BMP-2、XIAP在细胞丰富型和基质丰富型涎腺多形性腺瘤中的表达及意义

目的研究BMP-2、XIAP在细胞丰富型和基质丰富型涎腺多形性腺瘤中的表达及其与复发、恶变的相关性。方法收集2004年1月至2013年1月我院92例多形性腺瘤标本,经HE染色后分为细胞丰富型(A)、基质丰富型(B)、其他型(C)3组,运用免疫组化法检测BMP-2、XIAP在各组的表达并分析各组复发及恶变情况;TUNEL染色法检测各组组织细胞凋亡情况。结果疫组化结果:BMP-2表达在B、C、A组中依次递减,XIAP在A、B、C组中表达依次递减,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。复发病例中BMP-2显著高于未复发病例(P<0.05),恶变病例中XIAP显著高于未恶变病例(P<0.05)。TUNEL结果显示,A组中凋亡指数显著低于其他2组(P<0.05),而B、C 2组差异间无统计学意义。结论 1基质丰富型多形性腺瘤更容易复发,而细胞丰富型多形性腺瘤更容易恶变。2BMP-2的表达水平可能与多形性腺瘤的复发有关,而XIAP的表达水平与多形性腺瘤的恶变有关。

钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶ⅡδRNA干扰对下游基因表达及破骨细胞分化的影响

目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ(Ca2+/Calmodulin dependent kinaseⅡδ,Ca MKⅡδ)RNA干扰对下游基因表达及破骨细胞分化的影响,以证实其在破骨细胞分化中的作用。方法应用慢病毒构建Ca MKⅡδRNA干扰载体,并确定最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)值及转染效率。小鼠RAW264.7细胞分为对照组、空白载体组和干扰组。转染5 d后收获细胞,确定干扰效率;并检测RNA干扰对活化T细胞核因子蛋白c1(NFATc1)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、非受体酪氨酸激酶(c-Src)基因表达及破骨细胞分化的影响。结果成功构建了Ca MKⅡδRNA干扰载体,最佳转染MOI值为30,转染效率可达78%(P<0.05)。重组病毒对Ca MKⅡδ的干扰效率在mRNA水平超过78%,在蛋白水平超过70%(P<0.01)。Ca MKⅡδRNA干扰显著降低NFATc1、TRAP和c-Src基因,与对照组、空白载体组比较,其mRNA水平下降分别超过了47.8%、43.3%和48.5%(P<0.05,P<0.01),蛋白相对水平分别超过了61.1%、48.2%和39.6%%(P<0.01);免疫荧光细胞化学检测也得到相似结果。Ca MKⅡδRNA干扰也显著降低了破骨细胞生成及骨吸收功能;与其他两组比较,干扰组破骨细胞数、牙本质吸收陷窝数目和面积下降分别超过了49.8%、47.6%和61.3%(P<0.01)。结论 Ca MKⅡδRNA干扰可显著下调其下游NFATc1、TRAP、c-Src基因表达并抑制破骨细胞分化;Ca MKⅡδ在破骨细胞分化中可能发挥关键调控作用。

唑来膦酸对破骨细胞分化中钙调蛋白、钙调磷酸酶表达的影响

目的 :探讨唑来膦酸(zoledronate,ZOL)对破骨细胞分化中钙调蛋白(calmodulin)和钙调磷酸酶(calcineurin)基因表达的影响。方法:小鼠RAW264.7细胞分为A、B两组,均用100 ng/m L核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)诱导4 d;B组细胞在RANKL诱导第2天加入1×10-6mol/L ZOL处理48 h。RANKL诱导4 d后收获细胞,检测破骨细胞生成及calmodulin、calcineurin基因表达情况。结果 :B组多核破骨细胞数、吸收陷窝数目及面积分别为(8.8±2.3)个、(6.7±1.2)个和(997.1±14.8)μm^2,均显著低于A组的(19.7±2.9)个、(13.3±1.5)个和(1 676.9±24.9)μm^2(P<0.01)。B组calmodulin mRNA及蛋白水平较A组分别降低了51.0%和78.7%(P<0.05),calcineurin则分别下降了37.0%和69.5%(P<0.01)。免疫荧光细胞化学显示,B组calmodulin、calcineurin的荧光强度较A组也明显下降。结论:ZOL可显著抑制破骨细胞生成,并下调破骨细胞分化中calmodulin和calcineurin的m RNA和蛋白水平,而calmodulin、calcineurin可能参与了ZOL对破骨细胞形成和功能的抑制。

CaMKIIδ在破骨细胞分化不同阶段表达规律的研究

目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(Ca MKII)δ在破骨细胞分化不同阶段的表达规律,以揭示其在破骨细胞分化中的作用。方法:应用50μg/L核因子κB受体激活因子配体(RANKL)诱导小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化;通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色及骨磨片吸收陷窝检测评价破骨细胞生成情况;同时于诱导第0、1、3、5天末通过免疫荧光细胞化学、RT-q PCR和Western blot法检测Ca MKIIδ的mRNA及蛋白表达水平。结果:TRAP染色及骨吸收陷窝检测显示于诱导第5天有多核破骨细胞生成。第0、1、3、5天Ca MKIIδ的mRNA表达水平分别为1.028±0.041、2.478±0.087、10.524±1.284和42.914±2.667,蛋白相对水平分别为0.762、0.963、1.802和3.136,免疫荧光细胞化学检测显示Ca MKIIδ的荧光6强度呈时间依赖性递增。结论:Ca MKIIδ的表达随破骨细胞分化逐步增高,提示Ca MKIIδ在破骨细胞分化中可能起着关键调控作用。

掺锶透钙磷石骨水泥修复家兔牙槽骨缺损的研究

应用掺锶5%透钙磷石骨水泥修复家兔下颌牙槽骨缺损,观察骨保护素(OPG)在缺损区的表达情况,探讨掺锶透钙磷石骨水泥作为骨缺损修复材料的可行性。健康家兔18只,随机分为3组,在家兔双侧下颌牙槽骨制作骨缺损,空白对照组缺损处不植入任何材料,透钙磷石组植入透钙磷石骨水泥,掺锶5%透钙磷石组植入掺锶5%透钙磷石骨水泥。术后每组动物分别于4、8周各处死3只,通过大体观察、CBCT、免疫组化等方法观察骨缺损的修复情况。CBCT结果显示掺锶5%透钙磷石组骨缺损8周时已基本修复,透钙磷石组骨缺损部分修复,空白对照组未完成骨缺损修复。免疫组化结果显示4周时OPG表达最高,8周时减弱。4周和8周时3组组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。在兔下颌牙槽骨缺损修复中,掺锶5%透钙磷石成骨效果显著,能有效缩短术后的康复时间,可作修复骨缺损的材料。

沙利度胺对双膦酸盐相关颌骨坏死的影响

目的研究沙利度胺对双膦酸盐相关颌骨坏死的影响。方法 36只大鼠随机分成A、B、C组,分别接受生理盐水、唑来膦酸、唑来膦酸+沙利度胺治疗。用药3周后,拔除大鼠左上颌第1磨牙。拔牙后4、8周,收获标本,评价颌骨坏死、微血管生成及细胞凋亡情况。结果拔牙后4、8周,大鼠上颌骨拔牙创处均无死骨裸露,但B组、C组部分标本可见一些小的瘘管。组织学检查显示,A组标本未见死骨,而B组、C组在拔牙窝周围可见小块死骨。B组、C组拔牙窝周围区域空骨陷窝百分比和死骨面积显著多于A组(P<0.01),而骨陷窝密度则显著下降。B组、C组微血管密度较A组也显著降低,在4周时分别下降了和25.87%和55.27%(P<0.01),在8周时分别下降了45.62%和72.84%(P<0.01);凋亡细胞数则在4周时分别增长了54.80%和87.89%(P<0.01),在8周分别增长了208.08%和250.58%(P<0.01)。结论沙利度胺加重了唑来膦酸诱发的早期阶段的颌骨坏死;沙利度胺和唑来膦酸对颌骨坏死的作用与微血管生成抑制有关。

唑来膦酸对破骨细胞分化中钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ和Ⅳ基因表达的影响

目的:研究唑来膦酸(ZOL)对破骨细胞(OC)分化及信号分子钙调蛋白依赖性激酶(CaMK)Ⅱ、Ⅳ基因表达的影响,阐明其作用机制。方法:应用小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7向破骨细胞分化。细胞分为对照组和ZOL组,用核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)诱导5d,ZOL组同时加用ZOL处理2d,第5天收集细胞后检测OC生成及CaMKⅡ、CaMKⅣ基因表达情况。结果:ZOL组中多核OC数、骨吸收陷窝数和面积分别为33.0±1.0、46.0±3.5和(4 125.9±674.8)μm2,明显低于对照组的66.6±3.2、86.0±9.2和(9 418.3±1 260.8)μm2(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,ZOL组细胞中CaMKⅡ和CaMKⅣ基因表达水平明显降低(P<0.05),CaMKⅡmRNA和蛋白表达水平分别下降了39.3%和58.9%,CAMKⅣmRNA和蛋白表达水平分别下降了51.7%和46.8%(P<0.01)。免疫荧光化学,与对照组比较,ZOL组细胞中CaMKⅡ、Ⅳ蛋白荧光强度明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:ZOL在OC多核化阶段可以明显抑制OC的生成和骨吸收功能,并下调CaMKⅡ和CaMKⅣ基因表达。信号分子CaMKⅡ和CaMKⅣ可能参与了唑来膦酸对OC形成和功能的抑制作用,并在该过程中发挥重要的作用。

CREB和ERK1/2在CaMKⅡδ调控破骨细胞分化中的作用

目的探索c AMP反应原件结合蛋白(CREB)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(Ca MKⅡ)δ调控破骨细胞分化中的作用及分子机制。方法构建Ca MKⅡδR NA干扰载体并转染小鼠R AW264.7细胞,确定其干扰效率。病毒转染细胞后,用50ng/ml核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导,于不同时间点检测CREB、ERK1/2蛋白磷酸化水平。应用ERK1/2信号阻断剂PD98059处理细胞,检测ERK1/2信号阻断对活化T细胞核因子c1(NFATc1)基因表达及破骨细胞分化的影响。结果 Ca MKⅡδ干扰载体在m RNA和蛋白水平的干扰效率分别为77.2%和70.2%。Ca MKⅡδ干扰可明显降低CREB、ERK1/2蛋白磷酸化水平,下调幅度分别为21%~55%和55%~64%。此外,ERK1/2信号阻断明显下调了NFATc1蛋白表达,使破骨细胞数目、骨吸收陷窝数目及面积分别下降了39.3%、50.0%和52.3%。结论 Ca MKⅡδRNA干扰可明显抑制CREB和ERK1/2蛋白磷酸化;CREB和ERK1/2参与了Ca MKⅡδ对破骨细胞分化的调控。

钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ RNA干扰载体构建及对破骨细胞分化和骨吸收的影响

目的研究钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)RNA干扰对破骨细胞分化和骨吸收的影响。方法构建3个CaMKⅡγ RNA慢病毒重组干扰载体;阴性载体转染RAW264.7细胞,确定最适转染滴度值(MOI)和转染效率。用重组载体转染细胞,确定干扰效果最佳的重组载体用于后续实验。细胞分为对照组、阴性载体组、干扰载体组;病毒转染5 d后通过TRAP染色及牙本质磨片骨吸收陷窝检测3组破骨细胞生成及骨吸收情况。结果成功构建了3个CaMKⅡγ重组干扰载体;最适MOI值为30,转染效率>80%。#3重组载体干扰效果最佳,干扰效率在mRNA及蛋白水平分别为78.16%和67.02%(P <0.01)。3组细胞中,干扰载体组多核破骨细胞数、牙本质吸收陷窝数和面积较对照组分别下降了59.99%、54.19%和57.94%(P <0.01),而阴性载体组和对照组比较差异无显著性(P> 0.05)。结论 CaMKⅡγ RNA干扰可显著抑制破骨细胞生成和骨吸收功能。

烧结法制备掺镁透钙磷石骨水泥

背景:透钙磷石作为可吸收的磷酸钙骨水泥和骨替代植入材料,在性质特征上存在一些不足,学者们尝试对透钙磷石进行改性,以期能增强其机械性能,延长固化时间,提高成骨作用。目的:制备掺镁透钙磷石骨水泥,通过理化性能、生物活性和修复骨缺损能力检测掺镁透钙磷石骨水泥作为骨替代材料的可行性。方法:采用烧结法将镁离子引入β-磷酸三钙,设置Mg/(Mg+Ca)摩尔百分比分别为0%、6.67%、26.67%,制备掺镁透钙磷石骨水泥,采用扫描电子显微镜观察骨水泥的形态,万能材料实验机检测骨水泥的抗压强度。将0%、6.67%、26.67%掺镁透钙磷石骨水泥浸提液分别加入兔抗凝血中,检测溶血率。制备24只家兔双侧桡骨骨缺损模型,分4组干预,其中3组骨缺损处分别植入0%、6.67%、26.67%掺镁透钙磷石骨水泥,空白组不做任何处理,植入后4,8周进行X射线检查。结果与结论:(1)扫描电镜显示,0%掺镁透钙磷石骨水泥为堆积紧密的板片状和少量颗粒状,孔隙较少;6.67%掺镁透钙磷石骨水泥呈不规则团块状和短棒状;26.67%掺镁透钙磷石骨水泥为团块状、圆球状和颗粒状等结构;(2)0%、6.67%、26.67%掺镁透钙磷石骨水泥的抗压强度分别为31.99,26.38,24.44 MPa;(3)所有透钙磷石骨水泥的溶血率均小于5%;(4)X射线显示,植入4周时,空白组缺损区边缘规则,无新骨形成;掺镁0%组骨水泥周围溶解,与骨缺损交界处有少量高密度影像;掺镁6.67%组骨水泥大部分溶解,大量新骨形成;26.67%掺镁组骨水泥周围溶解,中央呈高密度团块,新生骨量较少。植入8周时,空白组两断端处有新骨沉积影像;未掺镁组新生骨呈楔形堆积;掺镁6.67%组骨缺损处基本充满新骨,骨皮质连续;掺镁26.67%组新骨呈桥接式链接骨缺损断端,塑性差;(5)结果表明掺镁6.67%透钙磷石骨水泥具有良好的机械性能与成骨效果。

阿仑膦酸钠、辛伐他汀在糖尿病大鼠下颌骨骨折愈合过程中的作用

目的:通过观察骨保护素(OPG)表达情况,探讨阿仑膦酸钠及辛伐他汀对1型糖尿病大鼠下颌骨骨折愈合过程作用差异。方法:选择120只雄性Wistar大鼠随机均分为5组:对照组、糖尿病组、胰岛素治疗组、胰岛素+阿仑膦酸钠治疗组、胰岛素+辛伐他汀治疗组。除对照组外,其余4组成功建立糖尿病模型,5组大鼠手术建立单侧下颌骨骨折模型,术后第2天开始药物干预。于骨折后第2、4、6、8周检测血清OPG含量。结果:应用阿仑膦酸钠、辛伐他汀组愈合情况均明显较糖尿病组好,骨折后OPG表达水平也均明显高于糖尿病组(P<0.01)。结论:阿仑膦酸钠及辛伐他汀均可通过调节OPG含量促进糖尿病骨折愈合,辛伐他汀的作用效果更显著。

掺锶透钙磷石骨水泥修复骨质疏松家兔牙槽骨缺损的实验研究

目的探究掺锶5%透钙磷石骨水泥对骨质疏松家兔牙槽骨缺损是否具有修复作用。方法选取18只健康家兔,建立骨质疏松模型,将其随机分为3组,分别为空白对照组、透钙磷石组、掺锶5%透钙磷石组,每组各6只。在其双侧牙槽骨制作骨缺损,除空白组外,其余各组分别填充相对应的骨水泥。于术后4、8周各组各处死3只,拍摄缺损区X线片,免疫组化观察缺损区b-FGF的表达。结果X线片结果显示8周时5%透钙磷石组已基本完成修复,透钙磷石组部分完成修复,空白组未完全修复。免疫组化结果显示4周时各组b-FGF表达最高,8周时降低,4周与8周时,3组组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 5%掺锶透钙磷石骨水泥能够修复骨质疏松家兔的骨缺损。

多发性髓石1例报告及文献复习

髓石是牙髓变性的一种,多见于髓腔内,一般发生于患有牙体疾病的牙,且随年龄增长,发生几率增加。通常在拍摄X线片时被发现,X线表现为髓腔内圆形或卵圆形高密度影。本文报道发生于青年患者健康牙中无症状多发性髓石1例,并对其发生的可能原因进行分析。

CaMKⅡδ基因沉默对破骨细胞分化功能及c-fos/c-jun/CREB基因的影响

目的探索编码钙调蛋白依赖性激酶(CaMK)Ⅱδ的基因沉默对破骨细胞分化功能的影响以及c-fos、c-jun、CREB基因在CaMKⅡδ调控破骨细胞分化中的作用,以揭示破骨细胞分化调控的分子机制。方法构建CaMKⅡδ RNA干扰载体,转染至小鼠RAW264.7细胞,确定干扰效率。病毒转染细胞后,用50 ng·mL^-1核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导,5 d后收获,通过耐酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)检测、牛骨吸收陷窝检测沉默CaMKⅡδ基因对破骨细胞分化、骨吸收功能的影响;48 h后收获,利用实时聚合酶链式反应(PCR)、Westernblot等方法检测c-fos、c-jun、CREB的表达情况。结果 CaMKⅡδ RNA干扰在mRNA和蛋白质水平的干扰效率分别为70.6%和72.2%。 CaMKⅡδ RNA干扰可显著降低 c-fos、c-jun和CREB的mRNA水平,下调幅度分别为74%、49%和24%,CaMKⅡδ RNA干扰可显著降低c-Fos、c-Jun和CREB的水平,下调幅度分别为74.3%、61.3%和59.2%。结论 CaMKⅡδ RNA干扰可在mRNA和蛋白质水平显著抑制c-fos、c-jun、CREB的表达,其共同参与CaMKⅡδ对破骨细胞分化的调控。

氟化钠对掺锶透钙磷石骨水泥成骨活性的影响

探究掺入不同质量氟化钠至锶透钙磷石骨水泥对理化性能及成骨活性的影响。以二水合磷酸氢钙与碳酸钙为原料制备β-磷酸三钙,以氯化锶为原料制备掺锶透钙磷石骨水泥,考察将氟化钠按不同质量比(0.5wt%、1.0wt%、1.5wt%)制备的掺氟锶透钙磷石骨水泥微观形貌、元素含量、物相形式及抗压强度,MTT法检测细胞增殖,并对其碱性磷酸酶(ALP)和骨保护素OPG mRNA表达进行检测。掺氟锶透钙磷石骨水泥抗压强度低于单一掺锶透钙磷石骨水泥(P>0.05),当氟化钠质量比为1.5wt%时促进MC3T3-E1的增殖及ALP效果最好,1.0wt%时显著促进OPG蛋白表达。

CaMKⅡγ在破骨细胞分化中的表达规律

目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶γ(CaMKⅡγ)在破骨细胞分化中的表达规律,以揭示其作用。方法:用50 ng/m L核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化,于诱导后第0,1,3,5天收获细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色评价破骨细胞生成情况,并用RT-PCR、Western印迹、免疫荧光细胞化学法检测CaMKⅡγm RNA和蛋白表达。结果:多核破骨细胞在诱导后第3天开始出现,第5天达到最多。分化第0,1,3,5天,CaMKⅡγm RNA相对表达水平分别为(1.067±0.179),(1.840±0.070),(9.493±0.453)和(30.767±0.573);蛋白相对表达水平分别为(0.454±0.065),(0.613±0.021),(0.858±0.019)和(0.980±0.023);除第1天的蛋白相对水平外,其他时间点CaMKⅡγm RNA和蛋白表达差异均有统计学意义,且呈时间依赖性增强(P<0.01)。免疫荧光细胞化学法检测也显示CaMKⅡγ蛋白表达在破骨细胞分化过程中逐步增加。结论:CaMKⅡγ表达随破骨细胞分化呈时间依赖性增加,提示其在破骨细胞分化中可能发挥关键调控作用。

NFATc1过表达对唑来膦酸诱发的破骨细胞生成抑制的影响

目的研究活化T细胞核因子蛋白c1(NFATc1)过表达对唑来膦酸诱发的破骨细胞生成抑制的挽救效应。方法小鼠NFATc1重组慢病毒转染RAW264.7细胞,验证NFATc1蛋白表达。细胞分为A、B两组,分别转染空白载体和NFATc1重组载体。两组细胞均用50 ng/mL核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)诱导5 d,并在第2天加入1×10^(-6)mmol/mL唑来膦酸作用2 d。第6天收获细胞,检测破骨细胞的生成和功能及NFATc1、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、酪氨酸激酶(c-Src)基因的表达情况。结果 NFATc1蛋白在细胞中均有表达。B组TRAP阳性破骨细胞数、牙本质吸收陷窝数目和面积显著高于A组(P<0.01)。B组NFATc1、TRAP、c-Src的蛋白水平显著高于A组(P<0.01);B组3个基因mRNA水平显著高于A组(P<0.01)。免疫荧光细胞化学检测也得到相似的结果。结论 NFATc1过表达对唑来膦酸诱发的破骨细胞生成及NFATc1、TRAP、c-Src基因表达的抑制具有挽救效应;NFATc1作为Ca^(2+)信号的关键分子,在唑来膦酸诱发的破骨细胞生成抑制中起着关键作用。

CaMKⅡδ慢病毒过表达载体构建及其对破骨细胞分化的影响

目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱδ(CaMKⅡδ)过表达对破骨细胞分化的影响。方法筛选破骨细胞分化中CaMKⅡδ高表达转录本,构建过表达载体。RAW264.7细胞分成对照组、空载体组和过表达组,检测CaMKⅡδ表达情况;并在分化诱导5 d后检测破骨细胞生成及骨吸收情况。结果 CaMKⅡδ转录本2和3在破骨细胞分化中高表达;用转录本2构建了过表达载体,建立了稳定转染株。过表达组CaMKⅡδ mRNA水平较对照组、空载体组分别上升107.8%和85.7%(P<0.05),蛋白水平分别上升37.2%和37.1%(P<0.05),证实重组CaMKⅡδ在细胞中得到有效表达。CaMKⅡδ过表达组破骨细胞数目、牙本质吸收陷窝数和面积与对照组和空载体组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CaMKⅡδ过表达对破骨细胞分化和骨吸收无明显影响。

不同正畸力值对长期饮用碳酸饮料大鼠正畸牙移动牙根吸收影响

目的:研究不同的正畸力值对长期饮用碳酸饮料大鼠牙根吸收的影响。方法:选择1月龄雌性SD大鼠20只,每只每天喂养可乐50 m L,3个月后将20只大鼠按施加力值分为4组,分别为0 g(A组)、30 g(B组)、50 g(C组)和80 g(D组),加正畸装置于上颌第一磨牙。并于喂可乐0 d、3个月、加力21 d 3个时间点测大鼠骨密度(BMD),术后21 d处死取大鼠上颌第一磨牙及附近牙槽骨组织块,进行锥形束CT检测和HE染色观察牙根吸收情况,组织切片计算牙根吸收指数,TRAP染色观察破骨细胞数量。结果:随着喂养可乐时间增加,各组BMD随之降低,差异有统计学意义(P<0.05),但同一时间点各组BMD差异无统计学意义(P>0.05);锥形束结果显示牙根吸收指数和破骨细胞计数均为D组>C组>B组(P<0.05~P<0.01),B组与A组差异无统计学意义(P>0.05)。B组正畸牙移动过程中骨改建较C、D组活跃。结论:在30 g的力值作用下对长期饮用碳酸饮料大鼠正畸牙移动牙根吸收的影响最小,而随着力值的增加大鼠牙根吸收程度也随之加重。

CaMKⅡγ基因沉默对破骨细胞分化中NFATc1、TRAP、c-Src基因表达的影响

目的研究钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(Calmodulin-dependent kinase Ⅱ,CaMKⅡ)γ基因沉默对破骨细胞分化过程中活化T-细胞核因子c1(Nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1,NFATc1)、非受体酪氨酸激酶(Cell-sarcoma receptor coactivator,c-Src)、抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)基因表达的影响,探讨CaMKⅡγ在破骨细胞分化中的作用和分子机制。方法用慢病毒构建CaMKⅡγRNA干扰载体,转染RAW264.7细胞,实验分为A、B、C三组,分别为对照组、阴性载体组和干扰载体组;三组细胞转染12 h后,用50 ng RANKL诱导向破骨细胞分化;诱导5 d后收获细胞,采用实时荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光化学检测三组细胞中NFATc1、TRAP、c-Src基因表达情况。结果 C组中NFATc1、TRAP、c-Src mRNA水平较A组分别下降了49.86%、43.65%和53.57%(P<0.001),蛋白水平分别下降了54.22%、46.75%和45.86%(P<0.001);而B组与A组比较无统计学差异(P>0.05)。免疫荧光化学检测C组上述基因荧光强度明显弱于A、B组,且破骨细胞生成明显少于A、B组。结论 CaMKⅡγRNA干扰显著抑制了NFATc1、TRAP、c-Src基因表达,提示CaMKⅡγ在破骨细胞分化中起着关键调控作用。