抗肿瘤适体药物的研究进展

适体,也称为化学抗体,是近年来开发的颇具潜力的一类新型药物。适体由较短的DNA或RNA寡聚核酸组成,在体内形成专一和稳定的三维结构,可以与特定的靶蛋白结合。已批准上市的第1个适体药物为抗血管内皮生长因子的RNA分子Macugen,在临床上玻璃体内注射用于治疗年龄相关性黄斑变性。细胞和动物模型研究证明一些适体具有很好的抗癌作用,有几个适体药物已进入临床研究阶段。此文对近年来抗肿瘤适体药物的进展做一综述。

心肌缺血再灌注损伤的分子修复机制及其抑制剂的研究进展

目前缺血性心脏病的发病率位于原发性心脏病之首,其中心肌缺血再灌注损伤约占50%以上。因此,开发治疗心肌缺血再灌注损伤的多靶点药物对防治心脏疾病具有重大价值和意义。研究MIRI的分子机制并开发针对各种靶点的MIRI抑制剂,以此调控多种信号通路,为进一步阐明MIRI分子机制及研发相关药物提供了新的思路。

以壳聚糖为载体的口服基因药物

口服给药由于服用方便、病人依从性好、治疗费用低等优势一直是研究的热点。基因药物临床试验的成功再次激起了人们对基因药物口服给药的研究热情。以壳聚糖为载体的口服基因药物临床前研究已取得长足进展,但要成功地应用于临床,尚需对水溶性、胃肠道稳定性、膜通透性、转染效率等关键问题进行深入研究。

大肠癌疗效及预后预测生物标志物的研究进展

大肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一,具有死亡率高且发病率呈显著递增趋势等特点。本文主要介绍了大肠癌相关的预后和疗效预测生物标志物,主要包括表皮生长因子受体信号通路中的KRAS、BRAF、NRAS、PIK3CA、PTEN等分子生物标志物以及微卫星不稳定性(MSI)、染色体18q杂合性缺失(18qLOH)、CpG岛甲基化型(CIMP)等作为CRC预后、疗效预测生物标志物的研究现状。

β-氨基酸合成研究进展

综述了合成β-氨基酸的五种主要方法,包括化学拆分、手性色谱柱拆分、Arndt-Eistert反应、不对称合成和酶催化合成的最新研究进展,特别是近年来发展迅速的不对称合成和酶催化合成。参考文献90篇。

关环法合成麝香酮的研究新进展

从长链二元酸、有机金属催化剂介导的缩合反应、关环复分解反应和仿生合成4个方面,综述了2000年以来由关环法合成麝香酮的研究进展,评述了各类合成路线的优缺点,并对关环法合成麝香酮的研究进行了展望。

联合诱导子提高药用植物代谢产物产量的研究进展

探讨国内外关于生物和非生物诱导子对各种药用植物悬浮细胞中多种次生代谢产物的产量的影响及其诱导机制,通过分析认为,现有的单一的生物诱导子或非生物诱导子(茉莉酸甲酯、β-环糊精、Ag+、真菌诱导子、黑曲霉、米曲霉等)诱导的方法,存在作用弱、产量较低,底物选择性低等缺点,而联合诱导子(茉莉酸甲酯和β-环糊精或者水杨酸、Ag+和真菌诱导子;或者黑曲霉和米曲霉)对萜类、生物碱类、酮类、皂苷和蒽醌等产物的诱导作用则强于单一的诱导子,这一新技术方法,为通过植物细胞工业化放大生产天然产物提供了有益的途径。

罗勒的化学成分和药理作用研究进展

该文在查阅近十年国内外文献的基础上,对唇形科植物罗勒(Ocimum basilicum L)的化学成分和药理作用的研究进行了分析、归纳和总结。得出罗勒主要含挥发油类、黄酮类、香豆素类等化学成分,具有抗炎镇痛、抗氧化、抗肿瘤转移、抗血栓形成、抗消化道溃疡、抑菌、对血压的影响等方面药理作用。该文将其化学成分及药理作用活性和机制做了总结,以便对其更好的研究、开发和利用。

细胞周期蛋白激酶抑制剂研究现状

目前普遍观点认为,肿瘤产生的本质是细胞增殖的调节失控,而细胞的增殖要通过细胞周期来调控。细胞周期调控激酶复合物[cyclin dependent kinase(CDK)/Cyclin]活性的异常是导致细胞周期失控的根本原因。抑制CDK/Cyclin激酶的活性成为有效治疗肿瘤的策略之一。因此,针对CDK/Cyclin激酶抑制剂的研究是当前抗肿瘤药物开发的热点之一。本文对近年来CDK/cyclin抑制剂的种类及目前其在临床应用中出现的问题进行概述。

高效毛细管电泳法测定雄黄微生物炮制液中砷的形态成分

目的建立一种中药复杂体系中砷形态的分离分析方法,确定雄黄炮制液中砷的形态种类和含量。方法以常规炮制雄黄为对照,采用毛细管电泳法测定了3种雄黄微生物炮制液中（iAsⅢ、iAsV、MMAV和DMAV）的含量,其优化条件为：BGE：PDC/10 mmol.L-1和CTAOH/1 mmol.L-1。分离条件：电压25 kV,温度25℃,pH11.0,紫外检测波长设定在216nm。结果雄黄炮制液中4种形态砷能实现完全分离,4种成分的线性范围分别为：iAsⅢ：1.03~513.0 mg.ml-1（r=0.999 8）,iAsV：20~430.2 mg.ml-1（r=0.999 1）,MMAV：1.08~310.3 mg.ml-1（r=0.999 2）,DMAV：1.14~150 mg.ml-1（r=0.999 3）。日内迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.61%~0.82%,1.26%~3.12%。回收率范围为97.8%~103.2%。结论该方法较为简便、快速、准确、重现性好,适用于分离测定雄黄炮制液中砷的形态成分分析和其炮制质量控制。.

7-二乙胺基-3-(2'-吡啶)香豆素的新用途:溶酶体荧光探针

开发溶酶体荧光探针对于研究与溶酶体相关的细胞生理、病理活动具有重要的理论意义及实际应用价值。7-二乙胺基-3-(2'-吡啶)香豆素(L3)是一种弱碱性化合物,易于累积在酸性溶酶体中,有作为溶酶体荧光探针的潜质。本文详细研究了pH值对L3光谱性质的影响及其溶酶体定位成像能力。研究结果表明,该化合物具有一定的溶酶体定位能力,可以作为溶酶体荧光探针先导化合物。

表达Kallistatin的9型重组腺相关病毒的制备及其体外表达效率

采用三质粒磷酸钙共转染生产系统,制备出可以表达内源性抗肿瘤血管生成因子(Kallistatin)的9型重组腺相关病毒(rAAV2/9)和2型重组腺相关病毒(rAAV2/2).rAAV经银染法鉴定其纯度;采用WesternBlotting法比较rAAV2/9和rAAV2/2外壳蛋白的大小;qPCR方法检测rAAV的滴度.使用rAAV2/9-Kal-listatin和rAAV2/2-Kallistatin分别感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)后,RT-PCR和ELISA法分别检测Kallistatin的mRNA和蛋白表达水平.结果表明:纯化的病毒纯度达到98%以上;rAAV9外壳蛋白比rAAV2的大.感染HUVEC后,rAAV2/9介导Kallistatin在mRNA和蛋白表达水平都要比rAAV2/2高.

重组人可溶性TRAIL在毕赤酵母中表达与纯化及其抗肿瘤细胞活性

目的研究重组人可溶性TRAIL(sTRAIL)蛋白的表达和纯化,以及对HepG2细胞增殖与凋亡的影响。方法将人sTRAIL基因插入毕赤酵母表达载体pPIC9中,构建甲醇酵母分泌型表达载体pPIC9-sTRAIL,电击转化至GS115(his4),MD平板筛选出阳性菌株。对工程菌株发酵培养基成分、pH、甲醇浓度、诱导表达时间等条件进行优化,并初步分析重组sTRAIL蛋白的体外抗肿瘤活性。结果工程菌株在BMMY培养基(pH6.0)、1%甲醇条件下诱导表达48h目的蛋白浓度最高可达(58.7±2.4)mg/L。重组人sTRAIL蛋白能抑制HepG2细胞的增殖、诱导HepG2细胞的凋亡。结论优化了人sTRAIL的表达和纯化工艺条件,所生产的sTRAIL可用于抗肝癌新药的开发。

丙酮酸激酶前mRNA可变剪接的调控在肿瘤代谢中的作用和意义

丙酮酸激酶是糖酵解的关键酶之一,丙酮酸激酶m基因前mRNA(pre-mRNA)通过可变剪接产生M1和M2型两种丙酮酸激酶异构体,2种异构体的选择性表达决定肿瘤细胞的代谢表型,改变肿瘤细胞的增殖和生长。因此,调控丙酮酸激酶可变剪接,对于控制肿瘤细胞的生长代谢十分重要。研究发现,核不均一核糖核蛋白(hnRNP)A1/A2及多聚嘧啶结合蛋白(PTB,又称hnRNPⅠ)具有调控丙酮酸激酶前mRNA可变剪接的作用,并且致癌转录因子c-Myc与hnRNP A1/A2及PTB在肿瘤细胞中的过表达密切相关。我们结合相关研究进展,简要综述丙酮酸激酶可变剪接调控机制。

靶向Hmga2基因的siRNA药物筛选及抗肿瘤作用

HMGA2是一种结构性转录因子,在肺癌等多种肿瘤中过表达,是肿瘤治疗的候选靶点之一。RNAi技术作为一种经济、有效的基因沉默工具,是肿瘤治疗的新手段。本文以Hmga2基因为靶点,设计并合成了5条siRNA(HMGA2 siRNA1-5),通过MTT、平板克隆、Transwell、流式细胞术等手段,研究其对肺癌细胞(NCI-H446和A549)增殖、克隆形成、迁移和凋亡等能力的影响。结果表明,HMGA2 siRNA1、3、5对肺癌细胞的各项性能具有不同程度的影响,其中HMGA2 siRNA5尤为明显。HMGA2 siRNA5主要通过沉默Hmga2基因影响细胞性能,与其干扰素效应关系不大。本文筛选获得了可有效沉默Hmga2基因的siRNA,其在体外具有良好的抗肺癌活性,是具有一定潜力的肿瘤基因治疗候选药物。

重组细胞珠蛋白抗衰老与创伤愈合的初步研究

本研究利用实验室纯化得到的重组细胞珠蛋白(rCygb),通过人永生化角质形成细胞(HaCAT)H2O2氧化应激模型、小鼠皮下连续注射D-gal导致的皮肤衰老模型、CCl4引起的大鼠急性肝损伤模型和大鼠皮肤创伤愈合模型,对rCygb抗氧化、增强机体抗氧化酶活性、降低氧自由基含量、延缓皮肤衰老以及创伤愈合作初步研究。结果表明:rCygb可以提高总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性;降低乳酸脱氢酶(LDH)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性;减少丙二醛(MDA)含量。皮肤切片展示rCygb可以促进新生血管生成、增加胶原表达和提高抗炎能力。研究结果显示:rCygb可通过改善机体清除氧自由基的能力,延缓皮肤衰老和促进创伤愈合。

核酸适体在药物治疗中的应用

适体是能特异地识别靶分子并与之结合,进而影响靶分子生物活性的一类单链寡核苷酸,其作用类似于抗体,且具有靶标广泛、合成容易、性质稳定、容易保存运输等特点,目前已成为药物研发及临床诊断研究的新热点。本文就适体在新型药物和药物靶向给药系统领域的研发及临床应用进行了综述,并建议应对适体药物的修饰和靶向给药技术进行深入研究。

聚乙二醇修饰重组细胞珠蛋白对小鼠急性肝损伤的保护作用

旨在探究聚乙二醇修饰重组细胞珠蛋白(PEG modified recombinant cytoglobin,PEG-rCygb)对小鼠急性肝损伤的保护作用。采用CCl4诱导KM小鼠急性肝损伤模型,尾静脉注射PEG-rCygb,收集血清及肝脏组织检测各项生化指标及组织病理学变化。结果表明,PEG-rCygb治疗组小鼠肝脏系数减小,血清中AST﹑ALT水平降低,肝组织匀浆中MDA含量减少,GSH含量增加,T-SOD、CAT活性升高。肝组织切片HE染色显示PEG-rCygb可以缓解肝细胞脂肪变性,减少炎症因子,减轻肝细胞损伤。体外细胞学实验表明rCygb经PEG修饰后对H2O2造成的肝星状细胞(HSC)氧化损伤发挥的保护作用增强。研究结果显示PEG-rCygb提高了机体对自由基的清除能力,对CCl4引起的小鼠急性肝损伤具有保护作用。

E3连接酶HUWE1与真核翻译起始因子eIF4E的相互作用

为研究真核翻译起始因子eIF4E的调控,利用酵母双杂交系统从人骨髓cDNA文库筛选eIF4E相互作用蛋白质,核苷酸序列分析及同源性检索表明,其中一个约为0.4 kb的克隆与HUWE1(HECT,UBA和WWE domain containing 1,又称ARF-BP1,HECTH9,HUWE1)高度同源。细胞免疫共沉淀实验结果显示,在哺乳动物细胞水平能够检测到eIF4E蛋白与全长HUWE1的特异相互作用。利用构建好的含有HECT结构域的突变体进行相互作用位点研究,结果表明HUWE1的HECT结构域可以与eIF4E蛋白相互作用。