孕期邻苯二甲酸酯复合暴露与双胞胎出生体重差异的关联研究

目的探讨孕期邻苯二甲酸酯(phthalates,PAEs)复合暴露与双胞胎出生体重差异的关联。方法采用前瞻性队列研究设计,在2013年1月至2016年12月,招募了来自武汉双胞胎出生队列(The Wuhan Twin Birth Cohort,WTBC)的289名双胞胎妊娠孕妇,使用高效液相色谱串联质谱检测孕妇孕早期、中期和晚期尿液中8种PAEs代谢物浓度,包括邻苯二甲酸单乙酯(monoethyl phthalate,MEP)、邻苯二甲酸单异丁酯(monoisobutyl phthalate,MiBP)、邻苯二甲酸单丁酯(monobutyl phthalate,MBP)、邻苯二甲酸单苄基酯(monobenzyl phthalate,MBzP)、邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]、邻苯二甲酸单(2-乙基-5-氧己基)酯[mono(2-ethyl-5-oxohexyl)phthalate,MEOHP]、邻苯二甲酸单(2-乙基-5-羧基戊基)酯[mono(2-ethyl-5-hydroxyhexyl)phthalate,MEHHP]、邻苯二甲酸单(2-乙基-5-羧基戊基)酯[mono(2-ethyl-5carboxypentyl)phthalate,MECPP]。采用多重线性回归分析这8种PAEs代谢物暴露与双胞胎出生体重差的关系,分位数g计算回归(quantile g-computation,qgcomp)和加权分位数和回归(weighted quantile sum regression,WQS)来评估PAEs复合暴露与双胞胎出生体重差异的关系。结果研究对象尿液中PAEs代谢物检出率均超过80.00%,其中MBP检出率最高为97.00%,整个孕期的浓度中位数是42.08μg/L;检出率最低的是MBzP为84.43%,整个孕期的浓度中位数是0.46μg/L。双胞胎体重差的中位数为210 g。校正多个潜在混杂因素后,多重线性回归结果表明,整个妊娠期,MEP、MBP、MEHP暴露与双胞胎出生体重差正相关。基于WQS的分析结果显示,整个孕期PAEs复合暴露与双胞胎体重差间存在正相关,qgcomp分析结果表明8种PAEs混合物每增加一个四分位数,双胞胎出生体重差增加3.88%(95%CI:0.25%~7.64%)。结论整个孕期PAEs的复合暴露可增大双胞胎出生体重差。

脐带血全氟及多氟烷基化合物暴露对新生儿促甲状腺激素水平的影响

目的 分析脐带血中全氟及多氟烷基化合物(PFASs)暴露水平对新生儿促甲状腺激素(TSH)浓度的影响。方法选取2013—2014年加入武汉“健康宝贝”出生队列的母婴(n=1 015)作为研究对象。使用超高效液相色谱—串联质谱法(UPLS-MS/MS)检测新生儿脐带血样本中13种PFASs浓度。通过新生儿疾病筛查报告获取新生儿足跟血TSH浓度检测值,采用多重线性回归模型和加权分位数回归模型(WQS)分别分析母亲妊娠期PFASs单一暴露和混合暴露对新生儿TSH浓度的影响。结果 被检测的1 015例脐带血样本中,有9种PFASs检出率超过95%,其中全氟辛酸(PFOA)和全氟辛基磺酸(PFOS)的浓度水平较高,中位数浓度分别为1.60和4.04 ng/mL。TSH的浓度中位数为3.24μIU/mL。多重线性回归分析结果表明,全氟丁基磺酸(PFBS)暴露浓度每增加1 ng/mL,新生儿TSH浓度降低15.82%(ΔTSH%=-15.82%, 95%CI:-24.39%,-6.27%,P<0.01)。进行新生儿性别分层后,PFBS与8∶2全氟聚醚磺酸(8∶2CI-PFESA)暴露浓度每增加1 ng/mL,男婴TSH水平分别下调24.93%(ΔTSH%=-24.93%, 95%CI:-35.87%~-12.13%,P<0.01)和18.63%(ΔTSH%=-18.63%, 95%CI:-32.70%~-1.62%,P<0.05),而女婴TSH无显著改变。除此以外,其它各类PFASs暴露与男女婴TSH水平之间均无显著统计学关联。基于WQS的分析结果显示,11种PFASs混合物暴露浓度每增加1 ng/mL,新生儿TSH浓度相应降低34.30%(ΔTSH%=-34.30%,95%CI:-54.36%~-5.41%,P<0.05),其中PFBS和8∶2CI-PFESA对联合暴露效应的贡献最大,权重分别为49.40%和37.60%。结论 妊娠期PFASs(PFBS和8∶2CI-PFESA)暴露对新生儿TSH浓度水平具有显著的影响,并且这种影响对男性新生儿更为显著。

高危型人乳头瘤病毒16 E6蛋白通过外泌体传递热休克蛋白70调控巨噬细胞介导宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的初步探讨高危型人乳头瘤病毒16(human papillomavirus 16,HPV16)E6蛋白促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的潜在免疫调控分子机制。方法构建HPV16 E6蛋白过表达慢病毒并感染C33A细胞,获得C33A-E6稳定细胞系,采用qRT-PCR和Western blot法检测C33A和C33A-E6组细胞内HSP70的表达。放线菌素D(ActD)和放线菌酮(CHX)处理细胞后不同时间采用qRT-PCR和Western blot法分别检测HSP70 mRNA和蛋白质降解速率。超速离心法提取两组细胞外泌体,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外泌体中HSP70含量。提取C33A和C33A-E6细胞干扰HSP70表达后的外泌体,ELISA检测经外泌体处理的THP-1细胞培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的表达水平。将外泌体处理的THP-1细胞与C33A细胞共培养,CCK-8法检测C33A细胞增殖。Transwell小室评估C33A细胞侵袭和迁移状态。结果与C33A细胞相比,C33A-E6细胞HSP70 mRNA水平显著增高(P<0.05),但蛋白质水平没有明显变化(P>0.05)。经ActD/CHX处理不同时间的两组细胞中HSP70 mRNA和蛋白质降解速率差异无统计学意义(P>0.05),但C33A-E6组分泌的外泌体中HSP70含量明显增高(P<0.001)。C33A-E6细胞分泌的外泌体可增强THP-1细胞分泌IL-6、TNF-α和IL-10的水平(P<0.001),并且外泌体处理后的THP-1细胞可促进C33A细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.001);而干扰C33A-E6细胞中HSP70的表达可显著降低外泌体诱导的THP-1细胞分泌IL-6和IL-10及THP-1细胞对C33A细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用(P<0.001)。结论高危型HPV16 E6蛋白可上调宫颈癌细胞外泌体中HSP70的表达,进而促进巨噬细胞分泌IL-6和IL-10,并介导宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭。