Ewing’s肉瘤细胞X-射线照射后TNF-α和TGF-β mRNA表达的研究

目的 研究Ewing’s肉瘤细胞系 (RM 82 )X 射线外照射后肿瘤坏死因子 (TNF α)和转化生长因子 (TGF β)mRNA表达水平的变化 ,探讨X 射线诱导内源性TNF α和TGF β产生的可能性及意义。 方法 应用实时荧光RT PCR ,检测接受不同剂量X 线照射 (2Gy ,5Gy ,10Gy ,2 0Gy ,30Gy ,4 0Gy)和受照后不同时间 (1h ,3h ,6h ,12h ,2 4h ,4 8h ,72h)。TNF α和TGF βmRNA表达水平的变化。 结果 RM 82细胞TNF αmRNA表达水平较外照射前显著升高。一方面受照后TNF αmRNA表达逐渐升高 ,照射剂量达 4 0Gy时TNF αmRNA表达水平达高峰 ,为正常对照组的 10 8倍 ;另一方面 ,照射后 3h后TNF αmRNA表达逐渐升高 ,6h达高峰 ,为正常对照组的 18倍。相反 ,TGF βmRNA表达水平X 射线照射前后无显著变化。结论 Ewing’s肉瘤细胞系 (RM 82 )接受X 线照射后TNF αmRNA表达明显升高 ,且呈现时间、剂量依赖性。放射治疗可诱导Ewing’s肉瘤细胞系 (RM 82 )产生TNF α,既可能提高放疗的敏感性 。

健择联合顺铂化疗对非小细胞肺癌患者外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+调节T细胞的影响

目的探讨健择联合顺铂对非小细胞肺癌患者免疫耐受的调控作用。方法38例经病理学或细胞学确诊的NSCLC患者,采用健择、顺铂联合化疗方案,应用流式细胞仪检测化疗前后外周血CD4+CD25+Foxp3+调节T细胞(Treg)占CD4+T细胞的百分率。结果化疗前NSCLC患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节T细胞(Treg)占CD4+T细胞的比率明显高于健康对照组(P<0.05);化疗后NSCLC患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节T细胞(Treg)占CD4+T细胞的百分率较化疗前显著降低(P<0.05);但鳞癌、腺癌及腺鳞癌3组间化疗前、化疗后各项指标之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论健择联合顺铂化疗可调控晚期非小细胞肺癌机体的肿瘤免疫耐受,改善患者的免疫功能。

X线照射后肺癌细胞肿瘤坏死因子mRNA的表达

目的探讨X线诱导和调节肺癌细胞株NCI-H596和A549肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA的表达作用及其临床意义。方法应用实时荧光定量RT-PCR技术,定量检测NCI-H596和A549细胞株照射前和接受不同剂量(2,5,10,20,30和40Gy)的X线照射后,以及受照30Gy后不同时间TNF-αmRNA的表达。同时进行集落形成试验,检测NCI-H596和A549细胞株的放射敏感性。结果集落形成试验结果显示,未照射的NCI-H596细胞株集落形成率为0.12～0.24;A549细胞株集落形成率为0.37～0.45。照射后,A549细胞的存活分数(SF)在2Gy时为47.3%±9.0%,4Gy时为18.0%±3.0%,6Gy时为6.0%±2.0%,8Gy时为1.4%±0.3%;NCI-H596细胞的SF在2Gy时为55.2%±51.0%,4Gy时为15.9%±9.2%,6Gy时为3.5%±1.7%;8Gy时为0.9%±0.6%;二者SF差异无统计学意义,二者的D0值和Dq值差异亦无统计学意义(P>0.05)。实时荧光定量RT-PCR检测显示,NCI2H596细胞受照后TNF-αmRNA表达逐渐升高,照射剂量达40Gy时,TNF-αmRNA表达水平达高峰,为对照组的83倍;受照后,1hTNF-αmRNA表达逐渐升高,6h达高峰,为对照组的568倍。A549细胞受照后,1hTNF-αmRNA表达即达高峰,为对照组的136倍。结论X线可诱导肺癌细胞株A549和NCI2H596产生TNF-α,且呈剂量、时间依赖性,可提高肺癌放射治疗的疗效,也可对正常组织和?

人非小细胞肺癌细胞受照射后肿瘤坏死因子水平的变化

目的 观察非小细胞肺癌 (NSCLC)细胞系A5 4 9和NCI H5 96受X射线照射后肿瘤坏死因子 (TNF α)mRNA表达及其蛋白水平的变化。方法 应用实时荧光RT PCR技术 ,观察肺癌细胞系A5 4 9和NCI H5 96照射 2、5、10、2 0、30和 4 0Gy后 1、3、6、12、2 4、4 8和 72hTNF αmRNA表达及其蛋白水平。应用免疫组织化学法 (ELISA)检测相应培养液中TNF α蛋白的水平。同时进行集落形成实验观察 2种细胞系的放射敏感性。结果 X射线照射后TNF αmRNA表达及其蛋白水平较照射前升高 ,吸收剂量达 4 0Gy时TNF αmRNA表达水平达高峰 ,为对照组的 83倍。NCI H5 96细胞受照射后 1hTNF αmRNA表达逐渐升高 ,6h达高峰 ,为对照组的 5 6 8倍。NCI H5 96细胞受照射后TNF α蛋白水平逐渐升高 ,受照射后 2 4h达高峰 (为基础水平的 5 8倍 )。且与受照射剂量有关。A5 4 9细胞受照射后 1hTNF αmRNA表达仅见瞬间升高 ,随后即降至基础水平。而且 ,A5 4 9细胞受照射后TNF α蛋白水平无明显升高。结论 X射线可诱导NSCLC细胞系NCI H5 96产生TNF α ,呈现时间、剂量依赖性改变。

参芪扶正液对肺腺癌细胞GLC-82X射线照射后TGF—β1表达调控的研究

目的 阐明参芪扶正液对肺腺癌细胞株GLC-82X射线照射后TGF-β1表达的调控，探讨中药防治放射性肺损伤的分子机制。方法 选取人低分化肺腺癌细胞株GLC-82，加入终浓度为1．563mg／ml参芪扶正液后随机分组：①照射剂量关系组：分别予0、20、30和40 Gy剂量的X射线照射，于照射后6h提取细胞总RNA。②时间关系组：接受20 Gy的X射线照射，分别在照射后12、24和48h提取细胞总RNA。2组均采用RT-PCR法检测TGF-β1 mRNA表达。结果 剂量关系组：GLC-82细胞接受X射线照射后TGF—β1 mRNA表达量明显增高，在20Gy照射后达到高峰，为基础未照射水平细胞的5倍。参芪扶正干预组与单纯照射组相比，其TGF—β1 mRNA相对表达量均有不同程度下调，在吸收剂量达20 Gy时差异有统计学意义（P〈0．05）。时间关系组：GLC-82细胞经20 Gy X射线照射后在不同时间点参芪扶正干预组与单纯照射组相比，其TGF—β1 mRNA相对表达量均有不同程度下调，受照后48h差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 TGF—β1在放射性肺损伤发生、发展过程中起着重要作用，而参芪扶正液能明显降低该过程中TGF—β1表达水平。