骨髓间充质干细胞与不同表面处理钛片的生物相容性研究

目的通过观察大鼠骨髓间充质干细胞（rat bone mesenchymal stemcells,rBMSCs）在微弧氧化处理（micro-arc oxidation,MAO）、喷砂处理（sandblasting）和光滑（smooth）钛片表面的粘附和增殖情况,评价MAO钛片、喷砂处理钛片和光滑钛片之间的生物相容性差别。方法将钛片分为3组：MAO组,喷砂组及光滑组。扫描电镜（scanning elec-tron microscopy,SEM）观察MAO钛片表面形貌特征,能谱分析仪（energy dispersive spectroscopy,EDS）检测其表面主要元素含量。从大鼠股骨骨髓取材并培养rBMSCs,其成骨能力通过碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色和茜素红染色进行鉴定。3组钛片分别置于3个24孔板内,每孔1片,每板20片。取生长良好的第3代rBMSCs,接种到3组钛片表面,在接种细胞后第1、3、5、7天每组分别取出5枚钛片,1个行扫描电镜观察,另外4个行细胞计数。观察rBMSCs在不同材料表面的粘附、增殖情况。结果电镜下MAO钛片表面有无数2-10μm的微孔,能谱分析结果主要元素为钙、磷;rBMSCs经过20 d成骨诱导后ALP染色及茜素红染色阳性,证明rBMSCs有分化为成骨细胞的能力;rBMSCs在MAO钛片表面的增殖优于喷砂组和光滑组。结论大鼠骨髓间充质干细胞在多孔,富含钙、磷元素的MAO钛片表面的粘附及增殖均优于其它组,MAO钛片比喷砂处理钛片和光滑钛片具有更良好的生物相容性。

过继转输抗L3T4单抗治疗的心肌病小鼠脾细胞对心肌抗体的影响

目的通过对心肌自身抗体的分析探讨Th细胞在自身免疫性心肌病发病机制中的作用。方法用含有人线粒体ADP/ATP载体肽的免疫液多次免疫Balb/c小鼠得到心肌病组(n=6),单抗组(n=6)小鼠在给予ADP/ATP肽免疫的第0、1和2天,同时接受尾静脉注射400μg抗L3T4单抗;第180天时,将单抗组小鼠的脾细胞取出转输到正常小鼠体内(转输组,n=6),此小鼠亦同时给予多肽免疫,方法同心肌病组。对照组(n=6),以不含多肽的盐水免疫小鼠,时间和剂量同心肌病组。以ELISA法检测各组小鼠血清抗ADP/ATP载体自身抗体水平及IgG亚型的变化;以实时荧光定量PCR法检测各组小鼠T细胞中的细胞因子mRNA的表达。结果转输组小鼠血清自身抗体在各时间点均为阴性,类似于单抗组和对照组,而心肌病组抗体水平在各时间点均显著高于对照组(P<0.01);转输组IgG1亚型的生成受到明显抑制;细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6)表达在单抗组和转输组均受到显著抑制。结论Th细胞介导的免疫应答在自身免疫性心肌病的发病机制中起重要作用。

微弧氧化钛片与大鼠牙髓干细胞的生物相容性及成骨诱导研究

目的:观察大鼠牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)在微弧氧化(micro-arc oxidation,MAO)钛片表面粘附和分化情况,初步评价MAO钛片对DPSCs的成骨诱导性能。方法:实验组:DPSCs与MAO钛片共培养,阳性对照组:DPSCs成骨诱导培养,空白对照组:DPSCs无诱导普通培养。扫描电镜(SEM)观察DPSCs在MAO钛片表面粘附情况,碱性磷酸酶(ALP)活力检测,实时定量PCR分析Runx2、Osterix、DSPP和DMP-1基因表达和钙结节茜素红染色,鉴定DPSCs的成骨能力。结果:SEM观察MAO钛片表面粗糙多孔,DPSCs在MAO钛片表面粘附紧密,有触角向微孔内伸展。ALP活力检测和钙结节染色,实验组与阳性对照组无显著差异(P>0.05),与空白对照组有显著差异(P<0.05)。实验组Runx2、Osterix表达增强,DSPP和DMP-1表达无明显变化。结论:粗糙多孔的MAO钛片与DPSCs有良好的生物相容性,DPSCs在MAO钛片表面粘附紧密,具有向成骨细胞系分化的能力。