创伤控制理论在急诊严重多发伤患者保肢治疗中的应用

观察急诊严重多发伤患者保肢治疗中应用创伤控制理论的效果。方法:选择急诊科收治的严重多发伤患者74例,均采用保肢治疗,随机抽取其中37例作为观察组,在治疗中应用创伤控制理论,观察两组患者保肢情况及感染情况,评价两组术后的膝关节功能及踝关节功能评分。结果:观察组患者保肢率、膝关节功能评分、踝关节功能评分均高于对照组,感染率低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:急诊严重多发伤保肢治疗中应用创伤控制理论后可提升保肢成功率,减少感染,恢复肢体功能,提升患者生活质量。

miR-381对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制

目的探讨miR-381对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法实时定量PCR(qRT-PCR)检测人正常胰腺导管上皮细胞系HPDE6-C7及胰腺癌细胞系PANC-1、AsPC-1、Capan-1、BxPC-3中miR-381的表达量,将PANC-1细胞系分成miR-381模拟物组和阴性对照组,采用Lipofectamine 2000分别转染miR-381mimics和scramble序列,转染24h后,qRT-PCR测定两组细胞中miR-381的表达水平,CCK-8法测定细胞的增殖能力,细胞划痕实验和Transwell实验检测两组细胞的迁移和侵袭能力,qRT-PCR和Western blot测定两组细胞肝受体类似物1(liver receptor homolog-1,LRH-1)mRNA和蛋白质的表达水平。结果 miR-381在胰腺癌细胞系PANC-1、AsPC-1、Capan-1及BxPC-3中的表达量显著低于HPDE6-C7(均P<0.05)。转染24h后,miRNA-381模拟物组miR-381的表达水平显著高于阴性对照组(P<0.01)。CCK-8实验示:miR-381模拟物组在转染后3、4d,A450nm值显著低于阴性对照组。miR-381模拟物组划痕愈合率显著低于阴性对照组[(32.8±2.3)%vs.(61.9±5.6)%,P<0.05];miR-381模拟物组侵袭细胞数显著少于阴性对照组[(85.1±3.9)vs.(215.3±5.1),P<0.01]。miR-381模拟物组LRH-1mRNA相对表达量显著低于阴性对照组[(0.43±0.04)vs.1.0,P<0.01];miR-381模拟物组LRH-1蛋白相对表达量显著低于阴性对照组(P<0.05)。结论 miR-381在胰腺癌细胞系中低表达,miR-381过表达可抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与下调LRH-1表达有关。

MicroRNA-203抑制骨肉瘤细胞增殖和迁移的机制研究

目的探讨microR NA-203(miR-203)对骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响及机制。方法通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定miR-203在正常成骨细胞hF OB及骨肉瘤细胞系中的表达,将MG-63细胞系分成miR-203组、Scramble组、RAB22A组、NC组,Lipofectamine 2000分别转染miR-203 mimics、Scrambles、pcD NA3.1-RAB22A、空白对照质粒;通过噻唑蓝(MTT)实验测定增殖能力,细胞划痕实验测定迁移能力;通过Target Scan和双荧光素酶实验预测及验证miR-203与RAB22A基因的靶向调节关系;RT-PCR测定RAB22A mR NA表达水平;Western blot测定E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。结果 miR-203在骨肉瘤细胞系SAOS-2、SOSP-9607、U2OS及MG-63中较hF OB细胞系表达降低。MTT显示,在培养48和72 h后,miR-203组相对细胞数少于Scramble组(P<0.05);培养24 h后,Scramble组细胞相对划痕面积小于miR-203组(P<0.05);双荧光素酶实验示,miR-203与RAB22A基因存在靶向调节关系。RAB22A组相对划痕面积小于NC组(P<0.05);MTT显示,在培养24、48和72 h后,RAB22A组相对细胞数多于NC组(P<0.05);RAB22A组与NC组比较,E-cadherin下调表达,N-cadherin上调表达,Vimentin上调表达。结论 miR-203通过下调RAB22A基因表达,抑制上皮间质转化,进而抑制骨肉瘤细胞增殖与迁移。

miR-186对胶质母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响及机制

目的研究转染miR-186对胶质母细胞瘤细胞增殖能力的影响并探讨作用机制。方法采用荧光定量PCR检测miR-186在胶质母细胞瘤细胞系U251、U87-MG及正常星形胶质细胞系HA1800中的表达水平,将U251细胞分为miR-186模拟物组和对照组,分别转染miR-186模拟物和阴性随机对照序列,并用荧光定量PCR检测miR-186在两组中的表达量。采用CKK-8法检测两组细胞细胞增殖能力,流式细胞仪测定两组细胞凋亡率,Western blot分析Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9及Cyclin D1蛋白的表达。结果 miR-186低表达于胶质母细胞瘤细胞系U251及U87-MG,高表达于正常星形胶质细胞系HA1800。转染24、48、72及96h后,miR-186模拟物组细胞增殖(A450nm值)低于对照组(均P<0.05)。转染48h后,miR-186模拟物组凋亡率高于对照组;miR-186模拟物组Caspase-3、9的表达量高于对照组(均P<0.01),Caspase-8与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。miR-186模拟物组Cyclin D1表达水平较对照组明显降低(P<0.01)。结论miR-186抑制胶质母细胞瘤细胞增殖能力,并诱导凋亡,其机制可能与上调Caspase-3、9,下调Cyclin D1有关。

茶多酚联合顺铂对肺癌细胞A549增殖和凋亡的影响

目的观察茶多酚(TP)、顺铂(DDP)及两者联合对人肺癌细胞A549增殖和凋亡的影响,探讨TP联合DDP联合影响A549细胞生长的机制。方法人肺癌细胞A549经TP、DDP单独或联合处理后,将A549细胞分成TP组、DDP组、TP联合DDP组(TP+DDP组)及空白对照组,MTT法检测细胞增殖情况,Annexin V/PI双染流式细胞术分析细胞凋亡,Western blot检测细胞中p-AKT和p-ERK1/2的表达。结果 TP组、DDP组及TP+DDP组细胞增殖率分别为(91.0±3.6)%、(84.3±5.0)%和(70.3±4.2)%,TP+DDP组的细胞增殖率与DDP组比较,差异有统计学意义(P <0.05),TP+DDP组低于DDP组;流式细胞术示TP组细胞凋亡率无明显影响,TP+DDP组凋亡率与DDP组比较,差异有统计学意义(P <0.05);DDP组细胞中p-AKT、p-ERK1/2蛋白表达降低,TP联合DDP组中p-AKT、p-ERK1/2的蛋白表达与DDP组比较,差异有统计学意义(P <0.05),TP+DDP组低于DDP组。结论 TP与DDP联合用药可增强DDP的抑制增殖和促进凋亡作用,其机制可能与下调AKT的表达和ERK1/2蛋白的磷酸化有关。

肝细胞癌中miR-574-5p的表达与作用及其与预后的关系

背景与目的:研究表明,miR-574-5p与多种肿瘤预后密切相关,但尚未见miR-574-5p与肝细胞癌(HCC)的关系报道。因此,本研究初步探讨miR-574-5p在HCC中表达及其与患者预后的关系。方法:用qRT-PCR检测130例HCC与癌旁组织及HCC细胞系(HepG2、MHCC-97H)与正常肝细胞系(L-02)中miR-574-5p的表达,用X-tile软件在患者生存数据中确定miR-574-5p表达量的最佳截断值后,分析miR-574-5p表达水平与患者临床病理因素于术后生存率的关系。分析HCC患者预后的影响因素。用TargetScan预测miR-574-5p的靶基因,并用双荧光素酶报告基因实验验证与Western blot实验确证。结果:miR-574-5p表达水平在HCC癌组织中明显高于癌旁组织,在HCC细胞系中明显高于正常肝细胞系(均P<0.05)。miR-574-5p表达与TNM分期(P=0.002)和分化程度(P=0.000)明显有关。miR-574-5p高表达组的总生存率与无瘤生存率均明显低于miR-574-5p低表达组(均P<0.01)。单因素与多因素分析结果显示,miR-574-5p高表达(HR=4.101,95%CI=1.348~8.968,P=0.03)、III~IV期(HR=5.403,95%CI=1.266~13.860,P=0.02)及中低分化(HR=3.655,95%CI=2.165~6.984,P=0.00)是HCC患者总生存率的独立危险因素,miR-574-5p高表达(HR=7.168,95%CI=1.144~18.260,P=0.01)与III~IV期(HR=7.436,95%CI=1.123~20.916,P=0.00)是HCC患者无瘤生存率的独立危险因素。TargetScan软件发现FOG2存在和miR-574-5p直接结合位点,双萤光素酶报告基因实验表明FOG2是miR-574-5p的直接靶基因。Western blot结果显示,FOG2蛋白在HCC组织中的表达量低于癌旁组织;Pearson相关分析表明,HCC组织中miR-574-5p表达水平与FOG2蛋白表达水平呈负相关(r=-0.499,P<0.05)。结论:miR-574-5p在HCC中普遍升高,miR-574-5p高表达可作为HCC患者预后不良的分子标志物,miR-574-5p可能通过下调其靶基因FOG2发挥促癌作用。