泪道阻塞性疾病治疗方法新进展

泪道阻塞疾病为眼科常见病,传统治疗多采用鼻腔泪囊吻合术及泪道探通术。近年来随着新材料新技术的发展,新型泪道支架和泪道内窥镜得以越来越多的应用于泪道阻塞疾病的治疗。传统的鼻腔泪囊吻合术在经过多年的实践和改进后,效果稳定可靠;由于鼻内窥镜技术的发展,鼻腔泪囊吻合术也得以在内镜下治疗;泪道探通术简单易行,受器械及场地影响较小,结合激光置管等辅助治疗疗效肯定,新型材料支架的应用也为泪道探通术提供了新的发展前景;国外发达国家近年已开始将经泪小点泪道内窥镜用于对泪道阻塞性疾病的检查和治疗,使手术医师有了更多的选择。泪道内窥镜技术在阻塞性泪道疾病方面具有良好的应用前景。

多层羊膜移植治疗角膜溃疡性穿孔(英文)

目的: 观察多层羊膜移植治疗角膜溃疡性穿孔的临床效果, 了解此方法的有效性、安全性和局限性。方法: 对 6 例(6 眼)角膜溃疡性穿孔的患者采用多层羊膜移植治疗, 溃疡穿孔范围 0.5￣2mm。用羊膜填塞穿孔、铺平溃疡并覆盖于溃疡表面。术后随访 5～19mo。结果: 术后 1d6 位患者的前房均形成, 随访期间深度正常且始终未消失。羊膜植片手术后 3wk 上皮化。手术后 1mo内, 穿孔区角膜厚度逐渐增加, 溃疡周边的浸润也逐渐吸收。术后 2mo 溃疡瘢痕愈合, 有新生血管长入, 表面光滑;溃疡区的角膜厚度稳定, 恢复正常。术后 6 例视力均无提高。随访期间溃疡未出现复发及严重的并发症。结论: 多层羊膜移植治疗较小的角膜溃疡性穿孔是有效、安全的, 但此方法术后角膜溃疡是瘢痕愈合。

金丝桃素对兔急性高眼压视网膜的保护作用

目的探讨蛋白激酶C抑制剂金丝桃素对兔急性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响以及对视网膜的保护作用。方法将新西兰大白兔随机分成处理组、对照组和正常组。处理组向玻璃体腔内注射0.1mL的金丝桃素,对照组向玻璃体腔内注射0.1mL生理盐水,48h后经前房灌注升高眼压达100mmHg(1kPa=7.5mmHg),持续90min,24h后取材。正常组不做上述处理直接取材。高效液相色谱法检测视网膜谷氨酸含量;光镜、电镜观察视网膜超微结构的变化,并采用医学图像分析系统计数视网膜神经节细胞(retinalganglioncells,RGC)、测量视网膜总厚度及内层厚度;TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡。结果处理组、对照组和正常组视网膜谷氨酸含量分别为(56.6±2.1)×10-6mmol.g-1、(84.1±2.7)×10-6mmol.g-1和(17.1±2.3)×10-6mmol.g-1,处理组视网膜谷氨酸含量明显低于对照组(P<0.05);3组长450μm视网膜片段的RGC数分别为(22.30±0.83)、(15.50±0.56)和(25.50±0.67),处理组和正常组RGC数均明显高于对照组(P<0.05),而RGC层及内核层内凋亡的细胞数明显少于对照组。结论金丝桃素能减缓兔急性高眼压视网膜谷氨酸水平的升高、减轻RGC的凋亡,对视网膜具有一定的保护作用。

膦甲酸钠滴眼液治疗上皮型单纯疱疹病毒性角膜炎

目的:探讨膦甲酸钠滴眼液治疗上皮型单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis,HSK)的近中期疗效。方法:选取2008-03/2009-12在钟祥市人民医院眼科门诊确诊的60例60眼上皮型HSK患者,将其随机分为对照组和试验组两组。对照组采用更昔洛韦滴眼液,8次/d;试验组采用膦甲酸钠滴眼液,6次/d,用药时间均为14d。观察治疗后3,7,10,14d的角膜溃疡面积、眼部症状体征评分,统计治愈率。随访2a,统计随访期间上皮型HSK的复发率。结果:两组患者治疗前的一般情况、症状体征评分无显著差异(P>0.05)。与治疗前相比,治疗后两组患者的角膜溃疡面积、眼部症状体征评分均明显下降(P<0.05),但两组之间的角膜溃疡面积、眼部症状体征评分和治愈率均无明显差异(P>0.05)。随访2a期间,试验组和对照组患者的复发率分别是13%,27%,差异有显著性(P<0.05)。结论:膦甲酸钠滴眼液在治疗上皮型HSK的近期疗效与更昔洛韦滴眼液相同,但中期复发率低于更昔洛韦滴眼液。

脂质体介导寡脱氧核糖核苷酸转染人视网膜色素上皮细胞的转染率及分布测定

目的:观察阳离子脂质体LipofectamineTM 2000介导的寡脱氧核糖核苷酸(ODNs)在体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中的转染效率及其在细胞中的分布。方法:在阳离子脂质体LipofectamineTM 2000的介导下将人工合成的FAM荧光标记的ODNs转入人RPE细胞中,荧光显微镜下观察转染后20 min、1 h、2 h、4 h、6 h、12 h、24 h其在细胞内的分布,流式细胞仪检测其在RPE细胞中的转染效率;并用MTT法检测脂质体处理组、脂质体-ODNs复合物处理组和正常对照组的细胞增生活性,观察脂质体的毒性。结果:LipofectamineTM 2000能迅速将FAM-ODNs转入人RPE细胞的胞质和胞核内,4～6 h达高峰,转染效率高达(85.85±5.75)%,与其他时点比较差异有统计学意义(P<0.05),24 h后其转染率还有(70.11±5.81)%;且脂质体对RPE细胞无明显细胞毒性,3组间细胞增生活性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LipofectamineTM 2000能有效地将FAM-ODNs转入人RPE细胞中,可作为一种安全有效的基因转移载体用于基因治疗。

来氟米特活性代谢物A771726抑制角膜新生血管的实验研究

目的探讨来氟米特活性代谢物丙二酸次氮酰胺(A771726)对角膜新生血管的抑制作用及机制。方法(1)碱烧伤法制作大鼠角膜新生血管模型,40只SD大鼠随机分成A、B、C及D组,每组10只大鼠(10只眼)。空白对照组(A组)生理盐水滴眼,B、C、D组伤后分别滴用0·5%、1·0%及2·0%的A771726滴眼液,均每日4次,共28d。每日裂隙灯显微镜下观察角膜新生血管的生长情况,测量新生血管面积。(2)不同浓度A771726与体外培养的人脐静脉内皮细胞(ECV-304)共同孵育,以四唑盐比色法(MTT法)检测细胞的增生活性,激光共聚焦显微镜检测免疫荧光染色增生细胞核抗原(PCNA)的表达。结果(1)C、D组大鼠角膜新生血管面积均显著小于空白对照A组(P<0·01),而B组大鼠角膜新生血管面积与A组差异无统计学意义(P>0·05)。(2)40、80、160、320μmol/LA771726与人脐静脉内皮细胞共同孵育36h可抑制细胞增生,随浓度增加抑制作用增强,免疫荧光染色显示细胞核PCNA的表达有降低。结论A771726能通过抑制血管内皮细胞增生阻止角膜新生血管生成。

超声乳化白内障吸出和IOL植入术治疗激光周边虹膜切除术后急性闭角型青光眼(英文)

目的:观察超声乳化白内障吸出术联合人工晶状体(IOL)植入治疗激光周边虹膜切除术后闭角型青光眼的治疗效果。方法:激光周边虹膜切除术后闭角型青光眼并白内障患者39例(39眼),被分为两组,Ⅰ组须用抗青光眼药控制眼压,Ⅱ组不须用抗青光眼药控制眼压,患者均行超声乳化白内障吸出和折叠式人工晶状体植入术,术后随访3mo。结果:两组术后最佳矫正视力均较术前显著提高(P<0.05)。术后3moⅠ组眼压为15.72±3.02mmHg,Ⅱ组为16.30±3.81mmHg,两组眼压均比术前明显下降,有显著性差别(P<0.05)。Ⅰ组中央前房深度由术前1.64±0.45mm加深至术后3mo的3.21±0.41mm,Ⅱ组中央前房深度由术前1.92±0.52mm加深至术后3mo的3.18±0.39mm,两组术后中央前房深度均比术前明显加深,有显著性差异(P<0.05),前房角明显增宽。结论:超声乳化白内障吸出和人工晶状体(IOL)植入术不仅能提高激光周边虹膜切除术后青光眼视力,而且可彻底解除闭角型青光眼的瞳孔阻滞。

玻璃体腔注射曲安奈德减轻视网膜静脉阻塞继发的黄斑水肿

目的:评估玻璃体腔内注射曲安奈德(triamcinolone acetonide,TA)治疗视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)引起的黄斑水肿的长期安全性与有效性。方法:患者17例17眼出现视网膜静脉阻塞引起的黄斑水肿,接受玻璃体腔内注射2mgTA,随访1a,监测患者视力、黄斑厚度。结果:随访发现,15眼(88%)视力得到明显改善,从术前0.114±0.068增加到术后的0.184±0.094,差异有统计学意义(P<0.05),而中央黄斑区的厚度从术前的514.0±67.4μm减少到术后的442.0±61.5μm,差异有统计学意义(P<0.05)。术后6例患者出现短期眼压升高,并无并发性白内障,玻璃体出血,视网膜脱离以及眼内炎的发生。结论:玻璃体腔内注射TA能长期有效减缓RVO引起的黄斑水肿。

RNA干扰沉默CTGF对牛角膜内皮细胞增殖的影响

目的:探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默结缔组织生长因子(connective tissuegrowth factor,CTGF)表达对牛角膜内皮细胞(corneal endothelial cells,CECs)增殖的影响。方法:设计并合成CTGF特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),用脂质体转染入培养的牛CECs,反转录聚合酶链反应(reversetransfection-polymerase chain reaction,RT-PCR)法观察基因沉默效果,1μg/L TGF-β2作用于转染前、后的牛CECs,CCK-8检测法观察RNA干扰对牛CECs增殖的影响。结果:CTGF siRNA成功转染入培养的牛角膜内皮细胞并有效沉默CTGF mRNA表达,转染24,48h和72h CTGF mRNA表达分别为正常对照组的17.3%,24.4%和41.7%,与正常对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。在转染24、48h时1μg/L TGF-β2对牛CECs的抑制率分别为0.3804±0.0026、0.3117±0.0075。与对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CTGF特异性siRNA能有效沉默细胞内CTGF mRNA表达,促进牛CECs的增殖。

角膜地形图指导白内障超声乳化摘除切口矫正原有散光的疗效分析

目的探讨在最高屈光度的子午线做白内障超声乳化切口联合对侧弧形角膜切开术对矫正白内障患者原有散光的疗效。方法 23例(28只眼)术前散光(-1.50～-4.15 D)的白内障患者在角膜地形图指导下,在最高屈光度的子午线做白内障超声乳化切口联合对侧弧形角膜切开术,分析术后的裸眼视力和矫正原有散光的效果。结果角膜地形图显示该术式可使术前(-2.36±1.25)D 的散光降为术后3个月(-0.58±0.71)D的散光。结论最高屈光度子午线做白内障超声乳化切口联合弧形角膜切开术对原存有-1.50～-4.15 D 的散光矫正疗效好,该术式是屈光性白内障超声乳化术散光矫正较有效的术式。

细胞因子对视网膜色素上皮细胞Cadherin表达的影响

目的探讨细胞因子对视网膜色素上皮(RPE)细胞钙黏附素(Cadherin)表达的影响及可能的调节机制。方法取体外培养的第2代兔眼RPE细胞,加入不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、血小板源生长因子(PDGF)、肝细胞生长因子(HGF)共同培养12h后,用流式细胞技术定性、定量观察这4种细胞因子对RPE细胞膜上Cadherin表达的影响。结果正常兔RPE细胞可表达Cadherin,经各种细胞因子诱导后的RPE细胞Cadherin表达均明显下调,尤以4种细胞因子联合作用时表达下调最明显,其表达水平与细胞因子浓度呈剂量递减关系。不同浓度各组细胞因子与空白对照组比较,Cadherin表达具有显著统计学差异(P<0·05)。同浓度不同细胞因子组间Cadherin表达具有显著统计学差异(P<0·05)。结论正常兔RPE细胞可表达Cadherin,细胞因子bFGF、TNFα、PDGF、HGF能诱导RPE细胞Cadherin表达减弱,减弱的程度与剂量有关。

来氟米特活性代谢物A771726对大鼠角膜移植排斥反应的影响

目的探讨来氟米特活性代谢物A771726对大鼠角膜移植排斥反应的抑制作用。方法建立SD-Wistar大鼠同种异体穿透角膜移植模型,随机分组。A组为空白对照组;B、C、D组分别为0.5%、1.0%及2.0%A771726滴眼液组;E组为Wistar大鼠自体移植对照组。术后比较各组角膜植片排斥指数(RI)及植片存活时间,并对植片进行组织学及免疫组织化学染色观察。结果A组角膜植片存活时间为(9.38±2.26)d,B组(10.13±2.41)d,C组(17.57±1.72)d,D组(17.50±2.14)d,E组(>28.00)d。A组、B组分别与C组、D组植片存活时间差异有统计学意义(P<0.01)。移植术后10d,A组、B组角膜植片发生排斥反应,植片高表达IFN-γ及ICAM-1;术后20d,C组、D组植片发生排斥反应,植片IFN-γ及ICAM-1表达增高。结论局部应用A771726滴眼液能有效抑制角膜移植排斥反应。

玻璃体后脱离与玻璃体视网膜疾病

近年来 ,随着玻璃体视网膜疾病基础研究的不断深入及临床诊治水平的快速发展 ,玻璃体视网膜界面的重要病理学意义越来越受到重视 ,玻璃体后脱离作为此界面最常见的生理病理变化也引起了国内外众多学者的广泛关注 ,并对玻璃体后脱离与玻璃体视网膜疾病的关系进行了深入的研究和探讨。本文对这方面的最新进展进行了综述。

热休克蛋白90抑制剂对视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用

目的 :探讨热休克蛋白 90 (heatshockprotein 90 ,Hsp90 )抑制剂对培养的视网膜色素上皮 (Retinalpigmentepithelial,RPE)细胞端粒酶活性以及RPE细胞增生的影响。方法 :用分子原位杂交方法分别检测对照组和Hsp90抑制剂组RPE细胞端粒酶活性 ;末端缺口标记 (terminalUTPnick endlabeling ,TUNEL)法分别检测上述 2组细胞中凋亡细胞的比率 ;在上述 2组细胞中分别用甲基偶氮唑蓝 (metheltetrazolium ,MTT)法检测细胞增生状况。结果 :与RPE细胞对照组相比 ,加入Hsp90抑制剂组RPE细胞端粒酶活性显著降低 ,凋亡细胞的比率明显增高 ,RPE细胞生长抑制率升高。结论 :Hsp90抑制剂可抑制RPE细胞中端粒酶的活性 。

金丝桃素对兔急性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响

目的:探讨蛋白激酶C抑制剂金丝桃素对兔急性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响。方法:新西兰大白兔35只,随机挑选3只为空白对照组,16只为金丝桃素处理组、16只为生理盐水对照组。分别向玻璃体腔内注射0.1mL的金丝桃素(金丝桃素处理组)和生理盐水(生理盐水对照组),并分别于12,24,48h和72h后经前房灌注升高眼压达100mmHg(1kPa=7.5mmHg),持续90min,24h后取材。用高效液相色谱法测定不同时间点的视网膜谷氨酸含量。结果:急性高眼压兔视网膜谷氨酸含量比正常兔显著升高(P<0.05)。急性高眼压兔金丝桃素预处理48h后视网膜谷氨酸含量最低,为(5.66±0.21)×10-5mmol/g,同期生理盐水对照后为(8.41±0.27)×10-5mmol/g,二者差异有显著性(P<0.05)。结论:金丝桃素玻璃体腔注射能降低兔急性高眼压视网膜谷氨酸含量,对视网膜的有一定的保护作用。

羊膜移植治疗春季角结膜炎的角膜缘病变(英文)

目的:评估角膜缘病变区球结膜环形切除联合羊膜移植治疗角膜缘病变为主的春季角结膜炎的临床效果。方法:对 10 例(20 眼)以角膜缘病变为特征的春季角结膜炎患者,采用角膜缘病变区球结膜环形切除联合羊膜移植的方法予以治疗。术后随访 5～21mo,观察其症状、体征的改变及复发情况。结果:手术后,患者症状明显改善:痒感、分泌物多、异物感等症状基本消失;手术后 1wk 内,畏光、流泪明显,后逐渐减轻,手术 1mo 后基本消失。角膜缘黄褐色或污红色胶样结节手术清除后在随访期间未复发;角膜上皮点状着色(11 眼),角膜溃疡(3 眼)于手术后 1wk 内愈合染色转阴且在随访期间未复发;术后球结膜充血逐渐减轻,19 眼手术1mo 后充血基本消失,且角膜缘羊膜移植区的球结膜较正常偏白,但有 1 眼术后球结膜充血间断反复约 5mo 并伴有轻度痒感,药物可减轻该眼的痒和充血,但多次出现反复。所有病例随访期间未发现严重的并发症。结论:角膜缘病变区球结膜切除联合羊膜移植治疗角膜缘病变为主的春季角结膜炎是有效安全的,但应严格选择手术对象。

羊膜移植治疗早期蚕蚀性角膜溃疡的临床研究(英文)

目的:评估环形角膜缘球结膜切除联合羊膜移植治疗早期蚕蚀性角膜溃疡的临床疗效,了解此方法的有效性、安全性。方法:对2002-06/2005-06,我院住院的24例(30眼)早期蚕蚀性角膜溃疡患者,采用环形球结膜切除加羊膜移植术治疗。术后随访5～30mo。本组病例的特点是溃疡局限性:溃疡侵犯角膜缘范围在30!～120",深度在1/3￣1/2角膜厚度,宽约2～5mm。结果:手术后所有病例眼部疼痛等症状迅速减轻,拆线后基本消失;角膜溶解得到控制。溃疡区的角膜厚度,术后2～3mo基本稳定,部分恢复正常,部分较正常薄,平均增加约1/3角膜厚度。角膜的透明性和视力均有不同程度改善。随访期间未发现严重的并发症及复发。结论:球结膜环形切除联合羊膜移植术治疗早期局限性蚕蚀性角膜溃疡是有效、安全、经济的。

外伤性视网膜脱离视网膜色素上皮细胞钙粘素表达变化

目的探究外伤性玻璃体积血视网膜脱离模型视网膜色素上皮细胞(RPE)细胞膜表面钙粘素(Cadherin)表达变化规律。方法90只健康有色兔,分为5组:Ⅰ组,外伤性玻璃体积血伴视网膜脱离组;Ⅱ组,孔源性视网膜脱离组;Ⅲ组,单纯视网膜裂孔组;Ⅳ组,玻璃体切除组;Ⅴ组,空白对照组。分别于手术后1、3、5、7、14、21、30d摘取眼球,酶消化和机械分离法分离RPE细胞,制成细胞悬液,用流式细胞仪检测RPE细胞膜上钙粘素表达水平。方差分析比较各组差异。结果各模型组RPE细胞钙粘素表达差异具有统计学意义(F=9.612;P<0.001),Ⅰ组和Ⅱ组中RPE细胞钙粘素的表达水平明显低于Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组。不同时间点组中钙粘素表达差异具有统计学意义(F=7.95,P<0.001)。Ⅰ组和Ⅱ组模型RPE细胞钙粘素表达均数无明显差异,与Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组比较差异显著。结论外伤性玻璃体积血伴视网膜脱离和孔源性视网膜脱离模型RPE细胞钙粘素表达在发病早期表达减弱,随着病情的发展钙粘素表达逐步恢复至正常。

一种新型可吸收性巩膜外加压弹性体的研究

目的寻找具有可吸收性及良好物理特性的人工合成材料作为视网膜脱离巩膜外加压术填充物。方法用灰兔做视网膜脱离模型,以可吸收性化学合成材料磷酸酯-碳酸酯共聚物弹性体作为填充物,行巩膜外加压术,术后用B超测巩膜嵴高度,相应时间取眼球做病理检查,观察视网膜复位情况及组织相容性。测量其降解率。结果视网膜平伏,巩膜嵴高度在术后3个月内变化不大。术后第3个月时共聚物吸收8.2%,组织学观察无明显炎症反应。结论磷酸酯-碳酸酯共聚物弹性体作为巩膜外填充物均使用安全、结果可靠。

tTG反义寡核苷酸对小梁细胞tTG表达的抑制作用

目的通过计算机程序模拟组织型谷氨酰胺转移酶(tissue transglutaminase,tTG)基因的mRNA二级结构,优化硫代反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,A-SODN)药物设计,为有效抑制小梁细胞表达tTG提供新的途径。方法根据牛tTG mRNA的二级结构,选择环与茎结合区(280～300bp)和茎区(2720～2740bp)作为反义药物作用的靶点,分别合成ASODN1、ASODN2,用脂质体包埋后转染牛眼小梁细胞。通过半定量RT-PCR法检测转染后tTG mRNA表达的变化来评价tTG-ASODN的生物学效应。结果ASODN1、ASODN2对tTG mRNA的表达均有抑制作用,与空白对照组相比差异有显著性(P<0.05),且tTG-A-SODN1抑制作用明显强于tTG-ASODN2(P<0.05)。结论选择环与茎连接的部位作为反义作用的靶点,其反义作用明显强于茎区。从机制上讲,可能是因为环与茎连接的部位的形成需要吸收能量,是整个tTG mRNA序列中最不稳定的区域,ASODN容易接近而发挥作用,提示通过tTG mRNA二级结构的模拟而选择ASODN是设计反义药物的新途径。