金纳米颗粒基因探针检测HBV DNA

目的制备金(gold,Au)纳米颗粒HBV DNA基因探针,通过透射电镜直接检测乙肝患者血清中的HBV DNA,实现不经过PCR扩增检测DNA。方法制备Au纳米颗粒和Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,用荧光标记法检测纳米颗粒探针表面寡核苷酸的覆盖数和杂交效率。在检测体系中加入乙肝患者血清中提取的HBV DNA,透射电镜下观察。结果制备的Au纳米颗粒粒径为(10±5)nm,水相分散良好,在520nm有Au特征性的最大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,其最大吸收峰改变为524nm。Au纳米颗粒基因探针表面寡核苷酸的最大覆盖数目为(132±10)条,最大杂交效率为(22±3)%。在液相中与HBV DNA反应后,透射电镜下可观察到Au纳米颗粒凝聚成大的聚集体。结论成功制备了Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,可直接用于HBV DNA的检测。

金纳米颗粒基因探针同步检测HBV和HCV的初步研究

目的建立一种简单、快速同时检测HBV DNA和HCV RNA的诊断方法。方法利用PCR方法扩增HBsAg阳性合并抗HCV阳性的患者血清中HBV DNA和HCV cDNA并提取。制备Au纳米颗粒HBV DNA、HCV cDNA基因探针。在含有Au纳米颗粒HBV DNA、HCV cDNA基因探针的液相检测体系中加入HBV DNA和(或)HCV cDNA,透射电镜下观察。结果PCR可扩增HBV DNA和HCV cDNA,出现预期的431bp和323bp特异性条带。使用Au纳米颗粒基因探针通过透射电镜可同步检出乙、丙型肝炎合并感染患者血清中提取的HBV DNA和HCV RNA。结论通过透射电镜,使用Au纳米颗粒基因探针可同步检出乙、丙型肝炎合并感染患者血清中的HBV DNA和HCV cDNA,甚至可达到无需PCR水平,此方法具有敏感性高、特异性好的特点。

腺病毒介导的IL-24基因转移对系膜细胞分泌细胞因子IL-6、TNF-α的影响

目的 探讨腺病毒介导的白细胞介素24 （interleukin-24,IL-24）基因转移对系膜细胞分泌细胞因子白细胞介素6 （interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、IL-6、TNF-α的影响.方法 通过逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）方法构建IL-24腺病毒载体,并经序列分析证实.腺病毒载体在293细胞中扩增.分组培养系膜细胞：对照组为5％ DMEM（dulbcco＇s modified eagle＇s medium）培养肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cells,GMCs）;Ad.Ib24组为转染携带IL-24基因复制缺陷型腺病毒（Adenovirus.interleukin-24,Ad.IL-24）后用5％ DMEM培养肾小球系膜细胞,分别在24 h和48 h提取系膜细胞培养上清.用ELISA方法检测系膜细胞培养上清液中IL-6、TNF-α的表达.结果 ①对照组系膜细胞培养上清液中24 h和48 h的IL-6表达分别为（159.53±9.81） pg/ml和（125.78±4.61） pg/ml,Ad.IL-24组的系膜细胞培养上清液中24 h和48 h的IL-6表达分别为（812.56±7.21） pg/ml和（785.44±6.23） pg/ml.Ad.IL-24组的系膜细胞培养上清液中24 h和48 h的IL-6表达均明显高于对照组（P＜0.05）.②对照组系膜细胞培养上清液24 h和48 h中的TNF-α表达分别为（29.37±2.43） pg/ml和（26.35±3.04） pg/ml,Ad.IL-24组的系膜细胞培养上清液中24 h和48 h的TNF-α表达分别为（30.18±2.03） pg/ml和（28.16±2.35） pg/ml.Ad.IL-24组的系膜细胞培养上清液中24 h和48 h的TNF-α表达与对照组无统计学差异（P＞0.05）.结论 外源性IL-24基因转移可使系膜细胞分泌IL-6上调,而对系膜细胞分泌TNFα无明显影响.

NICU应用无线视频监控探视系统的问题分析与对策

本文阐叙了运用无线视频监控探视系统来满足新生儿家属探视及了解病情的优点，同时对这一新的探视方式存在的问题进行了分析，并提出了对策和改进。在防范医院感染做好保护性隔离工作的同时，更要注重与患儿家属的沟通并根据其不同层次和认知水平提供相应的健康教育。无线视频监控探视系统不仅为家属提供了一份人性化的管理体系，减少了院内感染的发生，而且在提高家属满意度的同时，使得护理人员获得了职业的满足感。