调节性T细胞在3型鼠肝炎病毒诱导的小鼠暴发型肝炎模型中作用的初步探讨

目的检测调节性T细胞（Tr）在3型鼠肝炎病毒（MHV-3）诱导的小鼠暴发型肝炎模型中的比例变化及细胞因子表达，初步探讨Tr在该疾病模型中的作用。方法通过腹腔注射MHV-3感染BALB／cJ小鼠诱导暴发型肝炎，观察小鼠的生存时间，检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平，利用苏木精-伊红（HE）染色法检测肝脏病理学改变，分离感染不同时间点外周血、脾脏以及肝脏中的淋巴细胞，利用流式细胞术来检测Tr的比例以及细胞因子IL-10表达水平。结果BALB／cJ小鼠感染MHV-3后，全部在3—6d内死亡，血清ALT、AST水平随着感染时间延长逐渐升高，HE染色显示肝脏组织炎症及坏死程度逐渐加重，流式细胞术检测发现随着感染时间延长，小鼠肝脏中的rrr的比例明显升高。同时肝脏Tr分泌细胞因子IL-10的比例以及肝脏组织IL-10的mRNA水平逐渐升高。结论MHV-3诱导的小鼠暴发型肝炎模型中Tr在肝脏中的比例和功能显著升高，这种代偿性升高提示Tr可能发挥调节机体过度免疫反应的功能。

双阴性T细胞活化自然杀伤细胞促进小鼠暴发型肝炎的发生发展

目的检测双阴性T(double negative T,DNT)细胞对自然杀伤(natural killer,NK)细胞功 能的影响,初步探讨其在3型鼠肝炎病毒(murine hepatitis vims strain 3,MHV-3)诱导的小鼠暴发型肝炎 (fulminant viral hepatitis,FVH)模型中发挥的作用。方法通过腹腔注射MHV-3感染BALB/cJ小鼠诱 导FVH,尾静脉转移过继FVH小鼠脾脏DNT细胞,观察小鼠生存时间和肝脏组织病理学改变,流式细胞术检测小鼠肝脏NK细胞CD69表达情况。磁珠分选肝脏DNT细胞和NK细胞,共培养24h后,检测NK细胞CD69、胞内干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的表 达水平,利用乳酸脱氢酶释放实验检测NK细胞对原代肝细胞的杀伤作用。结果转移过继DNT细胞,FVH小鼠生存时间缩短,在三天内全部死亡。转移过继组小鼠肝脏NK细胞CD69表达比例较对照组显 著升高[(80.60±5.56)%比(4.53±4.82)%,P<0.05]。肝脏DNT细胞和NK细胞以10: 1比例共培养,NK细胞CD69表达比例较NK单独培养显著增加[(23.1±3.7)%比(4. 53±4.82)%<0.05], TNF-α表达水平升高[(8.9 ±2.3)%比(3.0 ±0.2)%,P<0.05],NK细胞对原代肝细胞的杀伤活性明 显增强[(7. 6±0.5)%比(3.7±0.4)%,P<0. 05]。结论DNT细胞可促进NK细胞活化和TNF-α表 达,增强NK细胞对肝细胞的杀伤作用,可能为DNT细胞参与FVH发生发展的机制之一。