长链非编码RNA DRAIC靶向let-7i-5p调控肺腺癌细胞的增殖凋亡和迁移侵袭

目的探讨长链非编码RNA DRAIC对肺腺癌细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响及其作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测2019—2020年于唐山市人民医院行手术治疗的40例肺腺癌患者的肺癌组织及相应癌旁正常组织中DRAIC的表达。体外培养肺腺癌细胞A549和H1299,分为si-NC组、si-DRAIC组、miR-NC组、let-7i-5p mimics组、si-DRAIC+inhibitor-NC组和si-DRAIC+let-7i-5p inhibitor组,细胞计数试剂盒8实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测细胞中Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2和Bax蛋白的表达。核质分离检测DRAIC和let-7i-5p亚细胞定位。双荧光素酶报告基因实验验证DRAIC与let-7i-5p的调控关系。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,相关分析采用Pearson相关分析。结果肺腺癌组织中DRAIC的表达水平高于癌旁正常组织,let-7i-5p的表达水平低于癌旁正常组织(均P<0.05)。肺腺癌组织中DRAIC和let-7i-5p的表达呈负相关(r=-0.737,P<0.05)。si-DRAIC组A549和H1299细胞的48、72和96 h吸光度值均低于si-NC组(均P<0.05),si-DRAIC组A549和H1299细胞克隆数分别为(91.00±6.08)个和(50.67±1.53)个,细胞迁移数分别为(606.67±31.34)个和(483.33±45.96)个,细胞侵袭数分别为(185.00±8.19)个和(365.00±33.87)个,均低于si-NC组[分别为(136.67±6.51)个和(76.67±4.51)个,(960.00±33.06)个和(741.67±29.67)个,(447.33±22.05)个和(688.00±32.97)个,均P<0.05]。si-DRAIC组A549和H1299细胞凋亡率分别为(13.43±2.79)%和(23.77±1.04)%,均高于si-NC组[分别为(4.53±0.42)%和(6.60±1.42)%,均P<0.05],si-DRAIC组细胞中Caspase-3、Caspase-9和Bax蛋白表达水平高于si-NC组,Bcl-2蛋白表达低于si-NC组(均P<0.05)。DRAIC和let-7i-5p主要位于细胞质,DRAIC靶向负调控let-7i-5p。let-7i-5p mimics组A549和H1299细胞48、72和96 h吸光度值均低于miR-NC组(均P<0.05),let-7i-5p mimics组A549和H1299细胞克隆数分别为(131.33±14.47)个和(59.33±4.93)个,细胞迁移数分别为(137.67±3.06)个和(425.00±11.14)个,细胞侵袭数分别为(54.00±4.36)个和(80.00±4.58)个,均低于miR-NC组[分别为(171.33±6.11)个和(80.33±7.09)个,(579.33±82.03)个和(669.33±21.13)个,(112.67±11.59)个和(333.33±16.80)个,均P<0.05]。let-7i-5p mimics组A549和H1299细胞凋亡率分别为(14.57±1.10)%和(23.97±0.42)%,均高于miR-NC组[分别为(6.97±1.11)%和(7.07±1.21)%,均P<0.05],let-7i-5p mimics组细胞中Caspase-3、Caspase-9和Bax蛋白表达高于miR-NC组,Bcl-2蛋白表达低于miR-NC组(均P<0.05)。si-DRAIC+let-7i-5p inhibitor组A549和H1299细胞48、72和96h吸光度值均高于si-DRAIC+inhibitor-NC组(均P<0.05),si-DRAIC+let-7i-5p inhibitor组A549和H1299细胞克隆数分别为(82.00±5.29)个和(77.67±4.93)个,细胞迁移数分别为(774.33±35.81)个和(569.67±18.72)个,细胞侵袭数分别为(670.33±17.21)个和(263.67±3.06)个,均高于si-DRAIC+inhibitor-NC组[分别为(59.00±5.57)个和(41.33±7.57)个,(455.67±19.04)个和(433.67±16.77)个,(451.00±17.52)个和(182.33±11.93)个,均P<0.05]。si-DRAIC+let-7i-5p inhibitor组细胞凋亡率分别为(7.73±0.45)%和(8.00±0.53)%,均低于si-DRAIC+inhibitor-NC组[分别为(19.13±1.50)%和(28.40±0.53)%,均P<0.05],si-DRAIC+let-7i-5p inhibitor组细胞中Caspase-3、Caspase-9和Bax蛋白表达低于si-DRAIC+inhibitor-NC组,Bcl-2蛋白表达高于si-DRAIC+inhibitor-NC组(均P<0.05)。结论DRAIC在肺腺癌中高表达,DRAIC通过靶向let-7i-5p促进肺腺癌细胞的增殖和迁移侵袭能力,抑制细胞凋亡。