血管内皮生长因子基因转染的心肌细胞移植对心肌梗死大鼠心功能的影响

目的:探讨腺病毒介导血管内皮生长因子165基因(AdVEGF165)转染乳鼠心肌细胞后血管内皮生长因子(VEGF)的表达及移植于大鼠急性心肌梗死(MI)模型后对心功能的影响。方法:体外培养新生大鼠心室肌细胞、标记BrdU、共培养法转染AdVEGF165基因;收集培养液上清,ELISA法检测转染细胞VEGF的表达。结扎同种大鼠前降支建立心肌梗死模型,4周后将心肌梗死大鼠随机分为4组,分别注射移植转染心肌细胞(组Ⅰ)、单纯心肌细胞(组Ⅱ)、AdVEGF165(组Ⅲ)和DMEM培养基(组Ⅳ)。超声心动图检测移植前及移植4周后的心功能。处死大鼠,留取心脏标本作HE病理染色及免疫组化检测,并计数血管密度。结果:AdVEGF165基因转染的心肌细胞表达VEGF高于对照组(P<0.01);超声检测心功能提示转染细胞组(组Ⅰ)心功能障碍轻于其它3组(P<0.01);免疫组化检测显示,移植细胞在移植区存活;HE染色血管计数显示转染组(组Ⅰ)有更多的新生血管形成(P<0.01)。结论:AdVEGF165基因转染心肌细胞后表达分泌VEGF增加,可促进梗死区新生血管形成,改善心肌血供,有利于移植细胞的存活,能更好地减轻心功能障碍。

VEGF基因转染乳鼠心肌细胞移植治疗心梗的研究

目的探讨腺病毒介导血管内皮生长因子165基因(AdVEGF165)转染乳鼠心肌细胞后血管内皮生长因子(VEGF)的表达及移植于大鼠慢性心梗(MI)模型后对心功能的影响。方法体外培养新生大鼠心室肌细胞、标记BrdU、转染AdVEGF165基因;收集培养液上清,ELISA法检测转染细胞VEGF的表达。结扎同种大鼠前降支建立心梗模型,4周后将心梗大鼠随机分为3组,分别注射移植转染心肌细胞(组Ⅰ)、AdVEGF165(组Ⅱ)、和DMEM培养基(组Ⅲ)。超声心动图检测移植前及移植4周后的心功能。处死大鼠,留取心脏标本作HE病理染色及免疫组化检测,并计数血管密度。结果AdVEGF165基因转染的心肌细胞表达VEGF升高,较对照组有显著性差异(P<0.01);超声检测心功提示转染细胞组(组Ⅰ)心功能较其他两组显著改善(P<0.01);免疫组化检测显示,移植细胞在移植区存活;HE染色血管计数显示转染组(组Ⅰ)有更多的新生血管形成(P<0.05)。结论AdVEGF165基因转染心肌细胞后表达分泌VEGF增加,可促进梗死区新生血管形成,改善心肌血供,有利于移植细胞的存活,能更好的改善心功能。

血管内皮生长因子对心肌细胞移植治疗心肌梗死有改善血供作用

目的:探讨腺病毒介导血管内皮生长因子165基因(AdVEGF165)转染的乳鼠心肌细胞移植对慢性心梗(MI)大鼠心功能的影响。方法:体外培养新生大鼠心室肌细胞、标记BrdU、转染AdVEGF165基因;收集培养液上清,ELISA法检测转染细胞VEGF的表达。结扎同种大鼠前降支建立心梗模型,4周后将心梗大鼠随机分为3组,分别注射移植转染心肌细胞(组I)、单纯心肌细胞(组Ⅱ)、和DMEM培养基(组Ⅲ)。超声心动图检测移植前及移植4周后的心功能。处死大鼠, 留取心脏标本作HE病理染色及免疫组化检测,并计数血管密度。结果:AdVEGF165基因转染的心肌细胞表达VEGF升高,较对照组有显著差异(P<0．01);超声检测心功提示转染细胞组(组I)心功能较其他2组显著改善(P<0．01);免疫组化检测显示,移植细胞在移植区存活;HE染色血管计数显示转染组(组I)有更多的新生血管形成(P<0．01)。结论:AdVDGF165基因转染心肌细胞后表达分泌VEGF增加,可促进梗死区新生血管形成,改善心肌血供,有利于移植细胞的存活,能更好的改善心功能。

大蒜素对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤细胞凋亡的影响

目的探讨大蒜素对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及对心肌细胞凋亡的影响。方法利用乳鼠培养心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤模型,将培养心肌细胞分为正常对照组(C组)、缺氧预处理组(AP组)、缺氧/复氧组(A/R组)、大蒜素预处理组(G组),测定各组缺氧后、复氧后细胞损伤指标乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,并应用DNA琼脂糖凝胶电泳及原位末端标记(TUNEL)法检测各组凋亡指数(AI)。结果G、AP组LDII、MDA明显较A/R组降低(P<0.01),SOD明显增高(P<0.01);A/R、AP、G组AI较C组明显增高(P<0.01),AP、G组AI较A/R组显著降低(P<0.01),G组AI较AP组稍高(P>0.05)。结论大蒜素具有抗心肌细胞凋亡作用,可减轻心肌细胞A/R损伤。

急性心肌梗死患者外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞水平与颈动脉内膜中层厚度的相关性

目的通过观察急性心肌梗死患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)水平与颈动脉内膜中层厚度(I MT)及炎性介质的相关性,探讨其在此类疾病发病机制中的作用。方法采用流式细胞分析法和酶联免疫吸附法(ELISA),检测50例急性心肌梗死患者(AMI组)和50例健康体检者(对照组)外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg水平、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白介素-4(IL-4)、IL-6、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等指标。利用高频超声检测AMI患者和对照组颈动脉I MT。结果 AMI患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+CD25+T细胞的百分率显著低于对照组(P<0.01)。AMI患者的I MT、血浆TNF-α、IL-6、hs-CRP水平显著高于对照组(均P<0.05),其CD4+CD25+Foxp3+Treg百分率与血浆IL-10水平呈显著正相关(r=0.682,P<0.05);CD4+CD25+Foxp3+Treg百分率与颈动脉I MT(r=-0.562,P<0.05)、hs-CRP(r=-0.443,P<0.05)、IL-6(r=-0.307,P<0.05)和TNF-α(r=-0.281,P<0.05)水平呈显著负相关。结论调节性T细胞失调可能参与动脉粥样硬化的发生发展,免疫失衡、血管重构及炎性反应可能同时参与了急性冠脉综合征的发病过程。

同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞凋亡及bax、bcl-2表达的影响

目的 观察同型半胱氨酸 (Hcy) 对人血管平滑肌细胞 (VSMCs) 凋亡以及bax、bcl-2表达的影响。方法 采用组织贴块法体外培养人VSMCs; 采用流式细胞仪检测细胞凋亡率; 逆转录 -聚合酶链反应法检测Bax、bcl-2mRNA的表达。结果 体外培养的人VSMCs在终浓度为 0 (对照组)、100、200、500、1 000μmol/LHcy的培养液中孵育 24h后的细胞凋亡率分别为 ( 2. 68±0. 23 )%、 ( 2. 79±0 .12 )%、( 8. 45±2. 41 )%、 ( 13. 37±4 .71 )%、(23. 75±5 .56)%, 表明Hcy诱导人VSMCs细胞凋亡呈浓度依赖性; baxmRNA相对表达量分别为 0 .86±0. 01、0 .92±0 .03、1. 51±0 .02、1. 82±0 .03、1 .91±0 .02, bcl-2mRNA相对表达量分别为 1. 38±0 .04、1. 32±0 .03、1. 28±0 .03、1 .21±0. 02、1 .09±0. 02, 表明Hcy呈浓度依赖性诱导人VSMCsbax基因表达显著上调, bcl-2基因表达轻度下调, bax/bcl-2比值升高。结论 Hcy诱导人VSMCs凋亡可能是通过上调bax基因表达来实现的, 诱导人VSMCs凋亡可能是Hcy致动脉粥样硬化作用的机制之一。

老年人心力衰竭的病理生理机制探索新动向

心力衰竭（简称心衰）是老年人群中最常见的心血管疾病之一。本文综述了老年人心衰病理生理机制的特点；评价了交感神经过度激活、能量代谢重构在心衰中的作用及肾脏去神经术或曲美他嗪、辅酶Q10等药物治疗措施的疗效；同时介绍了肺动脉高压、心室一动脉偶联僵硬、系统性炎症状态等机制在射血分数保留心衰发生发展中的作用。

多巴酚丁胺负荷超声结合心肌背向散射积分评价存活心肌

目的探讨多巴酚丁胺负荷超声(DSE)结合心肌背向散射积分(IBS)检测存活心肌的临床应用价值.方法冠心病组:22例患者,经冠状动脉定量造影术(QCA)确诊为冠心病(CAD),并进一步行经皮冠脉介入治疗术(PCI),术前1周内行DSE(5,10,20,40 μg/kg·min)检查,于静息、DSE每级负荷5 min采集全心尖切面(长轴、二腔、四腔)IBS图像,术后3个月复查二维超声和IBS检查.对照组:18例患者,QCA结果正常,行2DE,DSE,IBS检查.根据CVIB在DSE过程中的变化特点,探索CVIB最大变化率K值定义存活心肌,并检测K值识别存活心肌的敏感性、准确性,与单纯DSE进行比较.结果与单纯DSE相比,DSE结合IBS的K值检测存活心肌敏感性、准确性明显提高(90.0% vs 73.3%;90.4%vs77.4%、P＜0.05～0.01).结论DSE结合IBS技术较单纯DSE使用能提高检测存活心肌的敏感性和准确性.

兔动脉粥样硬化斑块内VSMCs凋亡与RANTES水平的相关性研究

目的研究血浆和斑块局部受激活后调节性正常T细胞表达和分泌因子(regulated on activated normal T cellexpressed and secreted factor,RANTES)表达水平与兔动脉粥样硬化斑块内血管平滑肌细胞(vascular smooth musclecells,VSMCs)凋亡程度的相关性。方法 40只雄性家兔随机分为:①空白组(Blank组)和②对照组(Control组):均普通饲料喂养;③稳定斑块组(AS组)和④易损斑块组(VAP组):均高脂饮食。Control和VAP组给予药物触发(蝰蛇毒+组织胺),Blank和AS组给予生理盐水。测定各组血脂和血浆RANTES水平,Real time-PCR和Western blot检测主动脉RANTES转录和表达水平,TUNEL染色后计算各组斑块血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡率及其与RANTES水平的相关系数。结果高脂喂养组家兔血脂水平较普通喂养组明显升高(P<0.01)。VAP组RANTES表达水平和凋亡率明显高于AS组(P<0.01)、Control组(P<0.01)和Blank组(P<0.01);AS组明显高于Control组(P<0.01)和Blank组(P<0.01);但Blank组和Control组间差异无统计学意义(P>0.05)。各组VSMCs凋亡率与RANTES表达水平均呈正相关(均P<0.05)。结论 RANTES过表达可能通过加重斑块局部的炎症反应而诱导斑块内VSMCs凋亡。

粉防己碱对缺血-再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的探讨粉防己碱对缺血-再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支(LAD)30min后松开,再灌注24h建立心肌缺血-再灌注损伤模型。将48只雄性SD大鼠随机分为:假手术组(Sham组),缺血-再灌注损伤组(IRI组),粉防己碱预处理组(Tet组)。再灌注结束后检测血清肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和心肌梗死范围(IS/AAR,%)。应用原位末端标记法(TUNEL法)检测各组凋亡细胞,计算凋亡指数(AI),应用免疫组化法检测心肌Bcl-2、Bax蛋白表达,计算Bcl-2/Bax值,进行组间比较。结果与IRI组相比,Tet可明显降低CK-MB值(976.57±160.69)vs(1910.38±221.10)U/L,P<0.01,减小心肌IS/AAR%,(23.28±4.38)%vs(43.76±6.30)%,P<0.01。与IRI组比较,粉防己碱预处理可显著减少心肌细胞凋亡,AI显著降低(8.62±2.45%vs19.36±5.28%,P<0.01)。粉防己碱预处理使Bcl-2表达增加,Bax表达下降,Bcl-2/Bax值显著升高(P<0.01)。结论粉防己碱能明显抑制缺血-再灌注损伤引起的心肌细胞凋亡,其作用机制可能与促进Bcl-2蛋白表达,减少Bax蛋白表达、升高Bcl-2/Bax比值有关。

血管平滑肌细胞中Survivin的表达和咖啡酸苯乙脂的干预效应

目的观察脂多糖(LPS)激活血管平滑肌细胞(VSMC)后,咖啡酸苯乙酯(CAPE)对细胞表达存活素(Survivin)的影响。方法MTT法检测LPS及CAPE对VSMC增殖能力的影响。分别用免疫细胞化学法和实时荧光定量RT-PCR法检测细胞Survivin蛋白和mRNA的表达。结果0.1～10.0mg/L的LPS刺激VSMC生长并诱导细胞表达Survivin,而5、10、20、40、80mg/LCAPE呈剂量依赖性地抑制激活的VSMC生长,同时降低细胞中Survivin的表达水平。结论CAPE可能通过降低激活的VSMC中表达的Survivin,增加细胞的凋亡而抑制其增殖。

美托洛尔对大鼠急性心肌梗死后交感神经重构的抑制作用

目的探讨大鼠心肌梗死后交感神经重构现象以及美托洛尔对重构的抑制作用。方法心肌梗死模型成功后的48只大鼠随机分为心肌梗死组(A组)和美托洛尔治疗组[B组,10mg/(kg.d)]。各组分别在3个不同的时间点(3d、7d、30d)进行观测。各时间点配以相同只数的大鼠,只穿线不结扎作为对照组。测定大鼠心电图,并计算QT离散度(QTd)。连续记录大鼠心电图,并对心律失常进行评分。用免疫组化的方法检测各组大鼠心肌梗死周边区交感神经密度。结果A组7d、30d时心肌梗死周围区交感神经密度与对照组比有明显增加(P<0.05)。B组在第30天时,梗死周边区交感神经支配密度要明显低于同时间点的A组(P<0.05)。美托洛尔治疗后各时间点QTd和心律失常评分均比相应A组显著降低(P<0.05)。结论美托洛尔能抑制心肌梗死后交感神经的重构,降低QTd和心律失常,第30天时,美托洛尔对降低心律失常的作用部分是通过抑制交感神经重构介导的。

细胞移植治疗心肌梗死的现状及前景

动物实验提示细胞移植可以修补坏死心肌,增加梗死区细胞数量,改善心功能。目前候选移植细胞有心肌细胞、骨髓基质干细胞、胚胎干细胞、内皮祖细胞、骨骼肌细胞等,现就上述细胞的移植实验研究进展及优缺点、移植途径、移植时间作简要综述并展望前景。

武汉市社会福利院老年人群高血压现状调查

目的调查武汉市社会福利院老年人群高血压患病率、知晓率、治疗率和控制率及相关危险因素,为特殊弱势人群中的高血压防治提供新思路。方法采用问卷调查法对武汉市社会福利院某小区年龄≥60岁68名常住老年人进行调查,由培训过的医师对调查对象进行血压测量、资料收集和健康教育,并按不同年龄段分为3组进行对比分析。结果武汉市社会福利院老年人群高血压患病率达76.47%,其中单纯收缩期高血压占69.23%。高血压患者的知晓率、治疗率和控制率分别为46.15%、53.85%、15.38%。≥80岁的老年组高血压的治疗率和控制率显著低于其他年龄组(P<0.05),合并多器官疾病的比例高于其他年龄组(P<0.05)。应用最为广泛的口服降压药物为钙通道阻滞剂和国产复方制剂。Logistic回归分析显示,年龄、肥胖、饮酒、吸烟、心血管病家族史、高盐饮食等危险因素与高血压的发病密切相关。结论武汉市社会福利院老年人群高血压患病率较高,高血压知晓率、治疗率和控制率仍处于较差水平。社会心理因素在福利院特殊人群高血压的发病和控制中可能起重要作用。社区高血压患者的规范化管理、经常性的健康教育、积极的社会援助和不良生活方式的纠正是福利院老年人群高血压防治的有效措施和手段。

酮色林对人类ether-a-go-go相关基因钾通道的阻断作用(英文)

采用双电极电压钳技术,研究酮色林对表达在非洲爪蟾卵母细胞上的野生型和Y652突变型人类ether-a-go-go相关基因(human ether-a-go-go-related gene,HERG)钾通道的阻断效应,观测HERG通道的分子位点特性改变对其阻断效应的影响。结果显示,酮色林以电压依赖性和浓度依赖性的方式阻断野生型的HERG钾通道电流。尾电流包裹程序记录电流显示酮色林对HERG钾通道微小的张力性阻断。阻断特征符合对开放状态通道的阻断特征。酮色林也能调节失活状态的HERG钾通道。位于孔道S6区的氨基酸位点突变Y652A和Y652R可显著减弱酮色林对HERG通道的阻断作用。同野生型HERG钾通道的阻断相比,Y652A突变使阻断的IC50提高72倍,而Y652R突变使阻断的IC50提高53倍。Y652A和Y652R的阻断效应之间没有明显的差别。以上结果提示,酮色林优先阻断开放状态的HERG钾通道,而Y652是酮色林与通道结合的关键位点之一。

慢性肾脏疾病的血压变化

动态血压监测是一种重要的临床辅助检测手段,重复性好,较少受主观因素干扰,能较全面准确客观地反映24h血压的总体水平,动态波动规律和昼夜节律。肾脏是高血压损伤重要的靶器官,不同原因的肾脏疾病发展到慢性肾脏疾病阶段都会有高血压并发症的出现,而不易控制的高血压又能进一步加剧肾脏功能的恶化,认识慢性肾脏疾病血压变化的规律,对延缓慢性肾脏疾病的发展有重要的意义。

局部给药跨室壁氯化钾单相动作电位记录电极的研制

目的研制局部给药跨室壁氯化钾单相动作电位(MAP)记录电极(KC lMAP电极),探讨模拟在体犬交感神经不均一的致心律失常机制。方法由5F动脉鞘管和0.2 mm的绝缘银丝,组构成3对MAP记录电极,鞘芯腔内注入含30%氯化钾琼脂糖凝胶即制成KC lMAP电极。用自制的电极记录犬左室前壁跨室壁MAP,观察局部异丙肾上腺素对三层心肌细胞动作电位时程(APD)及跨室壁复极离散度(TDR)的影响和心律失常的诱发情况。结果KC lMAP电极能稳定记录三层心肌MAP 120 m in以上,随时间的延长动作电位振幅逐渐降低但不影响复极特性的分析;局部给予异丙肾上腺素(10-5mg/m l)能显著降低中层心肌细胞的APD90(236.9±3.8 m s vs 226.3±3.0 m s)和TDR(35.7±4.8 m s vs 24.9±3.9 m s),中层心肌细胞易于诱发早期后除极及触发活动并引起室性心律失常。结论KC lMAP电极可理想地用于跨室壁心肌复极特性的研究;异丙肾上腺素降低正常犬的TDR,其诱发室性心律失常的机制与后除极和触发活动有关。

以顽固性高血压蛋白尿为主要临床表现的肾动脉纤维肌性发育不良1例报告

1病例资料 患者女，17岁，学生，因“发现血压升高3年，加重半个月”于2011-08-16入院。患者于3年前行扁桃体切除术时发现血压升高达170／110mmHg（1mmHg=0．133kPa），无特殊不适，一直未予血压监测和口服降压药。半月前因副乳腺增生在当地医院就诊时测血压为200／130mmHg，不伴头晕、头痛、恶心、呕吐、视物模糊等症，给予“心痛定”等药口服效果不佳。为求进一步诊治来我院，门诊以“高血压原因待查”收治。