目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白中的作用,及新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)对该作用的影响。方法体外培养肺成纤维细胞随机分为4组:对照组(0.4%血清)...目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白中的作用,及新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)对该作用的影响。方法体外培养肺成纤维细胞随机分为4组:对照组(0.4%血清)、TGF-β1组(5μg/L)、阴性转染组(TGF-β1+阴性对照si RNA)和Prx-1 si RNA转染组(TGF-β1+Prx-1 si RNA)。采用脂质体转染法转染si RNA,实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后Prx-1 m RNA表达;Western blot检测Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ERK1/2及Prx-1表达;2,7-二氯荧光素二乙酸(DCFH-DA)检测活性氧(ROS)水平。结果 Prx-1 si RNA转染肺成纤维细胞后,Prx-1 m RNA表达明显降低,最大抑制率为92%。与对照组比较,TGF-β1组的Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ROS、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)及Prx-1蛋白的表达水平均明显提高。与TGF-β1组比较,阴性转染组中的上述观察指标无明显变化,但Prx-1转染组的Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ROS、p-ERK1/2水平进一步提高,而Prx-1蛋白的表达被抑制。结论 TGF-β1能够诱导肺成纤维细胞生成ROS,并促进ERK1/2通路的激活,导致Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成增加,而Prx-1 si RNA可通过提高ROS水平进一步促进TGF-β1该作用。展开更多
目的检测C57BL/6小鼠无创性肺功能指标,为小鼠实验性研究肺功能的监测提供依据。方法采用整体体积描记法(whole body plethysmography,WBP)检测460只C57BL/6小鼠肺功能的各项指标,对检测结果进行统计分析,百分位数法确定参考值范围。结...目的检测C57BL/6小鼠无创性肺功能指标,为小鼠实验性研究肺功能的监测提供依据。方法采用整体体积描记法(whole body plethysmography,WBP)检测460只C57BL/6小鼠肺功能的各项指标,对检测结果进行统计分析,百分位数法确定参考值范围。结果小鼠吸气时间(Ti)64.7(55.30~82.60)ms,呼气时间(Te)83.4(71.70~109.20)ms,呼气峰值时间比率(Rpef)0.21(0.16~0.28),吸气末端暂停(EIP)2.19(1.96~3.76)ms,呼气末暂停(EEP)1.67(0.12~9.15)ms,潮气量(TVb)0.44(0.25~0.58)mL,气道狭窄指数(Penh)1.29(0.91~2.00),呼吸暂停(PAU)1.18(1.00~1.64),呼气中期流速(EF50)0.64(0.30~0.98)mL/s,松弛时间(Tr)39.0(32.40~51.50)ms,最大吸气流速(PIF)9.74(5.33~12.83)mL/s,最大呼气流速(PEF)9.86(5.12~13.47)mL/s,呼吸频率(f)412(331~474)BPM,每分钟通气量(MVb)174.4(86.69~235.04)mL。结论 C57BL/6小鼠无创肺功能指标参考值范围的测定,可为呼吸系统疾病的基础研究提供实验性参考依据。展开更多
文摘目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白中的作用,及新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)对该作用的影响。方法体外培养肺成纤维细胞随机分为4组:对照组(0.4%血清)、TGF-β1组(5μg/L)、阴性转染组(TGF-β1+阴性对照si RNA)和Prx-1 si RNA转染组(TGF-β1+Prx-1 si RNA)。采用脂质体转染法转染si RNA,实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后Prx-1 m RNA表达;Western blot检测Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ERK1/2及Prx-1表达;2,7-二氯荧光素二乙酸(DCFH-DA)检测活性氧(ROS)水平。结果 Prx-1 si RNA转染肺成纤维细胞后,Prx-1 m RNA表达明显降低,最大抑制率为92%。与对照组比较,TGF-β1组的Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ROS、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)及Prx-1蛋白的表达水平均明显提高。与TGF-β1组比较,阴性转染组中的上述观察指标无明显变化,但Prx-1转染组的Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ROS、p-ERK1/2水平进一步提高,而Prx-1蛋白的表达被抑制。结论 TGF-β1能够诱导肺成纤维细胞生成ROS,并促进ERK1/2通路的激活,导致Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成增加,而Prx-1 si RNA可通过提高ROS水平进一步促进TGF-β1该作用。
文摘目的检测C57BL/6小鼠无创性肺功能指标,为小鼠实验性研究肺功能的监测提供依据。方法采用整体体积描记法(whole body plethysmography,WBP)检测460只C57BL/6小鼠肺功能的各项指标,对检测结果进行统计分析,百分位数法确定参考值范围。结果小鼠吸气时间(Ti)64.7(55.30~82.60)ms,呼气时间(Te)83.4(71.70~109.20)ms,呼气峰值时间比率(Rpef)0.21(0.16~0.28),吸气末端暂停(EIP)2.19(1.96~3.76)ms,呼气末暂停(EEP)1.67(0.12~9.15)ms,潮气量(TVb)0.44(0.25~0.58)mL,气道狭窄指数(Penh)1.29(0.91~2.00),呼吸暂停(PAU)1.18(1.00~1.64),呼气中期流速(EF50)0.64(0.30~0.98)mL/s,松弛时间(Tr)39.0(32.40~51.50)ms,最大吸气流速(PIF)9.74(5.33~12.83)mL/s,最大呼气流速(PEF)9.86(5.12~13.47)mL/s,呼吸频率(f)412(331~474)BPM,每分钟通气量(MVb)174.4(86.69~235.04)mL。结论 C57BL/6小鼠无创肺功能指标参考值范围的测定,可为呼吸系统疾病的基础研究提供实验性参考依据。