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尿道膜法分型诊断前列腺炎临床分析 被引量:4
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作者 李路 何玮 +5 位作者 袁红方 陈志强 徐华 蓝儒竹 余淦 叶章群 《临床外科杂志》 2017年第4期307-310,共4页
目的采用尿道膜"一杯法"对慢性前列腺炎进行分型诊断,探讨其诊断准确性,安全性及费用。方法慢性前列腺炎患者180例,随机选择其中60例进行"四杯法"检查;另外120例随机分入"一杯法"试验组(60例)和安慰剂组... 目的采用尿道膜"一杯法"对慢性前列腺炎进行分型诊断,探讨其诊断准确性,安全性及费用。方法慢性前列腺炎患者180例,随机选择其中60例进行"四杯法"检查;另外120例随机分入"一杯法"试验组(60例)和安慰剂组(60例)进行双盲研究;采集受试者的尿液和前列腺按摩液进行镜检和细菌学检查;同时对患者进行疼痛评分,收集受试者处理前后血液样本行血常规和肝肾功能检查,进行安全性评估;收集"四杯法"和"一杯法"的操作步骤和费用数据;结果 "一杯法"试验组Ⅱ型、ⅢA型和ⅢB型检出率分别为7.14%、48.22%和44.64%,"四杯法"组Ⅱ型、ⅢA型和ⅢB型分别为15.00%、46.67%和38.33%,两组数据比较差异无统计学意义(P>0.05)。"一杯法"安慰剂组Ⅱ型、ⅢA型和ⅢB型诊断准确率分别为43.33%、36.67%和20.00%。"一杯法"试验组、"四杯法"组与"一杯法"安慰剂组Ⅱ型和ⅢB型比较,差异有统计学意义(P<0.05)。"一杯法"两组受试者血常规、肝肾功能均在正常范围内,疼痛评分分别为(2.90±1.29)分和(3.00±1.05)分,差异无统计学意义(P>0.05)。"一杯法"法操作步骤和费用明显少于"四杯法"。结论尿道膜"一杯法"能更准确对慢性前列腺炎进行分型诊断,减少因假阳性而导致的误诊,且操作简化,费用低。 展开更多
关键词 一杯法 慢性前列腺炎 分型诊断 前列腺按摩液
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骶神经根囊肿所致的神经源性膀胱尿道功能障碍 被引量:1
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作者 杜广辉 《临床外科杂志》 2016年第2期92-94,共3页
健康个体的正常下尿路功能由三级神经中枢控制和调节,包括高级中枢(大脑)、次级中枢(脑桥)和初级中枢(骶髓)。由骶髓内的初级排尿中枢以及由骶髓发出的骶神经根和盆神经及阴部神经构成的神经通路,也称为骶神经反射弧,是下尿路... 健康个体的正常下尿路功能由三级神经中枢控制和调节,包括高级中枢(大脑)、次级中枢(脑桥)和初级中枢(骶髓)。由骶髓内的初级排尿中枢以及由骶髓发出的骶神经根和盆神经及阴部神经构成的神经通路,也称为骶神经反射弧,是下尿路功能最基本的控制和调节系统,其在排尿功能中的重要性越来越受到重视。 展开更多
关键词 骶神经根囊肿 神经源性膀胱 神经源性膀胱尿道功能障碍 诊断 治疗
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沙芭特在非细菌性前列腺炎症中的抗炎、抗纤维化及促进上皮细胞凋亡作用的研究 被引量:5
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作者 杨涛 吴柏霖 +6 位作者 周辉 刘培军 姚炜敏 曾瑾 余淦 徐华 叶章群 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2017年第4期221-226,共6页
目的探讨锯叶棕果实提取物沙芭特在非细菌性前列腺炎中的效应及其机制。方法前列腺上皮细胞RWPE-1经M1表型的单核巨噬细胞THP-1细胞上清液共培养,治疗组加用沙芭特(10μg/ml)培养,MTS检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR、ELISA... 目的探讨锯叶棕果实提取物沙芭特在非细菌性前列腺炎中的效应及其机制。方法前列腺上皮细胞RWPE-1经M1表型的单核巨噬细胞THP-1细胞上清液共培养,治疗组加用沙芭特(10μg/ml)培养,MTS检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR、ELISA及Western blot检测炎症、纤维化及凋亡相关的蛋白分子(IL-1β、IL-17、TNF-α、Fas、COX2、Bax、TGF-β、DDR1、α-SMA及CollagenⅠ)的表达。消痔灵前列腺注射诱导大鼠非细菌性前列腺炎模型,用von Frey纤维检测沙芭特治疗前后各组大鼠的痛觉敏感性,然后麻醉SD大鼠,腔静脉取血后摘取前列腺组织并称重,免疫组化及ELISA检测炎症因子的表达,masson染色检测纤维化。结果沙芭特抑制RWPE-1的增殖并促进其凋亡。M1表型THP-1条件培养液能促进上皮细胞表达IL-1β、TNF-α及COX-2,沙芭特处理能抑制炎症刺激所致的炎症因子表达,Western blot检测表明沙芭特处理能抑制COX-2、DDR1、SMA及CollagenⅠ的表达,增加Fas及Cleaved-caspase 3的表达。消痔灵100μl每侧叶注射可以成功诱导前列腺炎症模型,沙芭特60mg/kg能减少大鼠前列腺组织炎症因子的表达,缩小前列腺体积,降低大鼠痛觉敏感性。结论沙芭特能抑制前列腺上皮细胞RWPE-1的增殖并促进其凋亡,减小前列腺体积,抑制炎症因子及纤维化相关分子的表达,减轻前列腺炎症及纤维化从而起到治疗作用。 展开更多
关键词 沙芭特 慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征 前列腺增生
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草酸降解酶对肠源性高草酸尿症大鼠肾草酸钙结石形成的影响研究 被引量:4
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作者 盖强强 陈忠 +6 位作者 汪成合 鲁文红 吴文起 曾国华 陈志强 杨为民 叶章群 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期930-934,共5页
目的 观察草酸降解酶对肠源性高草酸尿症大鼠模型肾草酸钙结石形成的影响.方法 2014年5-6月,以8只健康大鼠为空白对照组(A组),将24只肠源性高草酸尿症大鼠按完全随机设计随机分为阳性对照组(B组)、低剂量酶灌胃组(C组)和高剂量酶... 目的 观察草酸降解酶对肠源性高草酸尿症大鼠模型肾草酸钙结石形成的影响.方法 2014年5-6月,以8只健康大鼠为空白对照组(A组),将24只肠源性高草酸尿症大鼠按完全随机设计随机分为阳性对照组(B组)、低剂量酶灌胃组(C组)和高剂量酶灌胃组(D组),每组8只.其中A组采用牛理盐水3 ml/d灌胃,B组采用4%草酸铵溶液3 ml/d灌胃,C、D组分别在B组的基础上加用20、40 U/d草酸降解酶灌胃.4组大鼠连续观察28 d,第0、7、14、21、28天测定24 h尿草酸盐浓度,第0及28天检测肾功能及尿Ca^2+、血Ca^2+浓度.第28天对A、B、D组大鼠行肾脏能谱CT扫描后,取4组大鼠肾组织切片染色观察草酸钙结晶形成情况.结果 第0天,A、B、C和D组大鼠尿草酸盐浓度分别为(0.61±0.06)、(1.58±0.15)、(1.59±0.10)、(1.64±0.20) mmol/L,后3组组间差异无统计学意义(P>0.05),且均高于A组(P<0.01).开始灌胃干预后,C、D组大鼠尿草酸盐浓度呈明显下降趋势,且D组下降更明显.第28天,4组大鼠尿草酸盐浓度分别为(0.61±0.11)、(1.64 ±0.12)、(1.17±0.12)、(0.87 ±0.11) mmol/L,C组和D组较B组均明显降低,D组较C组下降更明显,组间差异均有统计学意义(P<0.01).各组大鼠肾功能及血Ca^2+浓度均未明显改变(P>0.05).大鼠肾脏影像结果经CT后处理工作站数据分析提示,B组CT值明显高于D组(P<0.01),且两组均高于A组(P<0.01),3组的差异在低千伏能量条件下更明显.肾切片染色结果显示,B、C、D3组大鼠肾小管内均见草酸钙结晶沉积,B组最多,C组较少,D组更少,A组无明显结晶形成.结论 草酸降解酶能有效减少肠源性高草酸尿症大鼠肾草酸钙结石的形成. 展开更多
关键词 肾结石 草酸降解酶 高草酸尿症 草酸钙结石 大鼠
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1470nm激光直出光纤TURP式前列腺汽化剜除术治疗良性前列腺增生初步报告 被引量:21
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作者 陈忠 马俊 +5 位作者 杨竣 吴立成 王涛 杜广辉 杨为民 叶章群 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2015年第1期5-8,共4页
目的报告采用经尿道前列腺电切术(TURP)式方法行1 470nm激光直出光纤前列腺汽化剜除术的临床疗效。方法小结2014年1月至2014年6月我院采用1 470nm激光直出光纤行TURP术式的前列腺汽化剜除术24例患者的资料。结果所有手术顺利完成,手... 目的报告采用经尿道前列腺电切术(TURP)式方法行1 470nm激光直出光纤前列腺汽化剜除术的临床疗效。方法小结2014年1月至2014年6月我院采用1 470nm激光直出光纤行TURP术式的前列腺汽化剜除术24例患者的资料。结果所有手术顺利完成,手术时间为(94.5±34.1)min,术中出血量约为10-80ml,无输血病例。术后膀胱冲洗时间为(1.5±0.7)d,留置导尿管时间为(4.3±1.2)d,术后住院时间(5.1±1.3)d。术后半年随访,患者的国际前列腺症状评分和生活质量评分均得到显著改善(P〈0.05)。结论采用TURP术式行1 470nm激光直出光纤前列腺汽化剜除术是一种安全、有效的治疗良性前列腺增生的手术方法。 展开更多
关键词 前列腺增生 经尿道前列腺切除术 1 470nm激光 直出光纤 剜除术
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1例肾脓肿合并肾盂肿瘤病例分析 被引量:1
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作者 胡嘏 李森茂 +4 位作者 余虓 吴柏霖 陈忠 王少刚 叶章群 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2016年第4期237-238,共2页
肾盂癌是临床上较少见的恶性肿瘤,约占全部肾恶性肿瘤的8%。肾盂癌起源于尿路上皮组织,多数为移行细胞癌,合并感染时,其体征及辅助检查均缺乏特异性,术前确诊较困难,而早期诊断和治疗是提高其长期生存的关键。现回顾性分析我院2015年12... 肾盂癌是临床上较少见的恶性肿瘤,约占全部肾恶性肿瘤的8%。肾盂癌起源于尿路上皮组织,多数为移行细胞癌,合并感染时,其体征及辅助检查均缺乏特异性,术前确诊较困难,而早期诊断和治疗是提高其长期生存的关键。现回顾性分析我院2015年12月收治的肾脓肿合并肾盂肿瘤患者1例,总结其临床资料和诊治过程,以期提高对此类疾病诊断的准确性,减少误诊率。 展开更多
关键词 肾盂肿瘤 肾脓肿 病例分析 临床资料 移行细胞癌 恶性肿瘤 上皮组织 合并感染
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雄激素受体剪接突变体7和雄激素受体表达量的比值在预测前列腺癌内分泌治疗预后中的作用 被引量:12
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作者 王之泽 张宇聪 +4 位作者 丁北辰 肖巍 刘聪 李恒 叶章群 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期275-280,共6页
目的分析雄激素受体(androgen receptor, AR)和雄激素受体剪接突变体7(androgen receptor splice variant-7, AR-V7)表达量的比值(AR-V7/AR)预测前列腺癌内分泌治疗预后的作用。方法采用免疫组化染色法检测2010年1月至2015年12月... 目的分析雄激素受体(androgen receptor, AR)和雄激素受体剪接突变体7(androgen receptor splice variant-7, AR-V7)表达量的比值(AR-V7/AR)预测前列腺癌内分泌治疗预后的作用。方法采用免疫组化染色法检测2010年1月至2015年12月我院行内分泌治疗的136例前列腺癌患者的活检穿刺标本,以HS评分评估其表达量。患者年龄53~96岁,中位年龄71岁。确诊时中位tPSA为110.00 ng/ml(2.61~4 003.40 ng/ml),中位fPSA为14.62 ng/ml(0.12~640.19 ng/ml),中位PSA密度为1.15 ng/(ml·cm^3)[0.02~62.63 ng/(ml·cm^3)]。Gleason评分≥8分88例(64.7%),7分39例(28.7%),〈7分9例(6.6%);T3期57例(41.9%),T4期54例(39.7%),Tx期25例(18.4%);N0期46例(33.8%),N1期62例(45.6%),Nx期28例(20.6%);M0期30例(22.1%),M1期97例(71.3%),Mx期9例(6.6%)。利用Cox模型分析患者各临床因素对前列腺癌内分泌治疗预后的影响,采用Kaplan-Meier法分析AR-V7/AR对前列腺癌内分泌治疗预后的预测作用。结果本组136例中79例(58.1%)AR表达阳性,其中26例(19.1%)AR-V7表达阳性。Spearman相关性分析结果显示,AR与AR-V7的表达无相关性(r=0.042, P=0.629)。本组136例中位随访时间为44个月(15~71个月)。中位疾病无进展生存时间(PFS)为19个月(5~59个月);中位总生存时间(OS)为31个月(12~61个月)。AR-V7阳性患者较阴性患者有较短的中位PFS(10.8个月与25.0个月,P〈0.001)和中位OS(20.3个月与42.8个月,P〈0.001);高AR-V7/AR值患者较低AR-V7/AR值患者有较短的中位PFS(12.0个月与24.8个月,P〈0.001)和中位OS(22.5个月与42.8个月,P〈0.001)。在Cox单因素回归分析中,确诊时Gleason评分、前列腺癌T分期、tPSA、PSA密度、AR-V7/AR值可预测内分泌治疗的预后。在Cox多因素回归分析中,T4期(HR=2.597,95% CI 1.351~4.995,P=0.004)和高AR-V7/AR值(HR=5.788,95% CI 2.530~13.242,P〈0.001)是前列腺癌内分泌治疗预后不良的独立危险因素。结论高AR-V7/AR值是预测前列腺癌内分泌治疗预后不良的独立危险因素。AR-V7阳性、高AR-V7/AR值患者的中位PFS和OS均明显缩短。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 雄激素受体 雄激素受体剪接突变体7 内分泌治疗 预后
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间苯三酚治疗肾绞痛的多中心随机对照临床研究 被引量:36
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作者 章传华 刘双林 +8 位作者 陈志强 王珅 高文喜 周洁 郭永连 李国灏 张景宇 付桥 叶章群 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期257-260,共4页
目的 通过多中心随机对照临床研究,评估注射用间苯三酚对肾绞痛的治疗效果和安全性.方法 选取2013年6月至2014年7月在5家医疗机构就诊的肾绞痛患者作为研究对象.纳入标准:年龄18~70岁;临床确诊为泌尿系结石引起的肾绞痛患者;无相关药... 目的 通过多中心随机对照临床研究,评估注射用间苯三酚对肾绞痛的治疗效果和安全性.方法 选取2013年6月至2014年7月在5家医疗机构就诊的肾绞痛患者作为研究对象.纳入标准:年龄18~70岁;临床确诊为泌尿系结石引起的肾绞痛患者;无相关药物过敏史;无严重肝、肾、心脏及造血系统疾病.排除标准:严重感染患者;妊娠期及哺乳期妇女;伴有无法控制的高血压、心肌梗死、心律失常,需药物治疗者;消化道溃疡、酗酒、药物滥用或其他可能影响研究进行者.采用随机数字表法将受试患者按1∶1比例纳入研究组或对照组,所有患者均给予解痉药联合非甾体类镇痛药物治疗.解痉药研究组给予间苯三酚120 mg静脉滴注,对照组给予山莨菪碱注射液20 mg静脉滴注.镇痛药物统一采用双氯芬酸钠栓50 mg.观察并记录72 h内患者肾绞痛的疼痛程度、缓解时间、发作次数、结石排出情况及不良反应.结果 200例肾绞痛患者参加并完成本试验,研究组和对照组各100例.两组患者性别、年龄、结石位置、结石大小和肾积水程度比较差异均无统计学意义(P>0.05).对照组患者肾绞痛发作次数为(4.2±2.5)次,疼痛指数为7.8±1.1,疼痛缓解时间(21.7±8.2) min;研究组肾绞痛发作次数为(4.0±2.2)次,疼痛指数为7.7±1.3,疼痛缓解时间(19.3±7.6) min;组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).对照组结石排出率为3%(3/100),研究组为11%(11/100) (P<0.05).对照组总的不良反应发生率为71%(71/100),其中口干发生率高达67%(67/100),头晕发生率15%(15/100),皮肤潮红发生率22% (22/100),排尿困难发生率8%(8/100),尿潴留发生率6%(6/100).间苯三酚治疗组不良反应发生率为4%(4/100),显著低于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 注射用间苯三酚治疗肾绞痛安全有效.间苯三酚在治疗肾绞痛的同时有助于结石排出. 展开更多
关键词 间苯三酚 肾绞痛 多中心研究 随机对照试验
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1470nm半导体激光汽化术治疗良性前列腺增生的疗效及安全性研究 被引量:31
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作者 陈忠 叶章群 +6 位作者 吴嘉 杨为民 杜广辉 王涛 李凡 陈志强 胡志全 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期135-138,共4页
目的 探讨1470nm半导体激光汽化术治疗良性前列腺增生的安全性及疗效.方法 2012年1月至2013年1月,我院应用1470nm半导体激光对87例良性前列腺增生患者行激光汽化术.患者年龄55~82岁,前列腺体积为29.7~83.9 ml,平均(52.4±8.2) ... 目的 探讨1470nm半导体激光汽化术治疗良性前列腺增生的安全性及疗效.方法 2012年1月至2013年1月,我院应用1470nm半导体激光对87例良性前列腺增生患者行激光汽化术.患者年龄55~82岁,前列腺体积为29.7~83.9 ml,平均(52.4±8.2) ml.观察记录手术时间、出血情况、术前合并症及术后并发症,术后6个月内进行随访评估,采用统计学方法分析手术前后国际前列腺症状评分(international prostate symptom score,IPSS)、生命质量评分(quality of life,QOL)、最大尿流率(maximum urine flow rate,Qmax)及残余尿量(post void residual,PVR)等相关指标的差异.结果 87例手术均获得成功.手术时间35~104 min,平均(66±10) min.术中均未见明显出血,无输血病例.患者术后留置尿管时间20~70 h,平均(33±5)h.术后住院时间3~6d,平均(4±1)d.术后IPSS评分及QOL评分较术前改善,Qmax及PVR明显好于术前,手术前后比较差异均有统计学意义(P<0.01). 结论 1470nm半导体激光汽化术是治疗良性前列腺增生安全有效的微创治疗方法. 展开更多
关键词 良性前列腺增生 半导体激光 汽化术
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骶神经根病变致神经源性膀胱的诊断和治疗 被引量:7
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作者 杜广辉 徐磊 +4 位作者 李小辉 许盛飞 陈忠 杨为民 叶章群 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期100-103,共4页
目的 探讨骶神经根病变引起的神经源性膀胱患者的临床病理特点、诊断和治疗.方法 回顾性分析2002年5月至2013年11月手术治疗的27例骶神经根病变引起尿潴留和难治性下尿路症状(lower urinary tract symptom,LUTS)患者的临床资料.27例... 目的 探讨骶神经根病变引起的神经源性膀胱患者的临床病理特点、诊断和治疗.方法 回顾性分析2002年5月至2013年11月手术治疗的27例骶神经根病变引起尿潴留和难治性下尿路症状(lower urinary tract symptom,LUTS)患者的临床资料.27例患者中急性尿潴留4例,慢性尿潴留6例,难治性LUTS 17例;均有尿动力学异常,腰骶丛MRI检查均显示存在骶神经根单发或多发占位性病变.患者均行骶神经根病变切除术. 结果 术后病理检查显示多样化病理改变:单纯囊肿3例、节细胞神经瘤5例、囊壁炎症细胞浸润15例、囊壁玻璃样变15例、囊壁含退变神经纤维15例.27例围手术期无严重并发症.术后至少随访1年,10例尿潴留患者中9例恢复自主排尿,l例继续膀胱造瘘;17例LUTS患者的国际前列腺症状评分、疼痛评分、生命质量评分、最大尿流率、残余尿量均较术前显著改善,手术前后比较差异有统计学意义(P<0.01). 结论 骶神经根病变可能是引起尿潴留和难治性LUTS的原因之一,手术治疗可改善患者的排尿功能、LUTS症状和生命质量. 展开更多
关键词 骶神经根病变 尿潴留 下尿路症状 盆腔疼痛 神经源性膀胱
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“一杯法”:一种前列腺按摩液收集方法 被引量:1
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作者 何玮 李路 +5 位作者 袁红方 陈志强 徐华 蓝儒竹 余淦 叶章群 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期1170-1172,共3页
目的建立一种简便、快速、可靠的收集前列腺按摩液(EPS)的新方法。方法35条Beagle犬,随机分为7组,每组5条。构建尿路感染模型,收集尿液、EPS和前列腺组织进行细菌培养和白细胞镜检,同时取尿道和前列腺组织进行组织病理和电镜检查... 目的建立一种简便、快速、可靠的收集前列腺按摩液(EPS)的新方法。方法35条Beagle犬,随机分为7组,每组5条。构建尿路感染模型,收集尿液、EPS和前列腺组织进行细菌培养和白细胞镜检,同时取尿道和前列腺组织进行组织病理和电镜检查及尿道黏膜刺激性评估。结果细菌学检查:EPS结果表明第3组阳性,其余4组均阴性;尿液结果第1~2组均为阴性,第3~5组均为阳性。EPS白细胞镜检,第6组白细胞计数[(3.60±0.55)个/高倍镜视野]与第7组[(3.33±0.41)个/高倍镜视野]比较差异无统计学意义(t=0.871,P=0.409)。组织病理和电镜检查证实上述结果。尿道黏膜刺激性评分结果显示,洁悠神(JUC)对黏膜具有极轻微刺激性。结论经JUC尿道膜收集的EPS可以排除被尿道污染(假阳性)以及被尿道膜干扰(假阴性)的可能性,"一杯法"具有可行性。 展开更多
关键词 前列腺按摩液 清悠神长效抗菌材料 Beagle犬尿路感染模型 前列腺炎
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激光在良性前列腺增生症手术中的应用 被引量:30
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作者 陈忠 叶章群 《临床泌尿外科杂志》 2015年第9期767-771,775,共6页
新型的激光前列腺手术具有安全、高效等优点,患者术后恢复快。该术式对经尿道前列腺电切术的金标准地位提出强有力的挑战。本文介绍激光治疗前列腺增生症的作用原理,以及各种新型激光治疗前列腺增生症激光特性及手术技巧,并对激光前列... 新型的激光前列腺手术具有安全、高效等优点,患者术后恢复快。该术式对经尿道前列腺电切术的金标准地位提出强有力的挑战。本文介绍激光治疗前列腺增生症的作用原理,以及各种新型激光治疗前列腺增生症激光特性及手术技巧,并对激光前列腺手术的应用前景提出憧憬。 展开更多
关键词 良性前列腺增生症 激光手术
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人工合成小分子双链RNA通过激活P21蛋白对膀胱癌细胞生长的影响 被引量:7
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作者 盖强强 汪成合 +3 位作者 陈忠 张庆松 杨为民 叶章群 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期812-816,共5页
目的通过转染人工合成的小分子双链RNA(dsRNA)dsP21-555至膀胱癌细胞系T24和EJ,观察其对膀胱癌细胞生长的作用。方法根据对膀胱癌细胞的不同处理分为3组:阴性对照组[转染随机序列(dsContr01)],阳性对照组(转染相应的微小RNA即mi... 目的通过转染人工合成的小分子双链RNA(dsRNA)dsP21-555至膀胱癌细胞系T24和EJ,观察其对膀胱癌细胞生长的作用。方法根据对膀胱癌细胞的不同处理分为3组:阴性对照组[转染随机序列(dsContr01)],阳性对照组(转染相应的微小RNA即miR-370)和实验组(转染dsP21.555)。实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测3组细胞p21mRNA及细胞周期依赖性激酶(CDK)4、CDK-6mRNA的表达;Western印迹法检测P21蛋白和CDK4、CDK6蛋白的表达;流式细胞术测定转染后细胞周期分布;细胞增殖实验检测转染后细胞增殖能力;集落形成实验检测单个细胞克隆增殖能力。结果qPCR结果显示,与转染dsControl相比,转染dsP21—555分别上调T24和EJ细胞中p21mRNA表达至2.46倍(P〈0.01)和2.60倍(P〈0.01);转染dsP21—555与转染miR-370相比,p21mRNA表达差异无统计学意义(均P〉0.05)。与转染dsControl相比,转染dsP21-555分别使T24和EJ细胞中CDK4mRNA的表达下调43%(P〈0.01)和54%(均P〈0.01),CDK6mRNA的表达下调39%(P〈0.01)和36%(P〈0.01);转染dsP21—555与转染miR-370相比,CDK4、CDK6mRNA的表达差异无统计学意义(P〉0.05)。Western蛋白印迹检测结果验证了组间p21和CDK4、6基因表达的差异。流式细胞术检测显示,与转染&Control相比,转染miR-370或dsP21—555后,G0/G1期细胞比例明显升高,而S期和G2/M期细胞比例减少,细胞周期被阻滞在G0/G1期。细胞增殖实验结果显示,与转染dsControl相比,转染miR-370或dsP21-555后细胞增殖能力明显下降(均P〈0.05),且转染miR-370与转染dsP21-555间细胞增殖能力差异无统计学意义(P〉0.05)。细胞集落形成实验显示,转染miR-370和dsP21—555形成的集落数量均较转染dsControl少。结论dsP21—555能通过RNA激活作用激活P21蛋白的表达并显著抑制膀胱癌细胞的生长。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 RNA 双链 微RNAS P21 RNA激活
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微小RNA-1236和外源性小分子双链RNA激活膀胱癌细胞p21表达作用的比较 被引量:6
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作者 盖强强 汪成合 +3 位作者 陈忠 张庆松 杨为民 叶章群 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2662-2665,共4页
目的人工合成与微小RNA(miRNA,TniR)-1236所作用的p21基因启动子靶序列完全互补配对的4对小分子双链RNA(dsRNA):dsP21-242、dsP21-243、dsP21-244和dsP21-245(dsP21-243序列配对程度最高),分别观察其与miR-1236在激活人膀胱癌... 目的人工合成与微小RNA(miRNA,TniR)-1236所作用的p21基因启动子靶序列完全互补配对的4对小分子双链RNA(dsRNA):dsP21-242、dsP21-243、dsP21-244和dsP21-245(dsP21-243序列配对程度最高),分别观察其与miR-1236在激活人膀胱癌细胞株T24和EJ细胞中抑癌基因p21表达能力的差异。方法参照小激活RNA(saRNA)的设计原则设计合成4对dsRNA。分别转染阴性对照组(dsContr01)、阳性对照组(miR-1236)和实验组(dsRNA)至T24和EJ细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot分别检测p21mRNA和蛋白表达的水平。结果FQ-PCR检测结果显示实验组中仅dsP21-245能明显促进两种细胞中p21mRNA水平的升高;且与阴性对照组比较,dsP21-245分别上调T24和EJ细胞中p21mRNA的表达至2.32倍(P〈0.01)和2.84倍(P〈0.01);与阳性对照组比较,两种细胞株中p21mRNA的表达差异均没有统计学意义(P〉0.05)。RT-PCR检测结果证实了p21mRNA表达变化的趋势。Westernblot结果显示在两种细胞株中p21蛋白表达水平的升高与p21mRNA水平的上调一致。其余3对dsRNA均未能显著上调两种细胞株中p21基因的表达(P〉0.05)。结论人工合成的dsP21-245能显著促进膀胱癌细胞中p21的高表达,且与miR-1236激活p21表达的能力差异无统计学意义。 展开更多
关键词 微小RNA 双链RNA RNA激活 P21 膀胱癌
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微小核糖核酸miR3619-5p对膀胱癌细胞系EJ和T24细胞增殖的影响 被引量:3
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作者 李森茂 胡嘏 +3 位作者 余虓 徐华 王少刚 叶章群 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期211-215,共5页
目的 探讨微小核糖核酸miR-3619-5p对膀胱癌细胞系EJ和T24细胞增殖的影响.方法 2015年10月至2016年3月对膀胱癌细胞系EJ和T24细胞分别分为3组:阴性对照组转染随机序列dsControl,阳性对照组转染dsP21-322,实验组转染miR-3619-5p.实时荧... 目的 探讨微小核糖核酸miR-3619-5p对膀胱癌细胞系EJ和T24细胞增殖的影响.方法 2015年10月至2016年3月对膀胱癌细胞系EJ和T24细胞分别分为3组:阴性对照组转染随机序列dsControl,阳性对照组转染dsP21-322,实验组转染miR-3619-5p.实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测3组细胞p21、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)以及细胞周期依赖性激酶(CDK4、CDK6)mRNA的表达;蛋白质印迹法检测p21、CyclinD1、CDK4及CDK6蛋白的表达;流式细胞术测定3组的细胞周期分布;集落形成实验检测单个细胞克隆增殖情况;细胞增殖实验检测转染后各组细胞的增殖能力.结果 qPCR结果显示,阴性对照组EJ和T24细胞中p21、CyclinD1、CDK4、CDK6 mRNA的相对表达量△Ct分别为(11.4±1.3)和(12.8±1.6)、(5.8±1.2)和(6.2±1.2)、(4.1±0.8)和(7.8±1.2)、(9.7±1.1)和(10.8±1.2),实验组分别为(9.5±0.9)和(8.7±0.8)、(7.1±0.9)和(7.6±0.8)、(5.6±0.9)和(9.1±0.9)、(10.9±0.9)和(12.0±0.8),两组比较差异均有统计学意义(均P <0.05).蛋白质印迹法检测结果显示,实验组EJ和T24细胞中p21、CyclinD1、CDK4、CDK6蛋白相对表达量分别为(0.92 ±0.27)、(0.16±0.05)、(0.51±0.14)、(0.13±0.04)和(0.78±0.24)、(0.15±0.06)、(0.63±0.18)、(0.23±0.11);阴性对照组分别为(0.23±0.05)、(0.42±0.08)、(1.13 ±0.14)、(0.52±0.11)和(0.14 ±0.04)、(0.85±0.13)、(0.62±0.14)、(0.57±0.12),两组比较差异有统计学意义(P<0.05).流式细胞术检测结果显示,实验组EJ和T24细胞中G0/G1期细胞比例分别为(56.64±1.10)%和(62.33±0.98)%,阳性对照组分别为(65.07±0.94)%和(70.46±1.56)%,阴性对照组分别为(46.48±1.03)%和(65.07±0.94)%,实验组和阳性对照组与阴性对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05).细胞集落形成实验结果显示,阳性对照组EJ和T24细胞集落形成相对数量分别为(0.102±0.013)和(0.089±0.011),实验组分别为(0.119 ±0.012)和(0.110 ±0.013),阴性对照组分别为(0.218 ±0.016)和(0.210±0.017),实验组和阳性对照组与阴性对照组比较差异均有统计学意义(均P <0.05).细胞增殖实验结果显示,实验组EJ和T24细胞转染48 h、72 h、96 h的吸光度A值分别为(0.661 ±0.072)、(0.911 ±0.118)、(1.057 ±0.107)和(0.672 ±0.063)、(0.990 ±0.096)、(1.138 ±0.095),阳性对照组分别为(0.705±0.087)、(0.900±0.092)、(1.055 ±0.127)和(0.704 ±0.087)、(0.975 ±0.119)、(1.118±0.071),阴性对照组分别为(0.812 ±0.079)、(1.052 ±0.083)、(1.450±0.097)和(0.858 ±0.058)、(1.195±0.059)、(1.474±0.102),实验组和阳性对照组与阴性对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 miR3619-5p可以通过上调p21蛋白的表达,将细胞周期阻滞在G0/G1期,抑制膀胱癌细胞的增殖作用. 展开更多
关键词 微小核糖核酸 膀胱肿瘤 P21基因 核糖核酸激活
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染色质免疫共沉淀技术在前列腺癌细胞株中的优化
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作者 李森茂 余虓 +3 位作者 胡嘏 吴柏霖 王少刚 叶章群 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2635-2637,共3页
目的优化染色质免疫共沉淀技术(ChIP)的关键条件,以期提高实验效率。方法拟以前列腺癌细胞株PC-3、DUl45为实验材料,主要对裂解液体积、超声波的功率、脉冲及工作时间等方面进行调整,超声波破碎仪设置不同的条件(25%或30%功率,... 目的优化染色质免疫共沉淀技术(ChIP)的关键条件,以期提高实验效率。方法拟以前列腺癌细胞株PC-3、DUl45为实验材料,主要对裂解液体积、超声波的功率、脉冲及工作时间等方面进行调整,超声波破碎仪设置不同的条件(25%或30%功率,35s或50s间隔,3s或5s工作时间),然后解交联富集这些DNA片段,测定其浓度及纯度值,分别行聚合酶链反应(PCR)并用2%琼脂糖凝胶电泳检测结果。结果前列腺癌细胞株合适的ChIP实验条件为:(1)超声波最大功率为30%,设定每38s行3s或55s行5s超声工作时间,总的时间45~75s;(2)纯化后的DNA浓度〉10ng/μl、纯度值(A260/A280)〉1.45,可以得到比较好的实验结果。结论在前列腺癌细胞株PC-3、DU145中,选定合适的超声波频率后,总的超声工作时间为60s时,便可得到合适的DNA片段;洗脱液体积固定后,分2次离心要比1次离心所得到的DNA纯度值高,所得到的实验结果也越明显。 展开更多
关键词 前列腺癌 染色质免疫共沉淀
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