 5 5 4± 5 11) ,t =16 83,P <0 0 1;两组间内毒素水平分别为 (1 16± 0 10 )pg/L和 (1 0 9± 0 0 8)pg L ,t =1 83,P >0 0 5。结论 与晚期手术者比较 ,早期手术者外周血白细胞TLR4及TLR2mRNA表达水平增加 ,术后病死率和并发症发生率增加 。

一氧化氮对急性出血坏死性胰腺炎肺组织Toll样受体2/4mRNA表达的影响

目的研究一氧化氮(NO)对急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)肺组织Toll样受体(TLR)2/4表达的影响。方法采用逆行胰胆管牛磺胆酸钠注射制造AHNP大鼠模型,动物分为假手术组、胰腺炎组和L精氨酸(LArg)治疗组。RTPCR方法检测肺组织TLR2和TLR4mRNA表达变化。结果与假手术组比较,胰腺炎组大鼠从3h时肺组织TLR2/4mRNA表达开始增高,在12h时肺组织TLR2/4mRNA表达达到峰值;同时肺损伤加重,肺组织TNFα浓度升高,NO浓度逐渐降低(P<0.05)。给予LArg治疗后,NO浓度明显升高,TLR2/4mRNA表达降低,肺损伤程度减轻,肺组织TNFα浓度降低(P<0.05)。结论急性出血坏死性胰腺炎时,肺组织内TLR2和TLR4mRNA表达上调,肺组织损伤加重。NO可以明显抑制AHNP肺组织TLR2/4mRNA的表达,从而减轻肺损伤。

孕期微量元素钙铁值测定结果临床分析

目的:了解孕妇在不同孕期微量元素的变化规律,及时合理为孕妇补充微量元素提供依据。方法:将750名孕妇按周期分为早孕(<16周)、中孕(16～28周)、晚孕(>28周)三个实验组,252名未孕体检妇女为对照组,采用原子吸收分光光度法检测孕妇及对照组妇女微量元素的含量,比较实验组及对照组微量元素钙、铁的值。结果:随着孕周的增加缺乏铁的孕妇比例升高,钙元素早孕组缺乏的比例最高。结论:孕妇应定期检测,在医生的指导下早期应注意钙元素的补充,中孕期应加强铁元素的补充。

重组人红细胞生成素对维持性血液透析的慢性肾功能衰竭患者血清瘦素水平的影响

目的 探讨重组人红细胞生成素 (rHuEPO)对维持性血液透析 (HD)的慢性肾功能衰竭 (CRF)患者血清瘦素水平的影响及其意义。方法 80例行HD的CRF患者分为不用rHuEPO治疗组和使用rHuEPO治疗组 ;使用rHuEPO治疗的又分三组 (3个月组 ,6个月组 ,12个月组 )。采用ELISA法测定血清瘦素水平 ,放免法测定血清TNF α水平。结果 使用rHuEPO治疗 6个月后 ,血清瘦素水平明显低于治疗前及未用rHuEPO治疗组 (P <0 .0 5 ) ;血清TNF α、CRP水平也明显低于治疗前及未用rHuEPO治疗组 (P <0 .0 5 )。结论 使用rHuEPO治疗