人退变椎间盘髓核组织中miR-146a的表达及对NP细胞增殖、凋亡和炎性细胞因子的影响作用机制

目的检测人退变椎间盘髓核组织中miR-146a的表达变化,并探讨其可能的作用机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人退变腰椎间盘髓核组织中miR-146a表达。用脂多糖(LPS)刺激人髓核(nucleus pulposus,NP)细胞模拟椎间盘变性,qRT-PCR检测NP细胞中miR-146a的表达变化。将miR-146a mimics或miR-146a inhibitor转染至NP细胞,然后LPS刺激NP细胞,观察miR-146a对NP细胞增殖活性、凋亡、TLR4蛋白表达及IL-1β,TNF-α和IL-6等炎性因子水平的影响。结果miR-146a在椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IVDD组)椎间盘髓核组织中表达(0.65±0.12)明显低于对照组(1.01±0.10),miR-146a在LPS组NP细胞中表达(0.29±0.11)明显低于阴性对照组(1.06±0.07),差异均有统计学意义(t=11.856,10.229,均P<0.01)。与阴性对照组比较,LPS组上清液中的IL-1β,TNF-α和IL-6含量明显升高,差异均有统计学意义(t=15.572~23.354,均P<0.001)。上调NP细胞miR-146a表达,能够提高LPS刺激的NP细胞的增殖活性(t=4.436~7.995,均P<0.05),降低其凋亡率(t=9.255,P=0.001),降低TLR4蛋白(t=5.881,P=0.004)和IL-1β,TNF-α和IL-6等炎性细胞因子水平(t=8.854~10.772,均P<0.01);而下调NP细胞miR-146a表达则出现相反的结果(t=2.977~6.777,均P<0.05)。结论miR-146a在退变椎间盘髓核组织中表达降低,miR-146a可能能够通过靶向TLR4调控NP细胞的增殖、凋亡和炎症反应,为椎间盘退变的生物治疗提供了新的方向。