人脂肪组织来源的神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨人脂肪组织来源的神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注模型。60只健康雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组(6只),假手术组(6只),缺血对照组(24只)和移植治疗组(24只);后2组又分为再灌注7d、14d、21d、28d组(各6只)。体外培养脂肪基质细胞,诱导分化为神经干细胞。造模成功后24h,移植治疗组经尾静脉移植人脂肪组织来源的神经干细胞悬液(细胞浓度为2×106/ml),缺血对照组经尾静脉注射生理盐水,假手术组不做任何处理。TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化SABC法检测Bcl-2、Bax表达。结果与缺血对照组比较,移植治疗组各时间点的细胞凋亡数均明显减少(均P<0.01),Bcl-2阳性细胞数明显增高(均P<0.01),Bax阳性细胞数明显减少(P<0.05～0.01)。结论人脂肪组织来源的神经干细胞可能通过上调Bcl-2蛋白表达、下调Bax蛋白表达,减少局灶性脑缺血细胞凋亡;对脑缺血再灌注损伤后的神经细胞起保护作用。

大鼠脑创伤后海马区Fas蛋白表达与神经细胞凋亡

目的 进一步深入研究颅脑创伤后神经细胞凋亡的机制,探讨美洛宁对大鼠脑创伤后的影响,为临床治疗颅脑创伤病人提供一定的理论基础。方法 采用重型闭合性颅脑创伤模型,将Wistar大鼠3 0 0只随机分为脑创伤组、美洛宁治疗组、假手术组,每组又分别划分成伤后3、6、12、2 4、48、72、168及3 3 6h等8个时相组,每时相组各12只,另12只作为正常对照组。动态观察大鼠颅脑创伤后海马区的神经细胞凋亡以及Fas蛋白的表达情况。结果 脑创伤后海马区出现Fas蛋白表达增加并出现神经细胞凋亡。美洛宁治疗组伤后海马神经细胞Fas蛋白表达高峰较创伤组明显下调,凋亡阳性细胞密度亦较创伤组有所下调。结论 脑创伤后Fas蛋白表达增加可能造成伤后神经细胞凋亡,美洛宁能够减少脑创伤后Fas蛋白表达,并减少神经细胞凋亡。

大鼠脑创伤后海马区p53蛋白表达对神经细胞凋亡影响

目的 :从分子生物学水平 ,进一步深入研究颅脑创伤后神经细胞延迟性死亡的机制 ,探讨美洛宁对大鼠脑创伤后的影响 ,为临床治疗颅脑创伤提供一定的理论基础 .方法 :采用重型闭合性颅脑创伤模型 .利用免疫组化及原位凋亡检测 ,动态观察大鼠颅脑创伤后海马区p5 3蛋白的表达及神经细胞凋亡 .结果 :假手术组及正常对照组海马CA2区未检测出 p5 3蛋白的表达及凋亡阳性细胞 .创伤组大鼠伤后 3h海马CA2区出现 p5 3蛋白表达 ,2 4h (A =0 .14 9± 0 .0 16 )达高峰 ,72h即有所下降 ;伤后 2 4h ,海马CA2区即出现少量凋亡阳性细胞 ,于 16 8h (2 9.2± 4 .7/HP)达高峰 ,336h凋亡阳性细胞下降 .美洛宁组的 p5 3蛋白表达高峰 (A =0 .10 6±0 .0 17)及细胞凋亡的高峰 (2 1.0± 4 .6 /HP)较创伤组明显下调 .结论 :脑创伤后 p5 3蛋白表达增加可能造成神经细胞凋亡 ,美洛宁能够减少脑创伤后 p5 3蛋白表达 ,抑制神经细胞凋亡 .

脂肪基质细胞诱导分化为神经元细胞的实验

背景:寻找合适的种子细胞是移植治疗脑血管疾病及其他中枢神经系统疾病的关键。目的:观察人脂肪组织来源的基质细胞分化为神经元细胞的能力。方法:脂肪组织取自要求去除腹部多余脂肪的健康成人,供者无传染性疾病和内分泌疾病。分离培养脂肪组织来源的基质细胞,采用神经诱导培养基加GM1对其进行诱导培养。倒置相差显微镜下连续观察细胞生长情况和形态变化,免疫组织化学法鉴定神经前体细胞的特异性标志神经巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶和微管联合蛋白2的表达情况。结果与结论:①经神经诱导培养基加GM1诱导后,分化后的细胞大部分呈典型的神经元样细胞形态。②倒置相差显微镜下可见,于诱导后1h出现神经巢蛋白表达阳性,5h出现神经元特异性烯醇化酶和微管联合蛋白2表达阳性。提示脂肪基质细胞可分化为神经元细胞,分化后的神经元细胞具有表达神经巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶和微管联合蛋白2的功能。

钙蛋白酶活性对颅脑创伤大鼠海马神经细胞凋亡和学习记忆的影响

目的:探讨钙蛋白酶活性对重型闭合性颅脑创伤大鼠海马神经细胞凋亡和学习记忆功能的影响。方法:采用重型闭合性颅脑创伤模型。将120只SD大鼠随机分为创伤组、治疗组、假手术组及对照组,前3组各36只分为伤后6、12、24、48、72h5个时相组,每亚组6只,进行钙蛋白酶活性测定及凋亡检测,余6只进行Morris水迷宫测试;对照组12只,其中6只进行钙蛋白酶活性测定及凋亡检测,另6只进行Morris水迷宫测试。治疗组各亚组在致伤前1d经侧脑室注射MDL28170(10μL),创伤组、假手术组及对照组给予生理盐水(10μL)。结果:创伤组大鼠海马在伤后6h钙蛋白酶活性升高,于24h达到高峰,治疗组各时相点海马区钙蛋白酶活性均较创伤组明显下调(P<0.01);创伤组大鼠伤后6h海马CA2区即出现少量凋亡阳性细胞,伤后24h明显增多,于伤后72h达高峰;治疗组凋亡细胞密度高峰较创伤组明显下调(P<0.01);定位航行能力测试结果表明治疗组搜索安全岛潜伏期较治疗组明显缩短(P<0.01);空间探索能力测试结果表明治疗组于第四象限的航行时间较创伤组明显延长(P<0.05)。结论:脑创伤后钙蛋白酶活性增加可能参与了神经细胞凋亡与学习记忆功能障碍的过程。

脂肪来源的神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血后VEGF表达的影响

目的观察人脂肪组织来源的神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血后VEGF表达的影响,探讨其治疗局灶性脑缺血的可能机制。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)2h再灌注模型。60只健康雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组(6只),假手术组(6只),缺血对照组(24只)和移植治疗组(24只)。后两组又各分4组:缺血2h再灌注7、14、21、28d组(各6只)。体外培养脂肪基质细胞,诱导分化为神经干细胞。造模成功后24h,移植治疗组经尾静脉移植人脂肪组织来源的神经干细胞悬液(细胞密度为2×106/ml),缺血对照组经尾静脉注射生理盐水,假手术组不做任何处理。免疫组化法检测VEGF的表达,原位杂交法检测VEGF mRNA的表达。结果与缺血对照组比较,移植治疗组各时间点(7、14、21、28d)的VEGF染色阳性细胞数均增加(均P<0.01),VEGF mRNA含量均增加(均P<0.01)。结论脂肪组织来源的神经干细胞移植可促进内源性VEGF及VEGF mRNA的表达,提高大鼠局灶性脑缺血后损伤局部VEGF及VEGF mRNA的含量,对脑缺血再灌注损伤后的神经细胞起保护作用。

心理干预对三叉神经痛患者术后抑郁和焦虑症状的影响

目的探讨心理干预对三叉神经痛患者术后抑郁和焦虑症状的影响。方法选择在我院住院治疗的三叉神经痛患者,随机分为单纯手术组和心理干预组,接受不同干预措施后,于术后1周比较两组患者抑郁和焦虑发生情况,评价心理干预对三叉神经痛患者术后抑郁和焦虑症状的影响。结果两组间性别、年龄、病程、受教育程度、术前疼痛强度、术前抑郁者比例和焦虑者比例差别均无统计学意义。术后1周,心理干预组患者疼痛强度(1.2±0.7)低于单纯手术组患者(0.9±0.3),差别有统计学意义。单纯手术组患者中仍有抑郁症状6例(14.6%),心理干预组患者中未出现抑郁者(0%),差别有统计学意义;单纯手术组患者中仍有焦虑症状者10例(24.4%),心理干预组患者中仍有焦虑症状者2例(5.4%),差别有统计学意义。结论术前心理干预可显著改善三叉神经痛患者术后的抑郁和焦虑症状。

大鼠弥漫性轴索损伤后海马CA1区Apaf-1蛋白表达及其对神经元凋亡的作用

目的:探讨大鼠弥漫性脑损伤后海马CA1区Apaf-1蛋白表达及其对神经元凋亡的作用.方法:采用Marmarou打击法制作大鼠重型闭合性颅脑损伤模型,以免疫组化技术检测海马CA1区Apaf-1蛋白的表达.结果:大鼠弥漫性脑损伤后3h,海马CA1区Apaf-1蛋白表达含量开始增加,6h达到高峰,12h仍保持高水平,24h开始下降,但仍高于正常对照组.结论:Apaf-1蛋白可能参与了大鼠弥漫性脑损伤后海马CA1区的病理变化.

美洛宁对大鼠重型颅脑创伤后海马区神经细胞凋亡及记忆功能的影响

目的 :研究美洛宁对大鼠重型颅脑创伤后海马区神经细胞凋亡及学习记忆功能的影响。方法 :采用Marmarou的方法建立大鼠重型闭合性颅脑创伤模型 ,将成年Wistar大鼠288只随机分为脑创伤组、美洛宁治疗组、假手术组 ,每组又分别分为伤后3 ,6,12 ,24 ,48 ,72、168及336h等8个时相组 ,另取12只作为正常对照组。美洛宁治疗组经致伤后 ,给予腹腔注射美洛宁 (30mg·kg-1·d -1) ,直至各时相点处死 ;脑创伤组、假手术组及正常对照组在相同时间给予等量的生理盐水腹腔注射作为对照。各组均在相应的时间点处死取材进行原位细胞凋亡检测。另取48只大鼠随机分为脑创伤组、美洛宁治疗组、假手术组及正常对照组 ,进行水迷宫测试。结果 :美洛宁能够使海马区神经细胞凋亡的高峰明显下调 ,使水迷宫测试的潜伏期明显缩短。结论 :美洛宁能够有效的抑制大鼠重型颅脑创伤后海马区神经细胞凋亡 。

大鼠脑挫裂伤后神经细胞凋亡相关因素研究

目的 从脑挫裂伤发生后血清一氧化氮、内皮素改变与海马区神经细胞凋亡之间的相关性入手 ,研究创伤性脑损伤后继发性颅脑损伤的分子生物学机制。方法 按照改良Feeney自由落体脑损伤模型方式制作大鼠左顶叶脑挫裂伤模型 ,采用硝酸还原酶法、酶联免疫吸附法、原位细胞凋亡检测技术分别对脑挫裂伤后共十个时相点的各指标进行检测 ,所得数据均以SAS( 6.12 )统计软件包进行配对t检验及多元线性相关分析。结果 血清一氧化氮、内皮素及海马区神经细胞凋亡分别在脑挫裂伤后不同时相升高 ,随后下降 ,前两者彼此之间以及前两者与后者间均表现为正相关。结论 大鼠脑挫裂伤后血清一氧化氮、内皮素的变化之间以及此两者与神经细胞凋亡之间存在着特定关系 ,前两者相互影响。

整合素β1在脑神经胶质瘤的表达及其与Ki-67的关系

目的探讨整合素β1及Ki-67抗原在神经胶质瘤细胞增殖、侵袭中的作用,以便为临床判断神经胶质瘤的恶性程度、选择治疗措施及评价预后提供依据。方法采用免疫组化法检测5例正常脑组织及40例不同级别神经胶质瘤中整合素β1的表达情况,分析其病理指数(PI)及其与Ki-67表达的关系。结果正常脑组织中整合素β1及Ki-67抗原均不表达。在脑神经胶质瘤中整合素β1表达于瘤细胞的胞质、胞膜及肿瘤血管的内皮细胞,且主要表达于肿瘤侵袭边缘的瘤细胞及血管基底膜的内皮细胞,其表达是在细胞质、胞膜及肿瘤血管的内皮细胞出现棕色或棕黄色染色;在脑神经胶质瘤中Ki-67表达于瘤细胞的胞核,其表达是在胞核出现棕色或棕黄色染色。在Ⅰ、Ⅱ级神经胶质瘤标本23例中阳性3例、弱阳6例,阳性表达率为39.13%(9/23),PI值为6.52±7.42,在Ⅲ、Ⅳ级神经胶质瘤标本17例中强阳性3例、阳性7例、弱阳4例,阳性表达率为82.35%(14/17),PI值为26.41±25.12,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级间差异显著(P<0.05)。在神经胶质瘤中的Ki-67 LI范围为2%～30%,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级神经胶质瘤的Ki-67 LI分别为12.09%±8.10%及19.12%±8.89%,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级间差异显著(P<0.05)。经直线相关分析,整合素β1与Ki-67抗原的阳性细胞表达率呈正相关(P<0.05)。结论整合素β1及Ki-67抗原的表达在Ⅰ、Ⅱ级神经胶质瘤组明显低于Ⅲ、Ⅳ级,与神经胶质瘤增殖及侵袭性呈正相关,可作为判断神经胶质瘤病理分级的重要指标。

周围神经减压术治疗糖尿病性周围神经病的临床疗效观察

目的:探讨周围神经减压术治疗糖尿病性周围神经病的临床疗效。方法:应用腓总神经、腓深神经及胫后神经三处周围神经减压术治疗17例糖尿病性周围神经病患者,并回顾性分析其临床疗效。结果:患者术后疼痛缓解率为100%,麻木的缓解率为94.1%,神经传导速度明显改善。结论:周围神经减压术是治疗糖尿病性周围神经病的有效方法。

颅颈交界区显微外科解剖研究

目的探讨颅颈交界区各结构毗邻关系,为临床安全处理颅颈交界区病损提供显微解剖学依据。方法15例(30侧)国人成年带颈头颅湿性标本在手术显微镜下进行解剖观察和测量。结果枕下段椎动脉测量左右两侧直径有显著差异,以左侧大于右侧为主。上、下枕下三角是保护椎动脉第三段的重要标志。头外侧直肌是确认颈静脉孔后外侧缘的标志、二腹肌后腹是保护面神经的标志。枕髁后1/3～1/2的磨除可获得对枕骨大孔腹侧和腹外侧的满意显露。颈静脉结节的磨除对于增加枕骨大孔上方病变的显露非常重要。结论颅颈交界区结构毗邻关系复杂,掌握该区的显微解剖特点和解剖学标志,可增加该区手术的安全性。枕髁和颈静脉结节的磨除可增加手术视野。

神经节苷脂联合激素冲击治疗对原发性脑干损伤预后的影响

①目的 探讨神经节苷脂联合大剂量甲基强的松龙冲击治疗对原发性脑干损伤患者预后的影响。②方法 对 2 5例原发性脑干损伤患者采用早期神经节苷脂联合甲基强的松龙冲击治疗 ,分别于伤后 4～ 7天行颅内压监测 ,6个月行GCS、GOS、语言障碍程度及运动功能障碍程度评分 ,并与未进行激素治疗的对照组 2 5例患者进行比较。③结果 与对照组比较 ,采用神经节苷脂联合甲基强的松龙冲击治疗的患者的神经功能恢复速度较快、恢复程度较高。④结论 早期神经节苷脂联合甲基强的松龙冲击治疗原发性脑干损伤 ,对于抑制继发性损伤的发生、发展及改善患者的预后有积极的意义。

大鼠脑挫裂伤后神经细胞凋亡的相关因素(英文)

背景:脑海马区作为脑损伤后的选择性易损区,在伤后某些早期基因超表达、兴奋性氨基酸过度释放以及神经细胞延迟性死亡等方面对外源性刺激较为敏感。目的:探讨脑挫裂伤后血清一氧化氮、内皮素改变与脑海马区神经细胞凋亡之间的相关性。设计:观察对比动物实验,采用配对t检验及多元线性相关分析。单位:华北煤炭医学院附属开滦医院神经外科。材料:实验于2003-02/06在华北煤炭医学院分子生物学实验室完成。取二级健康雄性W istar大鼠126只,体质量250～350g,随机分成3组,即实验组60只、对照组60只和正常组6只,其中前两组又各自分成0.5,1,3,6,12,24,72,120,168,240h 10个时相组,每组6只大鼠。方法:实验组按照改良Feeney 自由落体脑损伤模型方式制作大鼠左顶叶脑挫裂伤模型;对照组动物只颅骨开窗,不致伤;正常组动物不做任何处理。各组大鼠脑挫裂伤后各时相点的血清一氧化氮、内皮素水平与脑海马区凋亡神经细胞数量检测采用硝酸还原酶法、酶联免疫吸附法及原位末端标记法。主要观察指标:脑挫裂伤大鼠血清一氧化氮、内皮素水平与脑海马区神经细胞凋亡情况。结果:126只大鼠全部进入结果分析。①实验组大鼠血清一氧化氮、内皮素与脑海马区c-fos m RNA 表达水平:均在脑挫裂伤后6h 达高峰犤(81.45±2.41)m m ol/L,(20.29±1.63)ng/L犦,伤后12h 开始逐渐回落犤(66.11±1.97)m m ol/L,(20.14±1.63)ng/L犦。大鼠脑挫裂伤后0.5h 至120h一氧化氮水平、0.5h 至168h 内皮素水平与正常组和对照组各相应时间点比较,均明显升高(t=3.33～27.91,P <0.01)。②实验组大鼠脑海马区神经细胞凋亡情况:于伤后168h 达到高峰(27.33±1.86)×102个/m m 2,伤后240h 开始下降(21.67±2.07)×102个/m m 2。正常组脑海马区神经细胞未见凋亡细胞,对照组脑海马区凋亡神经细胞数量极少。③实验组大鼠血清一氧化氮水平、内皮素水平与脑海马区神经细胞凋亡之间的关系:存在显著正相关性(r=0.838,P <0.01;r=0.281,P <0.05)。结论:大鼠脑挫裂伤后血清一氧化氮、内皮素水平之间以及与脑海马区神经细胞凋亡之间存在着特定关系。一氧化氮与内皮素相互影响、相互作用,参与调控了脑挫裂伤后的病生理过程,从而诱导了脑海马区神经细胞的凋亡。