电压门控钠通道在卵巢癌中功能性表达的研究

目的:探讨电压门控钠通道(voltage-gated sodium channels,VGSC)不同亚型表达及与卵巢癌转移的关系。方法:以人卵巢癌细胞和卵巢肿瘤组织标本为研究对象,用RT-PCR,激光共聚焦,MTT及Transwell小室法,检测卵巢癌细胞中VGSC表达的亚型及VGSC特异性阻断剂河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)对卵巢癌体外侵袭性的影响。结果:卵巢癌高转移细胞系(CAOV3,A2780,SKOV3)中高表达的VGSC亚型Nav1.5与卵巢癌的恶性生物学特性明显相关;30μmol/L TTX对CAOV3,A2780,SKOV3细胞体外的侵袭力的抑制率约为50%,差异有统计学意义(P<0.05),对不表达Nav1.5的低转移卵巢癌细胞Anglne的转移级联过程则没有明显影响。结论:VGSC亚型Nav1.5与卵巢癌的体外转移明显相关,可能成为卵巢肿瘤的潜在标记物和治疗靶点。

电压门控钠通道亚型Nav1.5在乳腺癌细胞中的表达及与细胞体外转移的关系

目的观察电压门控钠通道(voltage-gated sodiumchannels,VGSCs)亚型在乳腺癌细胞中的表达及其与细胞体外转移的关系。方法通过RT-PCR,Western blot,MTT及Transwell小室迁移和侵袭实验,检测乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中VGSCs的表达及VGSCs特异性阻断剂河豚毒素(TTX)对细胞的毒性、迁移和侵袭特性的影响。结果在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中同时存在NaV1.1,NaV1.4和NaV1.8的高表达;而在MDA-MB-231细胞中发现NaV1.3和NaV1.5、NaV1.6的表达量较MCF-7细胞中明显升高,尤其是NaV1.5的表达具有功能性意义。体外应用1μmol/L和30μmol/L TTX处理细胞后,与对照组相比,MDA-MB-231细胞的体外侵袭性分别下降了(12.50±0.19)%和(53.58±1.03)%,而MCF-7细胞的体外侵袭性却没有发生明显变化。结论乳腺癌细胞MDA-MB-231中存在高表达的NaV1.5,TTX阻断VGSCs后显著抑制其体外侵袭力。

阻断Kv1．3和KCa3．1钾通道对单核／巨噬细胞增殖和趋化功能的影响

电压门控钾通道Kv1.3和钙激活钾通道KCa3.1是单核/巨噬细胞上的两种钾通道。本文旨在研究阻断Kv1.3和KCa3.1钾通道对于单核/巨噬细胞增殖和趋化功能的影响。用趋化实验检测单核/巨噬细胞对Ly-6Chi单核细胞(炎症型单核细胞)的趋化作用,用CCK8试剂盒检测单核/巨噬细胞的增殖情况,用ELISA法检测趋化因子CCL7的浓度变化,用趋化实验检测趋化因子CCL2和CCL7对炎症型单核细胞的趋化作用。结果显示,结果显示,分别用KCa3.1特异性阻断剂TRAM-34和Kv1.3强效阻断剂Sh K阻断这两种钾离子通道后,单核/巨噬细胞对Ly-6Chi单核细胞的趋化能力降低;Sh K使单核/巨噬细胞增殖受到显著抑制。用TRAM-34和Sh K孵育过的Ly-6Chi单核细胞对CCL2的敏感性下降。以上结果提示,Kv1.3和KCa3.1钾通道在单核/巨噬细胞活化、增殖和趋化过程起重要作用,这两种钾通道有望成为自身免疫性疾病和急性心肌梗死后心肌重塑调节的靶点。