血液病相关出血的诊断与处理进展

出血是急诊患者常见的症状之一，其严重性不仅取决于出血的缓急、出血量及部位，也与引发出血的基础疾病密切相关。出血可起因于血液系统疾病，也可见于非血液病。一般非血液病引发的出血，其处理较为简单；而与血液病相关的出血，如未能充分重视及采取有效治疗措施，可能造成严重后果。

血液系统疾病合并抑郁症的危险因素分析

目的 了解血液系统疾病合并抑郁症的患病率,进而探讨其患病危险因素。方法 用汉密尔顿抑郁量表对92例血液系统疾病患者(血液系统疾病组)和82例正常对照组进行评分,并建立回归模型,对合并抑郁症的患者进行回归分析,在α=0.10水平分析并确定其患病危险因素。结果 ①血液系统疾病患者合并抑郁症的患病率(45.65％)明显高于正常对照组抑郁症的患病率(8.54％)。②血液系统疾病患者中,抑郁症的发生与性别、文化程度、家庭人均月收入、疾病分类、病程和治疗方案有关。结论 抑郁症在血液系统疾病患者中有较高的患病率,性别、文化程度、家庭人均月收入、疾病分类、病程和治疗方案是血液系统疾病患者合并抑郁症的可能危险因素。

医学生教学模式现状分析及改进初探

随着教育改革的不断发展,现有医学教学模式中存在的问题逐渐显露。本文基于现实情况及相关文献报道,分析当下的医学教学模式,从“教”与“学”的角度剖析了师资组成、授课方式、讲授内容、考核方法、学习态度、学习生活、学生心理等方面存在的问题,并对医学教学模式的改进进行初步探究。

新型冠状病毒肺炎患者外周血液学指标的改变—— 基于有限资料的回顾性研究

目的 探讨新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)患者外周血液学指标变化特征.方法系统回顾并分析已发表的COVID-19相关文献,评估COVID-19患者血常规和凝血功能异常指标,研究这些指标变化与疾病诊断、治疗及预后的关系.结果检索到623例患者的相关临床资料,其中白细胞减少(<4×109/L)者占23.25%(95%C I:13.31% ~32.78%),白细胞升高(>10×109/L)者占18.86%(95%C I:12.24% ~25.09%),中性粒细胞增多(>6.3×109/L)者占38.38%,淋巴细胞减少(<1×109/L)者占55.98%(95%C I:39.00% ~72.97%),嗜酸性粒细胞减少(<0.02×109/L)者占52.9%,血小板减少(<100×109/L)者占33.29%,45.95% 患者出现贫血(血红蛋白<100 g/L),32.08% 患者D-二聚体升高(>0.5 mg/L),31.51% 患者凝血酶原时间延长(>13 s),30.30% 患者凝血酶原时间缩短(<10 s).随着病情进展,患者淋巴细胞逐渐减少,D-二聚体逐渐升高,直至死亡,且嗜酸性粒细胞减少和淋巴细胞减少呈正相关.结论新型冠状病毒肺炎患者病情进展迅速,临床可根据外周血液学指标变化,对疑诊患者早期诊断,判断预后,抢先治疗,以减少ICU入住率,减少患者死亡.

促进血液肿瘤患者及家属参与化疗安全管理的研究

目的探索血液肿瘤患者及家属参与化疗安全管理的策略。方法应用便利抽样法选取2018年3月—2019年2月在武汉市某三级甲等医院血液科治疗的100例患者为研究对象。按照随机数字表法将其分为干预组和对照组。干预组采用患者及家属参与化疗安全管理策略,对照组采用常规护理方法。比较两组的效果。结果采用患者及家属参与化疗安全管理策略后,干预组化疗不良安全事件发生率(2.57%)明显低于对照组(6.21%);干预组静脉治疗质量合格率(92.00%)明显高于对照组(76.00%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论促进患者及家属参与化疗安全策略有利于降低患者化疗相关不良安全事件发生率,提高临床静脉治疗质量水平。

多发性骨髓瘤新型治疗方案的研究进展

多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的浆细胞恶性肿瘤,其典型病程特点是对最初治疗有所反应,随后产生耐药性。尽管在引入新药(如蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂)的推动下,多发性骨髓瘤的临床治疗虽然取得了重大进展,但是仍然无法完全治愈。然而只要患者有可用的新疗法,即可实现疾病的缓解,提高患者生存质量。这一现实促进了许多新型疗法的发展,在过去15年中批准了12种MM新型药物,还有更多的药物在临床试验中,极大地改变了MM的治疗格局,并提高了患者的生存率。本文就多发性骨髓瘤新型治疗的进展进行综述。

血友病的综合康复治疗—附67例病例回顾性分析

目的:回顾性分析67例血友病患者康复治疗期间病例资料,了解血友病关节肌肉病变情况、综合康复治疗方案及疗效。方法:收集2012年1月~2021年7月在武汉协和医院康复医学科收治,且住院满3周的67例血友病病例资料。采用血友病关节健康评分(HJHS)与功能独立性评分量表(FISH)评估3周综合康复治疗有效性;再发出血次数及抑制物滴度评估安全性。结果:总研究人群在低剂量预防联合康复治疗下HJHS及FISH治疗3周前后评分差异具有统计学意义(P<0.05)。住院期间仅1例(1.5%)重型HA外伤后再出血,1例(1.5%)中间型HA产生低滴度(<5BU/ml)FVIII抑制物。结论:血友病患者在低剂量预防治疗联合康复的综合方案下短期内可有效改善血友病关节健康及功能独立性,同时减少出血、抑制物形成等不良事件。

血液病患者造血干细胞移植后血流感染及耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌定植的重点菌群监测和临床分析

目的探讨造血干细胞移植(HSCT)后感染和定植的病原菌分布及临床特征,以期为血液病患者移植后并发感染的重点菌群监测与临床诊疗提供初步研究依据。方法回顾性分析2018年1月至2022年12月华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科190例微生物检测[革兰阴性菌(G-菌)血培养和/或肛拭子耐碳青霉烯类革兰阴性菌(CRO)筛查]阳性患者的临床资料,根据患者检测结果分为血培阳组、肛拭阳组、双阳组。统计分析比较三组患者情况。结果63例发生G-菌血流感染(BSI)的患者分离病原菌排名前四位的为大肠埃希菌(28株,43.75%)、肺炎克雷伯菌(26株,40.63%)、铜绿假单胞菌(3株,4.69%)和阴沟肠杆菌(3株,4.69%)。147例发生CRO肛周定植的患者分离病原菌排名前三位的为耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(58株,32.58%)、耐碳青霉烯大肠埃希菌(49株,27.53%)、耐碳青霉烯阴沟肠杆菌(20株,11.24%)。双阳组患者的3年无病生存(DFS)率和总生存(OS)率与血培阳组和肛拭阳组相比显著降低(DFS:35.6%对53.7%对68.6%,P=0.001;OS:44.4%对62.4%对76.9%,P<0.001),非复发死亡率(NRM)显著增高(50.0%对34.9%对10.6%,P<0.001)。血小板未植入和发生BSI为NRM的独立危险因素(P<0.001)。加用多黏菌素和(或)头孢他啶阿维巴坦后使用天数>7 d为NRM的独立保护因素(P=0.035)。结论发生BSI会显著增加血液病患者HSCT后的NRM;CRO定植加入血会严重影响其DFS和OS。

芒果甙诱导慢性髓系白血病K562细胞凋亡

本研究目的是探讨芒果甙对慢性髓系白血病细胞系K5 6 2细胞的作用及其作用机制。用噻唑蓝 (MTT)法观察芒果甙对K5 6 2细胞生长的影响 ;应用细胞形态、DNA凝胶电泳和流式细胞术等观察芒果甙对K5 6 2细胞凋亡的诱导作用 ;用RT PCR方法观察芒果甙作用K5 6 2细胞后bcr abl融合基因在转录水平的改变。结果发现 ,2 5 -2 0 0 μmol L浓度的芒果甙均能显著抑制K5 6 2细胞的增殖 ,呈剂量和时间依赖性 ,并能诱导K5 6 2细胞凋亡。随着药物作用浓度的增加 ,bcr abl融合基因的转录下调。结论 :芒果甙可抑制K5 6 2细胞的增殖 ,并可能通过抑制bcr abl融合基因的表达诱导K5 6 2细胞凋亡。

PLK1基因沉默抑制HeLa细胞凋亡

以高表达Polo样激酶1(Polo-likekinase1,PLK1)的宫颈癌细胞系HeLa细胞为模型,观察针对PLK1基因的短发夹状RNA(shorthairpinRNA,shRNA)对其凋亡和增殖的影响.设计并合成了针对PLK1的shRNA,将其导入构建的携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的RNAi(RNAinterference)表达载体中.通过RT-PCR和Western印迹分别检测HeLa细胞PLK1基因和蛋白水平的表达,以流式细胞仪和PI-Hochest双染法测细胞凋亡,MTT法检测细胞的增殖水平.成功构建了携带EGFP的RNAi表达载体pEGFP-H1.转染shRNA后,HeLa细胞PLK1的表达降低至30%.与对照组和空载体转染组相比,shRNA转染组的HeLa细胞凋亡率明显增加,其增殖活性则明显降低.本课题构建的RNAi表达载体便于观察靶基因的转染情况,且不影响H1启动子的体内转录.PLK1的基因沉默能明显增加HeLa细胞的凋亡,抑制该细胞的增殖,有可能为未来肿瘤的治疗找到新的靶点和有效途径.

冻存前后骨髓间充质干细胞的生物学特性和支持造血的研究

为了了解冻存复苏过程对骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSC)生物学特性和支持造血能力的影响,采用常规方法分离培养骨髓MSC,将传代后的细胞用含10%二甲亚砜、40%胎牛血清的IMDM细胞冻存液保存在-196℃液氮中,观察短期(4周)和中期(9-15月)复苏后MSC的活性、免疫表型、多向分化能力和支持造血的能力,并同冻存前的MSC进行比较。结果表明:中短期冻存后的MSC的细胞活性分别为(90士3.75)%和(93士2.51)%;冻存后细胞的增殖能力、免疫表型、体外分化为脂肪和骨细胞的能力、支持集落(CFU-GM,CFU-E,CFU-GEMM)的生长作用和冻存前MSC相似。结论:骨髓MSC在液氮中短期和中期保存后,细胞活性略有下降,但是并不影响MSC的增殖、分化和支持造血能力。

PPAR-γ在肺癌中的表达及在肺癌凋亡中的作用研究

背景与目的过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR-γ)是对机体代谢过程起重要调节作用的一种核激素受体。研究表明肿瘤(包括肺癌)组织及细胞可表达PPAR-γ,且经其配体活化后可影响肿瘤细胞的分化、增殖及凋亡。本研究的目的是分析PPAR-γ的表达与肺癌临床病理特征之间的关系,并探讨PPAR-γ的配体对肺癌细胞生长的影响及其诱导凋亡的机制。方法采用免疫组化法检测15例非癌肺组织和64例肺癌组织中PPAR-γ的表达,并通过图像分析测定各组的平均吸光度值。采用RT-PCR和Western blot检测肺癌细胞株中PPAR-γ的表达。细胞经PPAR-γ的配体处理后,采用TUNEL法检测凋亡,并用caspase-3活性检测试剂盒检测其活性变化。结果PPAR-γ在肺癌组织中的表达显著高于非癌肺组织。PPAR-γ的表达与肿瘤病理类型、细胞分化程度、术后TNM分期有密切关系。肺癌细胞株中有PPAR-γ的表达,且经其配体活化后,caspase-3的活性明显增加,并能诱导细胞凋亡。结论PPAR-γ表达与肺癌的临床病理特征密切相关。活化后的PPAR-γ可使肺癌细胞caspase-3的活性增强,从而使细胞更易发生凋亡。PPAR-γ有可能成为未来肺癌诊断和治疗的一个新靶点。

芒果甙对白血病K562细胞增殖抑制作用的研究

目的 :研究芒果甙在体外对慢粒白血病细胞系 K5 6 2细胞生长的抑制作用。方法 :采用 MTT法、集落形成试验及生长曲线绘制分别观察不同浓度芒果甙对 K 5 6 2细胞生长的影响。结果 :3种方法均显示不同浓度的芒果甙在不同时间对 K5 6 2细胞均有抑制作用 ,并随浓度升高和作用时间延长而抑制作用增强 ,其中 MTT法显示 ,2 5、5 0、1 0 0、1 5 0、2 0 0μmol/ L浓度芒果甙作用 K5 6 2细胞 72 h后 ,其抑制率分别为 31 .99%、5 0 .74 %、6 0 .2 4 %、6 2 .6 5 %和 70 .4 1 % ;2 0 0μmol/ L浓度芒果甙作用于K5 6 2细胞 2 4、4 8、72和 96 h后 ,其抑制率分别为 4 8.1 9%、6 8.88%、74 .38%、76 .93%和 83.5 0 %。结论 :芒果甙能明显抑制K5 6 2细胞的增殖 。

活化Chk1引起的G_2/M期阻滞在调节K562/A02细胞耐药中的机制探讨

本研究探讨活化的Chk1对白血病细胞周期及凋亡的影响,探究Chk1调控肿瘤细胞耐药的机制。以慢性粒细胞白血病细胞系K562及其耐药细胞系K562/A02(耐阿霉素)为研究对象,与阿霉素共孵育后,用流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测Chk1mRNA表达水平,Westernblot检测转染前后Chk1磷酸化水平;靶向Chk1shRNA抑制细胞内Chk1的表达后,用流式细胞术检测阿霉素作用后细胞的凋亡情况。结果表明阿霉素致K562/A02细胞阻滞在G2/M期的细胞百分率为(54.12±0.57)%,显著高于K562细胞(36.99±1.28)%;Chk1mRNA表达水平在K562与K562/A02细胞间无显著差异;Chk1磷酸化水平在K562/A02细胞为0.79±0·56,在K562细胞为0.27±1·47,其差异有统计学意义。转染Chk1shRNA后,两株细胞的Chk1磷酸化水平显著下降。转染组K562、K562/A02细胞凋亡率分别是空载体转染组的1.30倍和3.84倍。结论Chk1的活化水平调控着K562/A02细胞对阿霉素的敏感性。

芒果甙对K562细胞端粒酶活性和细胞周期的影响

目的:研究芒果甙对白血病K562细胞端粒酶活性及其细胞周期的影响。方法:采用端粒重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)PCR-ELISA方法检测K562细胞经芒果甙作用前后端粒酶活性的变化,应用流式细胞仪检测细胞周期的分布。结果:经芒果甙作用后,K562细胞端粒酶活性下降,随药物浓度增加和作用时间的延长,其抑制作用增强;芒果甙作用24小时后,K562细胞G2/M期细胞增多,S期细胞减少,出现G2/M期阻滞,并呈现剂量依赖性。结论:芒果甙能抑制K562细胞的端粒酶活性,其机制可能与其细胞周期阻滞作用有关。

人fgl2凝血酶原酶FRED结构域的原核表达、纯化及其凝血活性的鉴定

目的建立人fgl2凝血酶原酶纤维蛋白原相关结构域(fibrinogen-related domain,FRED)的原核表达系统,并鉴定表达蛋白的凝血活性。方法应用RT-PCR从外周血单个核细胞扩增fgl2凝血酶原酶FRED基因,克隆到原核表达载体pET22b(+),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导重组蛋白表达,重组蛋白经SDS-PAGE电泳和免疫印迹鉴定并用His-Tag柱纯化,以促凝活性(procoagulant activity,PCA)检测鉴定其凝血功能。结果扩增了人fgl2凝血酶原酶FRED基因,成功构建了重组pET-FRED原核表达质粒,表达的融合蛋白具有直接促凝血活性。结论建立了人fgl2凝血酶原酶FRED的高效原核表达系统,FRED可能为fgl2凝血酶原酶促凝血的活性区域。

Survivin致敏的树突状细胞疫苗激活抗白血病T细胞的实验研究

为研究survivin致敏树突状细胞 (DC)疫苗对特异性T细胞的激活影响及对白血病细胞生长抑制作用 ,采用共聚焦显微镜及免疫沉淀 Western印迹等方法检测急性白血病细胞survivin表达 ;外周血单个核细胞体外培养 ,诱导DC细胞的形成 ;体外进行survivin抗原负载 ,制备survivinDC疫苗 ;survivinDC激发同基因型T细胞 ,用流式细胞术进一步分析T细胞表型 ;3H TdR法测定刺激指数 (SI) ;并用51 Cr释放法测定特异性的抗白血病CTL细胞毒活性。结果表明 ,检测 19例初治急性白血病患者survivin的表达率为 84 .2 % ;其荧光分布均在细胞胞浆内 ;免疫沉淀 Western印迹进一步分析证实其survivin蛋白表达 ;外周血单个核细胞体外诱导形成的DC细胞具有典型DC的形态学特征 ;survivinDC可显著刺激T细胞的活化增殖 ;survivinDC激活的T细胞中 ,CD4 + TH 比例显著较DC组高 ,DC激发的T细胞则以表达CD8和CD5 6为主 ;同时survivinDC显著抑制白血病细胞的生长。结论 :急性白血病细胞表达survivin抗原 ,利用survivinDC疫苗可有效地抑制白血病细胞的生长 。

脂肪基质干细胞诱导分化为心肌样细胞的实验研究

目的研究脂肪基质干细胞(ASCs)的分离、纯化、扩增以及在体外定向分化为心肌样细胞的能力。方法获取并培养正常人的ASCs,倒置显微镜下观察其形态;流式细胞仪检测其免疫表型。5-氮胞苷诱导ASCs在体外分化为心肌样细胞,倒置显微镜观察心肌样细胞的形态,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌相关基因ANP、cTnT、cT-nI和αMHC的表达;免疫荧光法检测cTnT和结蛋白的表达;Western blot法检测Connexin 43的表达。结果ASCs呈纤维样贴壁生长,体外培养易扩增;ASCs表达相关抗原CD29和CD105,不表达CD31、CD34、CD45和HLA-DR;ASCs经5-氮胞苷的作用可呈现典型的心肌样细胞形态,ANP、cTnT、cTnI和αMHC基因及cTnT、结蛋白和Connexin 43均呈阳性表达。结论脂肪组织中分离培养的ASCs具有体外大量扩增并保持低分化状态的特性,以及定向分化为心肌样细胞的能力,有望成为治疗心肌梗死的种子细胞。

CHK1 shRNA对HeLa细胞凋亡和细胞周期的影响

目的采用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术沉默CHK1基因的表达,观察其对高表达CHK1的宫颈癌细胞系HeLa细胞增殖、凋亡的影响。方法构建针对CHK1的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达质粒,将该质粒通过脂质体转染法导入HeLa细胞,以RT-PCR和Western blot法分别检测其CHK1基因和蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化,MTT法检测细胞的增殖。结果shRNA能明显降低HeLa细胞表面CHK1的表达,与对照组和空载体转染组相比,shRNA转染组HeLa细胞CHK1 mRNA水平下降了66%,蛋白水平下降了60%(P<0.05)。此外,shRNA转染组的HeLa细胞凋亡率明显增加,增殖活性明显降低,而且G2/M期细胞百分率显著下降。对照组、空载体转染组和shRNA转染组的G2/M期细胞百分率分别为(53.96±1.35)%、(54.08±1.39)%和(15.10±0.87)%(P<0.05)。结论CHK1shRNA能明显增加HeLa细胞的凋亡,抑制该细胞的增殖,削弱其G2/M期阻滞,为进一步研究CHK1在肿瘤治疗中的作用机制提供实验基础。