β-catenin在不同年龄人群非曝光部位皮肤组织中的表达及意义

目的检测β-catenin在不同年龄人群非曝光部位皮肤组织中mRNA和蛋白的表达水平,初步探讨β-catenin在人皮肤年代老化过程中的意义。方法收集62例急腹症手术患者非曝光部位的皮肤标本,根据年龄分为三组:即青年组(<20岁)、中年组(30~45岁)和老年组(>65岁),用RT-PCR及Western blot检测每例皮肤组织中β-catenin mRNA和蛋白的表达量,分析不同年龄组之间β-catenin表达水平的差异。结果青年组、中年组和老年组β-catenin/GAPDH mRNA的表达水平分别是0.603 8±0.012 1,0.513 9±0.015 4和0.256 2±0.011 4,三组间比较的差异均有统计学意义(P<0.01),青年组与中年组,青年组与老年组,中年组与老年组比较差异均有统计学意义(P均<0.01);青年组、中年组和老年组β-catenin/GAPDH蛋白的表达水平分别是0.631 5±0.013 5,0.548 6±0.012 9和0.327 4±0.021 9,三组间比较差异均有统计学意义(P<0.01),青年组与中年组,青年组与老年组,中年组与老年组比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论随着年龄的增长β-catenin的表达水平随之减少,推测人皮肤年代老化可能与β-catenin的表达下调有一定的关联性。

汉族人群肝郁气滞及湿热内蕴型痤疮TLR2 Arg753Gln基因多态性分析

目的探讨汉族人群肝郁气滞及湿热内蕴型痤疮TLR2 Arg753Gln基因多态性,为其发病遗传学研究奠定基础。方法采用PCR-RFLP技术检测75例湿热内蕴型痤疮、87例肝郁气滞型痤疮以及70名健康对照组的TLR2 Arg753Gln基因型分布以及等位基因的频率。结果 Arg/Gln+Gln/Gln基因型于肝郁气滞型为26.44%(23/87)、湿热内蕴型为41.33%(31/75)、健康对照组为12.86%(9/70),各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TLR2 Arg753Gln基因多态性中等位基因753Gln的存在,增加了汉族人群肝郁气滞及湿热内蕴型痤疮的发病风险。

β联蛋白对过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞增殖活性及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响

目的 观察高表达的β联蛋白对过氧化氢（H2O2）诱导衰老人皮肤成纤维细胞（HSF）增殖活性以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响.方法 实验分3组.HSF细胞分别转染pcDNA3.1-β联蛋白或空载体pcDNA3.1,然后150 μmol/LH2O2处理2h.噻唑蓝检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,RT-PCR和Western印迹分析凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达.结果 HSF＋空载体组、HSF＋空载体＋H2O2组、HSF＋β联蛋白＋H2O2组细胞增殖活性分别为0.792±0.012、0.462±0.012、0.521±0.015,细胞凋亡率分别为（3.407±0.217）％、（24.555±1.793）％、（15.360±0.755）％,各组比较,差异有统计学意义（均P＜ 0.01）.HSF＋空载体＋ H2O2组Bcl-2 mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.333±0.003和0.336±0.004）明显低于HSF＋空载体组（分别为0.507±0.013和0.514±0.021）,两组比较,均P＜ 0.01.HSF＋β联蛋白＋H2O2组Bcl-2 mRNA和蛋白水平分别为0.404±0.006和0.411±0.005明显高于HSF＋空载体＋H2O2组,两组比较,均P＜ 0.01.HSF＋空载体＋H2O2组Bax mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.451±0.002和0.460±0.008）明显高于HSF＋空载体组,两组比较,均P＜ 0.01.HSF＋β联蛋白＋H2O2组BaxmRNA和蛋白水平（分别为0.339±0.012和0.346±0.013）明显低于HSF＋空载体＋H2O2组,两组比较,均P＜0.01.结论 高表达的β联蛋白能够提高衰老人皮肤成纤维细胞增殖活性.

β联蛋白对体外过氧化氢所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响

目的观察高表达的D联蛋白对体外过氧化氢（H2O2）所致正常人皮肤成纤维细胞（NHSF）衰老表型的影响。方法NHSF分别转染pcDNA3．1-β联蛋白或空载体pcDNA3．1，然后150μmol／LH2O2处理2h。实验分为转染H2O2处理组（NHSF＋β联蛋白＋H2O2）、转空载体H2O2处理组（NHSF＋空载体＋H2O2）以及转空载体组（NHSF＋空载体）。用RT—PCR和Western印迹分析β联蛋白的表达，显微镜观察细胞形态，试剂盒检测衰老相关的β半乳糖苷酶（SA—β—gal）、细胞活性氧（ROS）以及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。所有数据均用SPSS13．0软件进行统计分析，多组间比较采用ANOVA检验。结果pcDNA3．1-β联蛋白明显上调了NHSF中β联蛋白的表达。NHSF＋空载体＋H2O2组β联蛋白mRNA和蛋白水平（与GAPDHmRNA和蛋白的比值分别为0．2900±0．0195和0．3130±0．0171）明显低于NHSF＋空载体组（分别为0．5963±0．0400和0．6190±0．0090），两组比较，均P〈0．05；NHSF＋β联蛋白＋H2O2组β联蛋白表达水平（0．7953±0．0074）高于NHSF＋空载体＋H2O2组（P〈0．05）。SA—β—gal染色率在NHSF＋空载体组、NHSF＋空载体＋H2O2组、NHSF＋β联蛋白＋H2O2组分别为（2．9667±0．2517）％、（37．70±0.9539）％、（29．330±0．6359）％，各组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。NHSF＋空载体、NHSF＋空载体＋H2O2、NHSF＋β联蛋白＋H2O2组ROS活性分别为（50．9963±9．2688）％、（109．9190±11．5215）％、（75．1063±3．0138）％，SOD水平分别为（88．0856±3．9181）、（35．5585±3．4438）、（61．7029±3．1716）U／mg，各组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论高表达的β联蛋白能够抑制细胞衰老相关β-半乳糖甘酶（SA-β-gal）和细胞活性氧（ROS）的表达，同时上调了SOD的活性。