牛磺酸对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤时细胞凋亡的影响

目的:从细胞凋亡的角度探讨肢体缺血再灌注(LIR)后急性肺损伤(ALI)的发病机制及牛磺酸的影响。方法:复制大鼠肢体缺血再灌注(LIR)损伤动物模型,采用TUNEL法、电泳法、半定量逆转录聚合酶链反应(SqRT-PCR)及免疫组织化学等技术观察LIR后肺损伤发生过程中,肺泡上皮及血管内皮细胞凋亡变化以及Fas/FasL系统蛋白质和mRNA表达的改变。结果:大鼠LIR后,肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡明显增加;肺组织Fas/FasL mRNA和蛋白质表达明显上调,DNA断链率、组织钙含量和活性氧(ROS)升高,且与肺泡上皮及血管内皮细胞凋亡的增加相一致。结论:肺泡上皮及血管内皮细胞凋亡以及Fas/FasL系统表达明显上调可能参与LIR后ALI的发生;牛磺酸可减少肺组织细胞凋亡,但并非通过影响Fas/FasL基因表达而实现其保护效应。

一氧化氮在大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤中的作用

在大鼠肢体缺血再灌注 (LIR)损伤模型上 ,观察应用一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂氨基胍 (AG)及一氧化氮(NO)合成前体物质L 精氨酸 (L Arg)对大鼠骨骼肌和肺组织的NOS活性、NO含量、丙二醛 (MDA)、髓过氧化物酶(MPO)和湿 /干重 (W/D)值的影响以及肺磷脂酰胆碱 (PC)的改变 ,并观察了肺组织在光镜下形态学的变化。结果显示 ,与对照组比较 ,LIR组骨骼肌和肺组织NOS活性均增强 ,MDA值、MPO活性增加 ,W/D值增大 ,肺PC含量降低 ;光镜下 ,肺间质多形核粒细胞 (PMN)聚集和浸润 ,肺间隔面密度值增加。给予AG后 ,与LIR组相比NOS活性降低 ,NO产生下降 ,而MPO活性、W/D比值增加 ,肺PC含量进一步降低 ;镜下PMN聚集和浸润增加 ,肺间隔面密度值增大。而给予L Arg后能减轻LIR引起的上述变化。上述结果提示 ,LIR后 2h时 ,骨骼肌和肺组织NOS活性增加 ,NO产生增多 ;内源性NO可能在LIR所诱发的早期急性肺损伤中起保护作用。

一氧化氮、内皮素-1对大鼠肢体缺血/再灌注后脑损伤的影响

目的 :研究一氧化氮 (NO)和内皮素 1(ET 1)在大鼠肢体缺血 /再灌注 (LI/R)后脑损伤中的作用 ,探讨NO/ET 1平衡关系的变化对脑损伤的影响。方法 :在大鼠LI/R损伤模型上 ,应用NO合成前体物质L 精氨酸 (L Arg)、一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂氨基胍 (AG)、ETA 受体阻断剂BQl2 3进行干预 ,观察血浆NO、ET 1、MDA、XOD、SOD、LDH及脑组织tNOS、iNOS、cNOS、NO、ET 1、MDA、XOD、MPO、SOD的变化。结果 :与对照组比较 ,I/R组血浆MDA、XOD、LDH及脑组织MDA、XOD、MPO升高 ,SOD活性降低 (P <0 .0 1) ,脑组织tNOS和iNOS明显升高 ,而cNOS明显降低 (P <0 .0 1) ,I/R组血浆及脑组织NO、ET 1增加 ,NO/ET 1比值降低 ,脑损伤加重。应用L Arg及BQ12 3后 ,血浆及脑组织NO/ET 1比值较I/R组升高 ,脑损伤减轻 ,应用AG后 ,NO/ET 1比值降低 ,脑损伤进一步加重。结论 :肢体缺血 /再灌注后 ,一氧化氮与内皮素 l的比值降低时脑损伤加重。

氧化应激在大鼠肢体缺血/再灌注心肌损伤中的作用

目的观察大鼠肢体缺血/再灌注(LIR)后心肌组织的损伤性变化并探讨氧化应激在其发生机制中的作用。方法用健康雄性Wistar大鼠制备LIR动物模型,采用生物化学方法及比色法测定心肌组织丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、ATP、乳酸(LD)含量及ATP酶(ATPase)活性;测定血浆肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,光镜观察心肌组织的形态学变化。结果与对照组比较,再灌注后心肌组织ATP储备减少,LD含量增加,各型ATPase活性下降,血浆CK、CK-MB及心肌组织MDA、MPO含量均增高(P<0·05或P<0·01)。镜下可见再灌注后心肌组织炎性细胞浸润,部分心肌横纹不清晰,少数心肌细胞变性。结论LIR可对心肌组织造成一定损伤,这与体内的氧化应激状态有密切关系。

大鼠肢体缺血再灌注后肺组织BAX基因表达上调

目的探讨在体大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后肺组织BAX和BCL2基因表达的变化。方法在大鼠肢体缺血再灌注(LIR)损伤动物模型上,用TUNEL法、电泳法及免疫组织化学等技术观察LIR后肺损伤发生过程中,肺组织细胞凋亡变化以及BAX和BCL2蛋白质表达的改变。结果大鼠LIR后,肺血管内皮细胞及附壁的炎细胞凋亡明显增加;肺组织BCL2表达的变化不大,但BAX蛋白质表达明显上调,DNA断链率升高,活性氧(ROS)含量增加,且与肺组织细胞凋亡的增加相一致。结论肺组织细胞凋亡以及BAX和BCL2表达的变化可能参与LIR后肺损伤的发生。

奥扎格雷钠对大鼠肢体缺血再灌注所致肺损伤的保护作用

目的:探讨奥扎格雷钠(Ozagrel sodium)对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤的影响。方法:将60只雄性SD大鼠随机分成正常对照组、缺血再灌注组和奥扎格雷钠组,建立大鼠肢体缺血再灌注损伤模型。用光镜和电镜观察肺组织形态学改变和超微结构改变,用竞争放射免疫分析法测定血浆血栓素A2(TXA2)代谢产物血栓素B2(TXB2)和前列环素(PGI2)代谢产物6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α),比色法测定肺组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和黄嘌呤氧化酶(XOD),双抗体夹心ABC-ELISA法测定肺组织中白细胞介素(IL)-8和肿瘤坏死因子(TNF)-α,并进行比较。结果:与缺血再灌注组相比,奥扎格雷钠组肺血管扩张、炎性细胞聚集、线粒体水肿、内膜下基底膜水肿、内皮细胞肿胀等情况明显减轻;血浆TXB2和6-Keto-PGF1α含量显著降低;肺组织MDA、XOD活力明显降低,SOD活力升高,肺组织IL-8、TNF-α水平均明显降低。结论:奥扎格雷钠可减轻大鼠肢体缺血再灌注后肺部的损伤。

缺血预处理对肢体缺血/再灌注大鼠胃粘膜损伤的保护效应

目的:观察肢体缺血再灌注(LI/R)对胃粘膜的损伤作用及缺血预处理对其影响,探讨胃粘膜损伤的机制及缺血预处理(IPC)的作用机理。方法:观察并测定肢体缺血4h再灌注4h后以及应用肢体缺血预处理干预后各组胃粘膜损伤指数,胃结合粘液量;检测胃粘膜中髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)含量的变化以及血浆中乳酸脱氢酶(LDH)的含量变化。结果:大鼠LI/R后胃粘膜损伤指数增加;胃结合粘液量较对照组显著下降;胃粘膜中MPO、MDA、XOD的值均较对照组增加,血浆中LDH的含量亦较对照组显著增加,胃粘膜组织中SOD的酶活力下降;IPC组与LIR组对比,胃结合粘液量较LIR组显著增加;胃粘膜损伤指数、胃粘膜中MPO的含量、以及胃粘膜中MDA、XOD、LDH均较LI/R组明显降低;胃粘膜中SOD酶活力增强。结论:LI/R作为应激原可引起胃粘膜损伤,导致应激性溃疡的发生;自由基在肢体缺血再/灌注后继发胃粘膜损伤过程中发挥作用。缺血预处理可减轻肢体缺血再灌注后的胃粘膜损伤,其作用机制可能是通过减少自由基的产生而发挥其保护作用。

黄芪对肠缺血-再灌注损伤过程中肺表面活性物质及LPO含量的影响

目的 :探讨肠缺血 再灌注损伤时 ,肺表面活性物质及脂质过氧化物 (LPO)含量的改变及其意义 ,以及黄芪在缺血 再灌注过程中对肺损伤的保护作用。方法 :复制家兔肠损伤模型 ,测定血浆和肺组织LPO及肺表面活性物质含量变化 ,同时计算肺系数及进行肺病理学检查 ,并观察黄芪对LPO及肺表面活性物质含量的影响。结果 :静脉给予黄芪注射液可提高肺表面活性物质含量 ,减少LPO的生成 ,对缺血 再灌注引起的肺组织损伤有明显的保护作用。结论 :肺表面活性物质下降可能与LPO上升有关 ,黄芪通过其稳膜作用能减轻或在一定程度上防止缺血

肢体缺血再灌注后红细胞变形能力的改变及其缺血预适应的保护作用

目的和方法 :在家兔肢体缺血再灌注 (I/R)损伤模型上观察缺血预适应 (PC )对红细胞变形性的影响 ,并探讨其可能机理。结果 :家兔肢体I/R后RBC变形能力明显降低 ,PC可以减轻I/R引起RBC变形性的改变 ,即RBC最大变形指数 (DI) max、积分变形指数IDI与对照组相比都未见显著差异 ;并抑制脂质过氧化的发生。结论 :PC对家兔I/R红细胞膜有保护作用。

西米替丁对肾上腺素性肺损伤的预防作用

静脉注射肾上腺素复制家兔急性肺损伤模型，采用硫代巴比妥酸显色法测定血浆及肺组织匀浆丙二醛含量；用薄层层析及无机磷定量法测定肺表面活性物质的主要功能成分卵磷脂含量。结果表明，肾上腺素致肺损伤后血浆和肺组织匀浆丙二醛含量明显增加，肺组织匀浆卵磷脂含量明显减少。事前给予西米替丁的动物，丙二醛含量减少，卵磷脂含量未见明显降低。提示卵磷脂的减少可能与丙二醛增加相关，而西米替丁能抑制这一过程。进而保护肺脏免于损伤。

大鼠肢体缺血/再灌注后肺损伤及一氧化氮合酶的变化与意义

目的:研究大鼠肢体缺血/再灌注后急性肺损伤时,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(i-NOS)的表达及其在急性肺损伤发生中的作用。方法:雄性Wistar大鼠于后肢根部阻断血流后松解(4h/4h),分别给予L-Arg和氨基胍(AG)预先干预,分为control、IR、L-Arg和AG组,免疫组织化学方法检测肺组织中iNOS和eNOS的表达,同时检测肺组织中MDA、MPO、W/D和NO2-/NO3-值,肺组织形态学观察以评价肺损伤的程度。结果:与control组比较,I/R组eNOS表达降低,iNOS表达增强,MDA、MPO、W/D和NO2-/NO3-值增加,肺组织充血、炎细胞浸润,肺泡腔渗液;与I/R组比较,L-Arg组eNOS、iNOS表达无明显变化,NO2-/NO3-增加,MDA、MPO、W/D降低,肺组织损伤有减轻趋势,AG组eNOS表达无明显变化,iNOS活性降低,NO2-/NO3-减少,MDA、MPO、W/D增加,肺组织损伤有加重趋势。结论:肢体缺血/再灌注急性肺损伤过程中,iNOS表达增加,NO生成增多,在肺损伤发生中有一定的保护作用。

牛磺酸对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤时黏附分子ICAM-1表达的影响

目的:探讨牛磺酸对大鼠肢体缺血再灌注致肺损伤时黏附分子ICAM-1表达的影响。方法:复制大鼠肢体缺血再灌注(LIR)损伤模型,采用流式细胞技术、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting观察LIR后肺损伤发生过程中,血液中CD18阳性的多形核白细胞(PMN)百分率、肺系数(LI)与肺通透指数(LPI)、肺组织形态学的改变、肺组织ICAM-1在mRNA和蛋白水平的变化及牛磺酸对上述指标的影响。结果:大鼠肢体缺血再灌注后LI、LPI及CD18阳性细胞数均明显增加,肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性增加,ICAM-1表达明显升高,而提前给予牛磺酸可以明显抑制这些变化,从而对肺起一定保护作用。结论:肺组织细胞ICAM-1表达上调及血液中CD18阳性细胞数的增加可能参与LIR后肺损伤的发生;牛磺酸可减少血液中CD18阳性细胞数,并且下调肺组织ICAM-1的表达,从而减轻肺损伤。

山莨菪碱对油酸致兔急性肺损伤的防治作用

目的：探讨山莨菪碱（６５４２）对油酸引起的家兔急性肺损伤的防治作用及其机制。方法：观察６５４２对油酸致急性肺损伤兔血浆及肺组织丙二醛（ＭＤＡ）、肺表面活性物质（ＰＳ）、血浆纤维连接蛋白（Ｆｎ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及酸性磷酸酶（ＡＣＰ）含量的影响；同时进行了组织病理学的光镜及电镜观察。结果：致伤前先给予定量的６５４２，可使油酸致急性肺损伤家兔血浆及肺组织ＭＤＡ的产生及血浆ＬＤＨ、ＡＣＰ的释放减少；且可防止ＰＳ及血浆Ｆｎ的降低，减轻肺组织的损伤程度。结论：油酸致急性肺损伤后ＰＳ减少可能与ＭＤＡ增加有关；６５４２通过其稳膜作用能减轻或在一定程度上防止肺损伤的发生和发展。

大鼠肢体缺血再灌注后肺组织超微结构的改变

对正常组和肢体缺血再灌注 (LIR)组大鼠的肺组织进行了通透性的测定和超微结构的形态学观察。研究结果显示实验组肺血管通透性增加 ,磷脂酰胆碱 (PC)含量减少。电镜下可见肺泡毛细血管内皮细胞、Ⅰ型肺泡上皮细胞水肿变性 ,肺泡壁增厚 ;Ⅱ型肺泡上皮细胞内板层体排空 ,线粒体肿胀、空变 ;肺间质水肿 ;肺泡表面活性物质脱落。本文结合上述超微结构变化 ,讨论了肢体缺血再灌注后急性肺损伤 (ALI)

牛磺酸联合葛根素对2型糖尿病大鼠血液流变学的影响

目的探讨牛磺酸联合葛根素对2型糖尿病大鼠血液流变学的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为糖尿病组(DM组)、单用牛磺酸组(Tau组)、单用葛根素组(Pue组)和牛磺酸联合葛根素组(Tau+Pue组)。8周后,测4组大鼠血浆葡萄糖、糖化血红蛋白、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及血液流变学指标。结果与糖尿病组相比,单独应用牛磺酸或葛根素均能不同程度地降低糖尿病大鼠的血糖、MDA和糖化血红蛋白,升高造模大鼠的SOD;并且降低大鼠全血黏度、红细胞聚集指数,提高红细胞变性指数。而牛磺酸与葛根素联合使用不仅使上述变化更加明显,而且还能明显降低血浆黏度、红细胞压积和红细胞刚性指数。结论牛磺酸联合葛根素能明显改善糖尿病大鼠的血液流变学。

NO对大鼠肢体缺血/再灌注后肾脏P-选择素表达的影响及意义

目的:探讨一氧化氮(NO)对大鼠LI/R后肾脏P-选择素表达的影响及意义。方法:采用本室常规方法复制大鼠LI/R模型。将大鼠随机分为四组:对照组,LI/R组,L-Arg组和L-NAME组。观察肢体缺血4h再灌注4h后各组动物血浆NO及肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)的变化;观察肾组织NO、髓过氧化物酶(MPO)、总一氧化氮合酶(tNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、结构型一氧化氮合酶(cNOS)的改变;测定尿蛋白含量、利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测尿蛋白性质;免疫组织化学方法检测肾组织P-选择素(P-selectin)的蛋白表达,结合自动图象分析系统对其结果进行定量分析;肾组织切片经六氨银染色在光镜下观察其形态学改变。结果:与control组比较,LI/R组大鼠血浆NO、BUN、Cr均明显升高;肾组织MPO、NO、tNOS、iNOS均明显增加,而cNOS明显下降;尿蛋白含量增多,电泳显示,有大分子量蛋白排出;光镜下可见肾小管上皮细胞水肿,有炎细胞浸润;免疫组化结果显示:P-selectin蛋白表达明显较control组增强。与LI/R组相比,L-Arg组各项损伤指标明显减轻;肾组织P-selectin蛋白表达明显减弱;L-NAME组血浆和肾组织各项损伤指标明显加重;肾组织P-selectin蛋白表达明显增加。结论:大鼠LI/R后急性肾损伤的发生可能与P-selectin的表达有关;NO可能通过减弱P-selectin的表达及中性粒细胞的浸润,减轻LI/R后肾脏组织形态学及肾功能的损伤性变化。

大鼠肢体缺血/再灌注后NO/ET-1平衡与脑组织氧化损伤关系的研究

目的:研究一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)在大鼠肢体缺血/再灌注(L I/R)后脑氧化损伤中的作用,探讨NO/ET-1平衡关系的变化对脑损伤的影响。方法:在大鼠L I/R损伤模型上,观察血浆NO,ET-1,MDA,XOD,SOD,LDH,CK及脑组织tNOS,iNOS,cNOS,NO,ET-1,MDA,XOD,M PO,SOD,W/D的变化。结果:L I/R后血浆LDH,CK,MDA,XOD和脑组织MDA,XOD,M PO,W/D较对照组升高,自由基清除酶SOD活性下降,在再灌注4h脑组织损伤最为严重。再灌后,脑组织tNOS和iNOS活性升高,而cNOS活性降低,血浆及脑组织中NO,ET-1增加,NO/ET-1比值降低,在再灌注4h降低最为明显。结论:大鼠L I/R后脑损伤的发生可能与机体自由基产生增多,清除酶活性下降以及NO/ET-1失平衡有关。

川芎嗪对脑缺血/再灌注后所致肺损伤的影响

目的:观察川芎嗪对脑缺血/再灌注后肺损伤的影响。方法:采用Pulsinelli等的方法建立大鼠急性全脑缺血/再灌注模型。将Wistar大鼠随机分为三组,即:对照组(Control)、缺血/再灌注组(I/R)、川芎嗪+缺血/再灌注组(TEP+I/R),分别测定各组肺功能(PaO2、PaCO2),肺系数(LI%)、血浆和肺组织中与自由基有关物质的含量。结果:川芎嗪可有效改善脑缺血/再灌注后肺功能,减轻肺水肿,减少胞浆酶的漏出,增加自由基清除酶的活性,抑制组织脂质过氧化的发生。结论:川芎嗪对脑缺血/再灌注后肺损伤具有保护作用,其机制可能与其抗氧自由基和膜保护作用有关。

脂质体携载前列腺素E_1对大鼠肢体缺血—再灌注损伤的保护作用

在大鼠肢体缺血—再灌注模型上观察脂质体携载前列腺素Ｅ１（ＰＧＥ１）的保护作用。结果发现，脂质体携载ＰＧＥ１治疗明显减轻缺血—再灌注肢体的肌肉水肿、减少中性粒细胞浸润，抑制肌肉组织及细胞线粒体的钙超载，抑制缺血—再灌注引起的血浆乳酸脱氢酶和组织蛋白酶Ｄ活性增加，降低血浆脂质过氧化物丙二醛含量和血浆内皮素含量。脂质体携载ＰＧＥ１的治疗作用明显优于相同剂量的游离ＰＧＥ１的作用。实验结果提示，脂质体携载ＰＧＥ１对缺血—再灌注损伤具有潜在临床治疗价值。

丹参酮ⅡA磺酸钠对大鼠肢体缺血再灌注损伤时IL-8、TNF-α的影响

目的探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(Sodium TanshinionⅡAsilate)对大鼠肢体缺血再灌注后白细胞介素(IL)-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α的影响。方法将60只雄性SD大鼠随机分成对照组、缺血再灌注组和丹参酮组,建立大鼠肢体缺血再灌注损伤模型。利用光镜和电镜观察肺组织形态学改变和超微结构改变,利用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血浆、肺组织、骨骼肌中白细胞介素(IL)-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α,并进行比较。结果与缺血再灌注组相比,丹参酮组肺血管扩张、炎性细胞聚集、组织水肿等均减轻,线粒体水肿、空泡变性,内膜下基底膜水肿、内皮细胞肿胀等情况明显减轻;血浆、肺组织、骨骼肌中IL-8、TNF-α的含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA可以降低大鼠肢体缺血再灌注后血浆、肺组织、骨骼肌中IL-8、TNF-α的水平。