腔镜胆总管切开术与内镜联合腹腔镜治疗胆总管结石的临床分析

目的对腹腔镜胆总管切开术与内镜联合腹腔镜治疗胆囊结石合并胆总管结石的疗效进行比较和评价。方法回顾性分析2002年7月至2007年7月,20例行腹腔镜胆囊切除、胆总管探查(LCD组),15例行腹腔镜胆囊切除联合内镜乳头括约肌切开取石术(EST+LC组)患者的手术及术后情况。结果LCD组近期并发症发生率低于EST+LC组(20%vs 5%,P<0.05),LCD组平均住院日和平均住院费用均明显低于EST+LC组(P<0.05),手术成功率两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜胆总管切开术是治疗胆囊结石并胆总管结石疗效肯定的微创手术。

腹腔镜辅助结直肠癌切除术21例报告

目的:探讨腹腔镜辅助结直肠癌切除术的安全性和可行性。方法:回顾性分析21例腹腔镜辅助结直肠癌切除病例的临床资料。结果:21例患者均无中转开腹,术中出血量50～100 mL,术后72 h内肠功能恢复,平均术后住院时间10.5 d,1例患者因肝、肺转移死亡,无穿刺口及皮肤切口肿瘤种植病例发生,效果满意。结论:腹腔镜辅助结直肠癌切除术切口小,减少了并发症的发生,切口种植率不高,根治效果良好,是一种安全、可行的手术方式,基本可达到与开腹手术相同的治疗效果。

胃癌组织中Survivin外显子1甲基化状态的分析

目的:研究胃癌组织Survivin外显子1去甲基化与Survivin mRNA表达以及临床病理参数之间的关系。方法:25例胃癌及与其配对的正常胃组织DNA经甲基化敏感性限制性内切酶HpaⅡ和MspⅠ处理后用SYBR GreenⅠ实时荧光PCR对Survivin外显子1进行检测,Survivin mRNA的表达水平采用实时荧光定量PCR的方法进行检测。结果:Survivin外显子1去甲基化率在胃癌组织和癌旁组织分别为96.0%(24/25)和20.0%(5/25),χ2=29.639,P<0.001。在25例胃癌组织中有22例(88.0%)发生Survivin mRNA过表达,并且表达与去甲基化呈正相关,rs=0.5528,P=0.00416。没有发现去甲基化与年龄、性别、肿瘤大小、病理分级、临床分期和转移与否等病理参数之间存在统计学上的相关性,P>0.05。结论:Survivin外显子1去甲基化增强Survivin mRNA的表达,可能是胃癌发生和发展过程中的早期事件。

血管腔内激光治疗下肢浅静脉曲张

目的研究和评价静脉腔内激光治疗下肢浅静脉曲张的临床效果。方法采用激光治疗仪行静脉腔内激光治疗下肢浅静脉曲张患者96例(共102条患肢),对比观察患者术前、术后症状和体征。结果96例患者临床症状消失,随访期间无复发。结论静脉腔内激光治疗术是治疗下肢浅静脉曲张的理想方法。

重症急性胰腺炎84例治疗体会

目的探讨重症急性胰腺炎的合理治疗方案。方法以1999年1月～2004年12月间收治的84例重症急性胰腺炎作为研究对象,比较手术组与非手术组的主要并发症和死亡率。结果手术组死亡率和胰瘘的发生率明显高于非手术组。结论合理把握重症急性胰腺炎的手术适应证和手术时机是提高治愈率和降低死亡率的关键。

高毒株幽门螺杆菌与门静脉高压症胃病的关系

目的探讨高毒株幽门螺杆菌与门脉高压症胃病(PHG)的关系。方法对2003年3月以来就诊的80例确诊为肝硬化门脉高压患者进行幽门螺杆菌菌株检测并且予以分析。结果80例确诊为PHG患者中幽门螺杆菌感染率为70%,其中重度PHG胃病患者18例,出现呕血和黑便和(或)血便的患者9例均为高毒株幽门螺杆菌感染者。结论高毒株幽门螺杆菌感染率与PHG患者的病情严重程度呈正相关。

重症急性胰腺炎84例治疗体会

目的:探讨重症急性胰腺炎(SAP)的合理治疗方案。方法:收治的84例重症急性胰腺炎作为研究对象,比较手术组与非手术组的主要并发症和死亡率。结果:手术组死亡率和胰瘘的发生率明显高于非手术组。结论:合理把握重症急性胰腺炎的手术适应症和手术时机是提高治愈率和降低死亡率的关键。

快速康复外科在结直肠癌手术患者中的临床研究

目的对围手术期分别应用快速康复外科（FTS）方法和传统治疗方法的结直肠癌患者在临床疗效和住院费用方面进行对照研究。方法随机选取50例按传统方法进行围手术期处理的结直肠癌患者作为对照组，应用FTS方案同期50例结直肠癌患者为FTS组，比较两组患者术后首次排气时间、手术并发症的发病率、住院时间、住院总费用等多项指标。结果与对照组相比，FTS组术后首次排气时间较早，住院时间缩短，平均住院费用降低。患者恢复快，效果满意．两组患者并发症的发病率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论结直肠癌患者围手术期行FTS方案治疗是安全、有效的方法，术后康复加快，住院时间缩短，医疗费用降低。

3p21.3区域相关抑癌基因——RASSF1A、BLU和SEMA3B在肝癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨3p21.3区域相关基因--RASSF1A、BLU和SEMA3B基因转录表达与肝细胞癌发生及预后的关系.方法 用RT-PCR的方法 检测RASSF1A、BLU和SEMA3B基因在79例肝癌组织以及相应的癌旁组织中的表达.结果 （1）肝细胞癌组织中三种基因的表达缺失率均明显高于癌旁组织（P＜0.05）;（2）合并有肝硬化或者乙肝表面抗原阳性的病人,其肝癌组织中三种基因的表达失活率显著高于无肝硬化或乙肝表面抗原阴性病人（P＜0.05）;（3）低分化型癌组织中三种基因缺失率均高于中、高分化型,但SEMA3B的差异无显著性（P＞0.05）;（4）年龄、性别、肝功能分级和血清AFP值对三种基因表达的影响无显著性差异（P＞0.05）.结论 肝癌组织中3p21.3区域相关抑癌基因转录表达缺失,可能参与调控肝癌的发生、发展过程,并影响其预后.

组织因子在移植物抗宿主病患者内皮损伤中的作用机制研究

目的探讨组织因子（TF）在移植物抗宿主病（GVHD）血管内皮损伤中的作用及其机制。方法用实时定量PCR和Western blot方法检测TF在异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）和自体造血干细胞移植（auto-HSCT）小鼠各组织中基因和蛋白水平的表达。用流式细胞术、实时定量PCR和Western blot方法分别检测异基因CD4^＋或CD8^＋ T淋巴细胞对脐静脉内皮细胞（HUVEC）中TF、VCAM-1、TNF-α、IFN-γ、IL-6以及MAPK表达的影响，观察抗TF抗体、p38MAPK和JNK阻滞剂对异基因T淋巴细胞诱导的HUVEC中细胞因子表达的影响。结果①在allo—HSCT后发生GVHD小鼠的皮肤、胃、小肠和肝组织中，TF在基因水平的表达为对照组的（15．1±2．1），（5．5±1．4），（9．7±2．3），（14．3±2．9）倍，TF蛋白的表达水平分别为对照组的（13．5±2．7），（6．2±0．9），（7．9±1．6），（15．3±3．2）倍；②异基因T淋巴细胞可显著诱导HUVEC中TF、VCAM-1、TNF—α、IFN-γ和IL-6的表达；异基因T淋巴细胞作用后，HUVEC中p38MAPK和JNK磷酸化增强，而磷酸化ERK无变化。p38MAPK和JNK阻滞剂可显著降低异基因CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞诱导HUVEC的TF表达。抗TF抗体和p38MAPK、JNK阻滞剂均可下调异基因T淋巴细胞诱导的HUVEC中VCAM-1、TNF-α、IFN-γ和IL-6的表达。结论TF通过细胞内信号通路p38MAPK和JNK参与了GVHD导致的血管内皮细胞损伤和活化。

异基因CD8^＋T淋巴细胞诱导血管内皮细胞凋亡的分子机制

目的研究异基因CD8^＋T淋巴细胞诱导血管内皮细胞凋亡的分子机制。方法磁珠分选正常人外周血CD8^＋T淋巴细胞，膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（FITC）试剂盒检测异基因CD8^＋T淋巴细胞作用后人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和人皮肤微血管内皮细胞（HDMEC）凋亡率，RT—PCR检测蛋白酶激活受体1（PAR-1）mRNA表达，Western印迹检测内皮细胞PAR-1、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和半胱氨酸蛋白水解酶（Caspase）-3表达。结果HUVEC与HDMEC在基因和蛋白水平均有PAR-1表达。异基因CD8^＋T淋巴细胞作用24h和48h，HUVEC凋亡率分别为51．7％±4．1％和29．4％±3．3％，HDMEC凋亡率分别为28．9％±2．2％和15．2％±1．8％，均显著高于对照组（均P〈0．01）；SFLLRN（PAR-1激动剂）诱导两种内皮细胞凋亡的作用与异基因CD8^＋T淋巴细胞的差异无统计学意义（P〉0．05）。异基因CD8^＋T淋巴细胞作用后，HUVEC与HDMEC磷酸化p38MAPK表达均高于对照组（均P〈0．05），30min时分别为对照组的9．8、6．3倍，Caspase-3裂解增加，峰值分别为对照组的5．1、4．3倍；SFLLRN作用后，HUVEC与HDMEC磷酸化p38MAPK表达亦均高于对照组（均P〈0．05），30min时分别为对照组的9．8、6．3倍，Caspase-3裂解增加，峰值分别为对照组的5．7、2．9倍。JNK磷酸化无明显变化。PAR-1抗体和p38MAPK抑制剂（SB203580）可显著降低异基因CD8^＋T淋巴细胞诱导的内皮细胞凋亡（P〈0．01）。结论异基因CD8^＋T淋巴细胞通过PAR-1途径引起细胞内p38MAPK激活、Caspase-3裂解，从而诱导血管内皮细胞凋亡。

腹水瘤采集方法的改进

腹水瘤是动物实验特别是鼠的实验中较为常用的肿瘤细胞保存方法。我们在用小鼠做肿瘤实验时，也使用了腹水瘤的方法来保存肿瘤细胞，并在实验过程中对其腹水瘤的采集方法做了一些改进。

蛋白酶激活受体-1，2在小鼠急性移植物抗宿主病模型中的表达

目的研究蛋白酶激活受体-1，2（PAR-1，2）在小鼠急性移植物抗宿主病（aGVHD）模型中的表达。方法建立小鼠异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后aGVHD模型，并用同基因HSCT小鼠作为对照。观察小鼠aGVHD表现；实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白印迹和免疫组织化学法检测移植小鼠各种组织中PAR-1，2在基因和蛋白水平的表达。结果allo-HSCT小鼠在移植后18-28d出现了典型的aGVHD临床和病理表现。PAR-1基因在allo—HSCT组小鼠的皮肤、肝脏和小肠组织中的相对表达量较对照组显著增高（皮肤：0．039±0．013和0．008±0．002，P〈0．01；肝脏：0．165±0．084和0．017±0．006，P〈0．01；小肠：0．215±0．109和0．016±0．009，P〈0．01）；PAR-2基因在a11o-HSCT组小鼠的肝脏和小肠组织中表达较对照组增高（肝脏：0．010±0．003和0．003±0．002，P〈0．01；小肠：0．006±0．002和0．003±0．002，P〈0．05）；PAR-1，2基因在其余器官组织中的表达与对照组比较，差异无统计学意义。PAR-1，2在蛋白水平的表达与基因表达的检测结果一致。免疫组织化学染色显示PAR-1，2主要在aGVHD靶器官的上皮细胞和内皮细胞中表达增强。结论PAR-1，2表达增高很有可能参与异基因造血干细胞移植后aGVHD的病理生理过程。

FLAG方案和IA方案对P-gp阳性和阴性急性髓细胞白血病细胞的作用

目的探讨FLAG和IA方案对P-gp阳性和阴性急性髓细胞白血病（AML）细胞增生抑制作用的优劣及其机制。方法流式细胞仪检测K562和K562／A02细胞的P-gp表达，MTT法检测FLAG和IA方案对K562和K562／A02细胞的增生抑制作用，高效液相色谱法检测细胞内Ara-CTP、Ara-C水平，实时定量PCR检测细胞hENT1基因表达。结果K562和K562／A02细胞的P-gp阳性率分别为（1．32±0．24）％和（97．66±3．77）％，两种化疗方案对细胞的P-gp表达无影响。FLAG方案对K562细胞的增生抑制作用较IA方案差[（73．17±13．20）％对（84．41±9．33）％，P〈0．05]，而对K562／A02细胞的增生抑制作用优于IA方案[（70．55±11．32）％对（48．46±12．81）％，P〈0．01]。FLAG方案作用时AML细胞内Ara-CTP、Ara-C水平及人平衡核苷载体（hENT1）基因表达均较IA方案作用时升高（P〈0．05）。结论P-gp阳性AML细胞对FLAG方案较IA方案更敏感。氟达拉滨对Ara-C的生化调节可能是其主要机制。