单克隆抗体药物耐药机制的研究进展

单克隆抗体药物的问世,使疾病治疗的方式发生了革命性的变化。过去的20年,单克隆抗体药物在癌症、自身免疫等疾病的治疗领域发挥了重要的作用。单克隆抗体药物低毒和高特异性优势是其成功的关键。单克隆抗体药物的这两个优势使其快速替代传统的化学疗法,但其治疗效果也同样受到耐药性的困扰。耐药性是导致单克隆抗体药物治疗效果被抑制的原因之一,单克隆抗体药物靶向结合肿瘤细胞后又被清除的情况,称为抗体的调制。靶细胞通过顺式或反式方式实现调制,并形成二次吞噬,导致细胞聚集沉淀。本文将对每个过程的证据以及应对策略进行讨论。

抗体药物糖化检测方法及其生物学功能研究进展

糖化是一个重要的蛋白质修饰过程,可能影响治疗性蛋白药物(如单克隆抗体药物)的生物活性及分子稳定性。许多研究表明糖化血红蛋白水平升高与心血管疾病及动脉粥样硬化有着密切关系。人体的血浆蛋白,如白蛋白、球蛋白、纤维蛋白和胶原蛋白也可能被糖化,进而形成AGEs,蛋白药物的生产、储存以及药物在体内循环过程中都可能发生糖化反应。综述了治疗性抗体药物糖化的原因、分析方法,以及糖化对抗体药物生物学功能的影响,以期为临床抗体药物的开发、优化及贮存条件研究提供参考。

诺如病毒疫苗研究概况

诺如病毒(norovirus,NoV)是引发急性胃肠炎疾病的主要病原体之一。NoV易发生突变产生多种毒株,对人类健康造成严重威胁。由于缺乏成功的动物模型,抗NoV药物和疫苗的后续评价受到了限制,目前尚没有上市的疫苗用于NoV的预防。对NoV疫苗的研究进展进行了综述,重点阐述了病毒样颗粒(virus like particles,VLP)疫苗、病毒载体疫苗和基于P颗粒疫苗的研究现状和发展前景,以期为NoV疫苗的研发提供新思路。

双特异性抗体药物应用进展

基因工程的飞速发展推动了新型双功能抗体药物的成功研制。目前双功能抗体药物主要应用于肿瘤的免疫治疗、自身免疫疾病和感染类疾病的治疗,在组织再生和临床诊断领域也有应用。就双特异性抗体的发展史进行了简要回顾,对其在免疫治疗、组织再生和临床诊断等领域中的应用进展进行了综述,并展望了未来的发展方向,以期为新型双特异性抗体药物的研制提供参考。

狂犬病毒糖蛋白及其中和性抗体研究进展

狂犬病是一种由狂犬病毒引发的高致命人兽共患传染病,狂犬病毒糖蛋白作为唯一暴露于包膜外的病毒蛋白可有效诱生中和性抗体。本文介绍了狂犬病毒及其糖蛋白结构与功能,全面综述了狂犬病毒中和抗体研究进展及其作用机制,为中和抗体的深入研究提供理论基础和研发策略。

HIV纳米抗体的研究进展

纳米抗体因为其独特的性质和作用机理,在治疗性单克隆抗体中备受重视,纳米抗体药物呈现出良好的发展势头,关于HIV纳米抗体的研究也处于起步阶段。本文介绍4类在研的HIV纳米抗体:HIV gp120纳米抗体、HIV Rev纳米抗体、HIV Nef纳米抗体、HIV CXCR4纳米抗体。体外实验中,它们在对抗HIV感染、增殖、调控等方面具有强大的作用。虽然基础研究刚刚开始,但HIV纳米抗体无疑为艾滋病的治疗提供了更多的选择,为新的抗HIV药物的研究提供了机遇。

生物药物分析方法验证体系的研究

目的:探讨生物药物分析方法验证中存在的问题及改良策略。方法:分析国内外对于生物药物分析方法验证的理念、特点及研究进展,将质量源于设计的理念同传统方法验证理念进行比较研究。结果与结论:将指标化、终点化控制的传统验证体系改良为可视化、可溯源、立体化过程控制的方法验证系统。将方法建立及验证工作有机融合一体,为高质量数据提供保障。这个体系不但可有效整理记录方法建立及验证过程,利于分析方法转移过程中有效信息的传递,也有利于生物药物分析方法的评价和研究。

蛋白质药物糖基化工程化改造研究进展

多种哺乳和非哺乳动物的蛋白质表达系统已成功用于重组糖蛋白药物的生产。糖基化对于生物药品的研究开发至关重要,对生物药品的药效、半衰期及抗原性等产生重要影响。糖基化工程的目的是生产组分明晰、结构均一的N-和O-连接的糖基化蛋白药物。N-糖基化改造的相关研究显示,利用哺乳动物和非哺乳动物表达系统可以表达均匀的N-聚糖重组糖蛋白。与N-糖基化改造相比, O-糖基化的改造研究尚处于起步阶段。首个糖基化工程单克隆抗体已在美国和日本获得上市批准。综述了重组蛋白表达系统的糖基化工程化改造的研究进展,包括蛋白质药物的N-糖基化改造和O-糖基化改造的最新进展,以期为蛋白质药物的糖基化工程改造研究提供参考。

N-糖基化对蛋白质药物关键质量属性影响机制的研究进展

蛋白质糖基化是真核生物蛋白质翻译后修饰的主要方式。它分布于许多膜结合蛋白上,以N-或O-形式和蛋白质连接,其中N-连接是天冬酰胺(N)和聚糖连接,O-连接主要是苏氨酸(T)或丝氨酸(S)同聚糖连接。许多激素、酶以及抗体的N-糖基化位点一般含有保守序列N-X-S/T(其中X为非脯氨酸的氨基酸),糖基化蛋白一般分布于细胞外,内质网(endoplasmic reticulum,ER)、高尔基体和溶酶体内[1]。

蛋白多肽类药物长效化技术研究策略

多肽/蛋白质类药物普遍存在体内半衰期短的问题,使其应用受到了限制。近年来,蛋白质半衰期的研究取得了很大的进展,许多技术已经被提出并测试延长治疗性蛋白的作用时间,如与其他蛋白基因融合(免疫球蛋白域或血清蛋白,如白蛋白)、与聚合物结合(PEG化修饰、聚唾液酸化、HEP化等)。这些技术主要基于本身较长的半衰期及循环机制调控以延长多肽/蛋白质类药物的半衰期。针对上述的多种长效化方式及相关产品进行了综述与讨论,以期为此类药物的长效化研究提供思路。

临床研究中的胰岛素类药物进展

胰岛素在临床上主要用于依赖型糖尿病以及部分非胰岛素依赖型糖尿病的治疗。近年来,随着糖尿病患者的增多和治疗方案的逐步成熟,胰岛素更广泛地用于糖尿病的治疗。目前全球在研的胰岛素类药物主要包括胰岛素类似物和胰岛素新剂型。通过检索和整理相关文献,系统地介绍了国外近3年处于不同临床阶段的胰岛素类药物,提出在研的胰岛素注射剂型新药主要为长效胰岛素制剂;非注射给药制剂几乎囊括所有非注射给药途径,包括口服给药、肺部给药、透皮给药等,非注射型胰岛素的开发被制药企业所追逐。

细胞内单域抗体的研究及应用进展

来自骆驼或鲨鱼的单域抗体(Single domain antibodies,sd Ab)仅包含抗体的重链可变区,而从人抗体中筛选到的人sd Ab中包含重链(Heavy chain,VH)或轻链(Light chain,VL)的可变区。与完整抗体和sc Fv(Single chain antibody fragment)相比,sd Ab是体外和体内都稳定的非聚合分子。与sc Fv片段不同,sd Ab是细胞质/细胞核蛋白质的新型抑制剂,并可以在细胞质中正确折叠。sd Ab能特异性抑制翻译后修饰,如磷酸化位点,构象异构体或蛋白质的相互作用区域,这些区域不适合使用基因敲除及RNAi技术进行研究。作为细胞质/细胞核蛋白质的抑制剂,使用sd Ab的研究数量持续增加,同时使用无需免疫动物的合成单域抗体文库中,研究者筛选出一些有成药应用前景的药物分子。目前,研究涉及的抗原靶点包括病毒蛋白、癌相关蛋白、毒素、神经系统相关蛋白、植物和果蝇蛋白等,可以针对几乎所有的细胞质/细胞核中的抗原表位,进行功能性sd Ab的筛选。逃逸蛋白结构和细胞穿透肽的高效转染的研究,拓宽了sd Ab的应用领域。新一代细胞特异性纳米颗粒,将携带细胞质/细胞核sd Ab作为蛋白抑制剂,开拓病毒感染及癌症新的治疗领域。

胰岛素样生长因子-1衍生物的分子设计与药物开发

胰岛素样生长因子-1(IGF-1)广泛参与细胞增殖、分化和凋亡等生理过程,参与许多正常和疾病状态的生理现象;重组人IGF-1已用于治疗原发性IGF-1缺陷引发的侏儒症。为了使IGF-1更具成药优势,扩大应用范围,扩展其安全性与有效性,科研人员正在积极开发IGF-1的衍生物和类似物。介绍了采用分子设计的技术手段开发的IGF-1衍生物,截短型IGF-1和加长型IGF-1,IGF-1及衍生物与Ig G1的Fc片段的融合蛋白,聚乙二醇化的IGF-1等。提出基于IGF-1衍生物分子优良的药动学和药效学特性,体内半衰期长、生物活性高的新型IGF-1药物一定会在将来临床应用中发挥重要作用。

毛细管电泳技术在单克隆抗体药物分析中的应用探讨

单克隆抗体药物近年来发展迅速,是生物医药领域发展的主要方向。由于其相对分子质量大,结构复杂,在解决其质量问题时必须在传统分析方法的基础上结合多种分析方法。毛细管电泳技术作为一种新兴技术具有分离效率高、模式多、分析速度快等优势,特别适合单克隆抗体药物的分析。本文对毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦和毛细管区带电泳在单克隆抗体药物的纯度分析、等电点及电荷异质性分析和N-寡糖分析中的应用进行了综述。

糖蛋白激素研究进展

糖蛋白激素是人体内一类重要激素家族,由4个成员构成—促卵泡激素(FSH)、促黄体素(LH)、促甲状腺激素(TSH)和绒毛膜促性腺激素(CG)。这些激素结构相似,但功能各异。主要从结构方面对糖蛋白激素的亚基装配、受体识别及长效化改造进行分析综述。

糖蛋白药物的多糖结构解析进展

细胞表达的治疗性单克隆抗体多数是糖蛋白。附着在蛋白质上的多糖直接影响蛋白质药物的稳定性、生物活性及免疫原性。因此,应对糖蛋白产品上的多糖进行充分分析,以控制产品质量。然而,糖蛋白上多糖的复杂性对检测带了艰巨挑战。介绍了糖蛋白上多糖分析的最新进展,以及利用凝集素芯片技术的高通量多糖分析法,重点介绍了用于检测糖基化位点、糖链结构和含量的测定分析方法,以期为糖蛋白药物的研发提供参考。

生物技术药物中宿主DNA残留Q-PCR检测法的方法验证

自20世纪50年代,用于生产生物技术药物的细胞基质一直因其安全性而备受关注,生产用基质细胞经历了从原代细胞,二倍体细胞到传代细胞的发展历程,人们对其潜在风险的认识也在不断变化。虽然,至今没有因为生物制品中DNA残留量而引发不良反应或安全事故,但其用量随着临床治疗的需求越来越大,需要长期反复用药的生物制品也越来越多,同时,疫苗的使用者为健康人群,这些都使得药品监管部门更加重视生物技术产品的安全性，其中DNA残留量的质量控制一直是人们关注的热点。

N-糖链切除对重组抗狂犬病毒单克隆抗体中和活性的影响

重组抗狂犬病毒单克隆抗体是一种全人源的抗病毒感染单抗,主要用于狂犬病毒暴露后预防。采用糖苷酶处理2种重组抗狂犬病毒单克隆抗体Mab1、Mab2水解切除N-糖链,通过糖染色和毛细管电泳检测确定N-糖链酶解程度,利用快速荧光灶抑制试验检测其中和活性,分析N-糖链切除对该单抗中和活性的影响。结果显示,N-糖链切除后抗体中和活性无明显变化。说明N-糖链对这两株抗狂犬病毒单抗的体外中和活性不是必须的结构成分。

蛋白药物生产中支原体检测方法的建立及应用

为检测中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞培养过程中的支原体污染,以CHO细胞的管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶作为内参基因,将内参引物和支原体引物同时放置在一个PCR体系中,确立了一种快速、准确、稳定的PCR检测方法。通过优化两种引物的浓度配比,确定内参基因引物浓度为5μmol/L,支原体引物浓度为10μmol/L。与DNA荧光染色法相比,PCR法检测结果一致,减少了假阴性结果,缩短了检测时间,可以满足生产过程中的支原体污染的监测。

亲和技术在药物筛选中的应用

靶向药物由于其药效好、特异性强且毒副作用小,已成为全球新药研发的热点。配体与大分子之间的相互作用在寻找先导化合物的过程中至关重要。亲和筛选可以解决传统筛选技术过高的假阳性和假阴性的概率及逐一测定化合物活性的限制等问题,相比传统的生物测定有明显的优势。