C-Kit、PDGFRα的表达与卵巢浆液性癌顺铂耐药的临床研究

目的分析C-Kit、PDGFRα在卵巢浆液性癌中的表达及其与铂类耐药的关系,以期为顺铂耐药的卵巢癌治疗提供实验室依据。方法采用免疫组化SP法检测C-Kit、PDGFRα在59例卵巢浆液性癌中的表达,并分析两者的表达与卵巢浆液性癌顺铂耐药的关系。结果C-Kit、PDGFRα在59例卵巢浆液性癌中的阳性表达率分别为57.63%和66.10%。C-Kit蛋白阳性表达与卵巢浆液性癌化疗铂类耐药有关(P<0.05),而PDGFRα蛋白阳性表达与卵巢浆液性癌化疗铂类耐药无关(P>0.05)。C-Kit、PDGFRα的表达与卵巢浆液性癌组织学分级和临床分期有关(P<0.01或P<0.05)。结论C-Kit蛋白阳性表达与卵巢浆液性癌顺铂耐药有关,而PDGFRα表达与卵巢浆液性癌顺铂耐药无关。

DN-hTERT对MCF7细胞端粒酶活性及细胞生长的抑制作用

目的:观察端粒酶逆转录酶负突变体(DN-hTERT)对乳腺癌细胞MCF7端粒酶活性和恶性表型的抑制作用。方法:将带DN-hTERT基因的真核表达载体(DN-hTERT-IRES2-EGFP,DN)、IRES2-EGFP空载体(Ⅰ)通过脂质体2000(lipofectamine2000)介导转入MCF7细胞,以G418进行稳定筛选,得到阳性克隆;倒置荧光显微镜观察转染细胞的生长情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞hTERT mRNA的表达;TRAP-ELISA方法检测转染细胞端粒酶活性;流式荧光原位杂交法(FLOW-FISH)检测转染细胞端粒长度的变化;裸鼠肿瘤细胞移植观察转染细胞动物致瘤率。结果:MCF7细胞转染DN-hTERT后生长受到抑制;转染DN-hTERT的MCF7细胞(MCF7/DN) hTERT mRNA表达升高;TRAP-ELISA检测MCF7/DN细胞端粒酶活性(2.36±0.12)与转染空载体MCF7细胞(MCF7/I)(3.32±0.14)比较显著降低(P<0.05);反应端粒长度的荧光强度差比较中,MCF7/DN细胞(13.89±0.23)比MCF7/I(19.87±0.36)低,转染DN端粒长度出现缩短;裸鼠肿瘤细胞移植,2周动物致瘤率MCF7/DN为0,与MCF7/I的35%比较有极显著意义(P<0.01)。结论:DN-hTERT能特异性抑制MCF7细胞生长和端粒酶活性。

c-kit蛋白和血小板源生长因子受体α在卵巢上皮性肿瘤中的表达

目的探讨c—kit蛋白、血小板源生长因子受体仪（PDGFRα）在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与卵巢癌临床病理的关系。方法采用免疫组织化学法（SP法）检测c—kit蛋白、PDGFRα，分析c—kit蛋白、PDGFRα在卵巢上皮性肿瘤中的表达与肿瘤分型、分化程度及国际妇产科联盟（FIGO）分期的关系。结果（1）c—kit蛋白在卵巢上皮性癌中表达的阳性率为50．70％，明显高于正常卵巢组织（10．00％）及良性卵巢肿瘤（20．00％）（P均〈0．01）。PDGFRtx在卵巢上皮性癌中表达的阳性率为63．38％，明显高于正常卵巢组织（15．00％）及良性卵巢肿瘤（25．00％）（P均〈0．叭）。（2）c—kit蛋白在浆液性卵巢癌中表达的阳性率高于黏液性卵巢癌（57．63％比16．67％，P〈0．05），而PDGFRa在浆液性及黏液性卵巢癌中表达阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。低分化卵巢癌组c—kit蛋白及PDGFRα表达的阳性率明显高于高中分化卵巢癌组（69．23％比40．00％，80．77％比53．33％，P〈0．05）。在Ⅲ～Ⅳ期与Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌中c—kit蛋白及PDGFRα表达的阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）卵巢上皮性癌的c—kit蛋白和PDGFRα表达无相关性（P〉0．05）。结论c—kif蛋白与PDGFRα的表达与卵巢上皮性癌细胞的分化程度相关联：对c-kit蛋白与PDGFRa的检测可用于判断卵巢上皮性肿瘤的恶性程度及其预后。