TCRγδ^+CD^(3+)CD^(4-)CD^(8-)双阴性T细胞在3型鼠肝炎病毒诱导的小鼠慢性病毒性肝炎发病中的作用

目的本研究拟探讨在MHV-3诱导的慢性病毒性肝炎模型小鼠外周血和脾脏TCRγδ+DNT细胞在T淋巴细胞中比例变化以及其主要表面分子标记的变化。方法取60只C3H/Hej小鼠,腹腔注射10pfu MHV-3;应用流式细胞仪三色或四色荧光分析法分别检测小鼠外周血和脾脏TCRγδ+DNT细胞在T淋巴细胞中的比例及其CD25、CD28、CD30和CD44表达的变化。结果 MHV-3诱导的慢性病毒性肝炎小鼠各时间点外周血和脾脏TCRγδ+DNT在T淋巴细胞中的比例较对照组显著升高(P<0.05);在感染后10天达到最高峰:外周血和脾脏TCRγδ+DNT细胞占T淋巴细胞的比例分别为4.8±1.5%和4.5±1.3%;模型小鼠外周血和脾脏TCRγδ+DNT细胞的表型均为TCRγδ+CD3+CD4-CD8-CD25-CD28-CD30-CD44+。结论感染MHV-3后C3H/Hej小鼠体内TCRγδ+DNT细胞的数量增加,提示TCRγδ+DNT细胞参与了MHV-3诱导的小鼠慢性病毒性肝炎的发生和发展过程。

2014年慢性病毒性肝炎临床诊疗进展

病毒性肝炎（Viral hepatitis）是一个严重的全球公共卫生问题,每年超过100万人死于病毒性肝炎[1]。根据病原学分型,目前已被公认的有甲、乙、丙、丁、戊五种肝炎病毒,其中乙型、丙型和丁型肝炎病毒感染可发展为慢性化,全球超过半数的肝硬化和肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）由乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）或丙型肝炎病毒（Hepatitis Cvirus，HCV）感染发展而来。近年来，国内外在慢性病毒性肝炎诊断和治疗方面均取得了重要进展。本文主要介绍慢性乙型和丙型肝炎的临床诊疗进展。

MHV-3诱导的暴发性肝炎小鼠肝脏表达IL-9免疫细胞的变化

目的研究MHV-3病毒感染所致的暴发性肝炎小鼠肝脏T淋巴细胞亚群胞内细胞因子IL-9表达的变化,以探讨IL-9在该疾病模型中的作用。方法利用MHV-3病毒诱导Balb/cJ小鼠暴发性肝炎模型,采用流式细胞术检测肝脏分泌IL-9的淋巴细胞亚群比例的变化。结果随着MHV-3感染时间的延长,肝脏分泌IL-9的CD4+T细胞比例由感染前的1.87±1.36%于48小时升高到4.77±0.42%,差异显著(P<0.05);而分泌IL-9的CD4-CD8(-DN)T细胞比例则于感染后72小时达峰值7.83±3.30%,显著高于感染前(3.57±1.82,P<0.05)和24小时时(3.60±0.85,P<0.05)。结论随着感染时间延长,肝脏分泌IL-9的CD4+T和CD4-CD8(-DN)T淋巴细胞显著升高,说明IL-9可能参与了MHV-3诱导的暴发性肝炎小鼠免疫诱导的肝脏损伤发病过程。

MHV-3诱导暴发性肝炎小鼠肝组织KCNJ15的表达变化

目的研究病毒感染所致的急性肝衰竭模型中离子通道基因KCNJ15表达水平,探讨该疾病模型中KCNJ15的变化及其与疾病进程的关系。方法利用MHV-3病毒诱导的Balb/cJ小鼠暴发型肝炎模型,采用定量PCR和免疫组化技术分别从基因及蛋白水平检测肝脏KCNJ15表达水平,并应用流式细胞术检测肝脏淋巴细胞亚群KCNJ15表达。结果随着MHV-3感染时间的延长,肝组织中KCNJ15表达水平逐渐增高,以感染后72小时最为显著。在肝脏CD4+T细胞,KCNJ15蛋白表达水平于48小时显著升高,达到25.17±7.68%,与0h(3.92±1.33%)相比差异具有统计学意义(P<0.001),随后于72小时回落;肝脏表达KCNJ15的CD8+T细胞比例变化与CD4+T细胞趋势一致,于48h达到37.08±8.73%,与0h(6.98±3.48%)相比有显著差异(P<0.001);而表达KCNJ15的肝脏NK细胞比例则从7.72±1.34%上升到感染后24小时的峰值19.80±4.25%(P<0.001),随后回落。结论肝组织及肝脏淋巴细胞过表达KCNJ15可能参与了MHV-3诱导的暴发性肝炎小鼠免疫诱导的肝脏损伤过程。

慢性丙型肝炎患者PBMC TBK1s表达

目的探讨蛋白激酶TBK1s在慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)的表达及其意义。方法采用实时荧光定量PCR法检测21例慢性丙型肝炎患者PBMC蛋白激酶TBK1、其剪接变体TBK1s和β-干扰素(IFN-β)水平。结果慢性丙型肝炎患者PBMC TBK1s水平显著性高于健康对照人群;经干扰素治疗的慢性丙型肝炎患者PBMC TBK1s表达与健康人比无显著性差异。结论 TBK1s水平与慢性丙型肝炎病毒感染相关。

CXCR3阳性自然杀伤细胞在MHV-3诱导暴发性肝炎小鼠组织分布动态变化

目的检测CXC趋化因子受体3(CXCR3)阳性自然杀伤(NK)细胞在3型鼠肝炎病毒诱导的暴发性肝炎小鼠肝脏、脾脏、骨髓及外周血中百分比的动态变化。方法腹腔注射3型鼠肝炎病毒诱导BALB/cJ小鼠暴发性肝炎,利用流式细胞术检测小鼠肝脏、骨髓、外周血及脾脏CXCR3阳性NK细胞百分比的变化。结果肝脏CX-CR3阳性NK细胞百分比在感染后12小时(20.47±1.54%)和24小时(31.53±2.53%)较感染前(14.0±0.25%)均显著升高(P均<0.05),至感染48小时下降至感染前水平;骨髓CXCR3阳性NK细胞百分比随感染时间延长而逐渐减少,由初始水平(25.53±3.50%)的高点至72小时时降至较低水平(1.2±0.17%,P<0.05);脾脏CXCR3阳性NK细胞的百分比在感染后12小时增高(13.63±3.167%),随后下降,至72小时达到较低水平(2.20±0.53%,P<0.05);外周血CXCR3阳性NK细胞的百分比在24小时增高,在72小时下降至感染前水平。结论在MHV-3感染后,CXCR3阳性NK细胞可能逐渐迁移至肝脏,从而在小鼠暴发性肝炎发生发展中发挥重要作用。

MHV-3诱导暴发型肝衰竭小鼠肝组织细胞因子表达的变化

目的研究病毒感染所致急性肝衰竭小鼠细胞因子的变化。方法利用MHV-3病毒诱导Balb/cJ小鼠暴发型肝炎模型;采用ELISA法测定外周血和肝脏IFN-γ和TNF-α水平。结果随着MHV-3感染时间的延长,动物外周血和肝组织IFN-γ和TNF-α水平逐渐增高,在小鼠死亡时达到高峰。结论 IFN-γ和TNF-α可能参与了MHV-3诱导的暴发型肝炎肝脏损伤的发病过程。