微RNA-27a介导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用机制

目的研究微RNA 27a(miR 27a)介导3T3 L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用机制。方法将3T3 L1细胞诱导分化为脂肪细胞,采用肿瘤坏死因子 α(TNF α)法建立3T3 L1脂肪细胞的胰岛素抵抗模型,检测miR 27a对3T3 L1细胞葡萄糖摄取的影响,蛋白质印迹法(Western Blot)检测miR 27a对胰岛素信号通路的影响。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)及双荧光素酶报告基因检测法检测miR 27a的作用靶点。结果miR 27a介导了3T3 L1脂肪细胞的胰岛素抵抗[正常对照组,模型组,miR 27a mimics+模型组,miR 27a inhibitor+模型组四组的吸光度值分别为(2.03±0.20),(1.28±0.27),(1.43±0.20),(1.97±0.18),P<0.01],蛋白质印迹法显示miR 27a抑制了胰岛素信号通路中胰岛素受体底物1(IRS1)及Akt蛋白的磷酸化。qPCR显示miR 27a抑制了过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达[对照组和mir 27a组的相对值分别为(1.00±0.08)和(0.59±0.14),P=0.0048],双荧光素酶报告基因检测验证了PPARγ为miR 27a的作用靶点[PPARγWT+miR NC,PPARγWT+miR 27a,PPARγMut+miR NC,PPARγMut+miR 27a四组的相对荧光值分别为(5.37±0.80)、(3.17±0.57)、(4.94±0.63)、(4.68±0.74),P<0.01]。结论miR 27a通过抑制胰岛素信号通路及靶向PPARγ介导3T3 L1细胞胰岛素抵抗。