狼疮肾炎中NGAL/NGALR的表达及临床意义

目的探讨中性粒细胞明胶酶相关性载脂蛋白(neutrophi gelatinase-associated lipocalin,NGAL)及其膜受体(neutrophi gelatinase-associated lipocalin receptor,NGALR)在狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)中的表达及其临床意义。方法选择84例系统性红斑狼疮患者分为LN组和非LN组,另外组织标本对照选取同期武汉市中心医院泌尿外科肾癌切除术中癌旁正常组织。采用酶联免疫吸附试验检测LN患者及非LN患者血清及尿液中NGAL/NGALR的表达水平,免疫组化法检测LN患者与正常对照肾组织中NGAL/NGALR的表达,系统性红斑狼疮活动性指数评分采用1985年建立的SLEDAI-2000评分系统。采用SPSS 19.0软件进行数据分析,两组间比较采用t检验、多组间比较采用方差分析,相关性分析用Spearman等级相关分析法。结果 LN患者血液及尿液中NGAL/NGALR的表达显著高于非LN患者,差异具有统计学意义(P<0.01);尿液中NGAL/NGALR的表达水平与系统性红斑狼疮活动性指数评分呈正相关(P<0.01);LN患者肾组织中NGAL/NGALR的表达较正常肾组织增高,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 NGAL/NGALR在LN患者血液、尿液及肾组织中的异常表达及其与疾病活动程度的相关,提示NGAL/NGALR可能参与LN的发生发展,可辅助LN的临床诊断,同时为进一步研究NGAL/NGALR在LN的发病机制提供理论依据,为LN的研究提供新视点。

长春花碱与NVP-BEZ235联合制剂诱导人肾肿瘤细胞凋亡活性的研究

目的作为成年人中最常见的肾癌,肾细胞癌对常规放疗和化疗均不敏感,因此急需研发新的治疗手段。长春花碱和NVP-BEZ235均用于多种癌症的治疗,但是其二者的联合治疗肾细胞癌的效果如何,仍有待研究。本文以Caki细胞系为模型,研究长春花碱与NVPBEZ235联合制剂诱导人肾肿瘤细胞凋亡的活性及可能机制。方法通过对人肾肿瘤细胞系Caki细胞系进行模拟处理(阴性对照)或者长春花碱、NVP-BEZ235以及长春花碱+NVPBEZ235处理24h后,收集细胞样品,分别通过Annexin V染色检测细胞凋亡情况;通过Western杂交检测Caspase-3以及Mcl-1蛋白表达水平,以及通过RT-PCR检测Mcl-1的RNA表达水平。结果长春花碱和NVP-BEZ235单独使用时,并不能显著诱导Caki细胞凋亡,而长春花碱+NVP-BEZ235则可以凋亡细胞比例达到60%左右。进一步的浓度梯度实验表明,二者联合使用诱导凋亡的能力与长春花碱和NVP-BEZ235的浓度呈正相关。研究表明,长春花碱和NVPBEZ235单独使用时,并不对Caspase-3的表达水平产生明显影响,而长春花碱+NVP-BEZ235联合使用时,Caspase-3的水平显著上调。对Mcl-1的检测发现,长春花碱和NVP-BEZ235单独使用和联合作用均未使Mcl-1的RNA水平产生明显变化。两种药物单独使用时,也不对Mcl-1的蛋白水平产生明显影响,但是联合使用时显著地降低了Mcl-1的蛋白表达水平。结论长春花碱与NVP-BEZ235联合制剂能够诱导人肾肿瘤细胞凋亡,并且其诱导凋亡机制与上调Caspase-3水平以及下调Mcl-1水平相关。