IgG1型重组单克隆抗体的肽图分析方法优化

目的建立一种快速的IgG1型重组单克隆抗体(单抗)药物反相-超高效液相色谱肽图分析方法,用于IgG1型单抗专属性鉴别、质量控制和批检验放行。方法选取4种IgG1型单抗(贝伐珠单抗、阿达木单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗),经变性、还原、烷基化、Lys-C蛋白酶解后,终止反应,离心取上清用反相-超高效液相色谱法检测,评价方法的专属性、重复性、耐用性,并通过Xevo G2-XS QTof质谱进行方法确认及鉴定。结果确定流动相为0.1%三氟乙酸/水和0.1%三氟乙酸/乙腈,色谱柱为Agilent Poroshell 120SB-C18型色谱柱(2.1 mm×150 mm,2.7 μm),检测波长214 nm,柱温40 ℃,样品室温8 ℃,梯度洗脱时间为65 min。方法学验证结果显示空白对照无干扰峰存在,专属性良好;各特征峰的6次重复性相对保留时间的相对标准偏差为0.00%~0.19%;不同仪器、不同色谱柱、不同酶量及样品稳定性研究的结果显示各特征峰相对保留时间的相对标准偏差均<2.0%,耐用性较好。结论建立的单抗药物肽图分析方法可用于IgG1型重组单抗的专属性鉴别及质量控制和批检验放行。

人源化小鼠模型在肿瘤免疫治疗中的应用进展

近年来,肿瘤免疫治疗在临床上显示出良好前景,但肿瘤和机体免疫系统的相互作用机制,尤其是肿瘤微环境中的免疫因素还有待深入了解。动物模型可以有效模拟体内肿瘤免疫微环境,是肿瘤免疫新疗法研发的重要工具之一。然而,小鼠等实验动物的免疫系统与人类在构成和反应机制上存在明显差异,于是人源化动物模型应运而生。人源化小鼠模型移植了人类细胞、组织或携带人类基因,已广泛应用于肿廇免疫治疗研究。此文对人源化小鼠模型的应用进展以及未来肿瘤免疫治疗中小鼠模型的应用方向及有待解决的问题做一综述。