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拟南芥开花抑制基因TFL1多克隆抗体的纯化与特异性检测
1
作者
袁敏
张越
+3 位作者
王莉
葛伟娜
张岚
邢继红
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期18-23,共6页
为了获得敏感性和特异性高的TFL1多克隆抗体,本研究构建了GST-TFL1和His-TFL1原核表达载体并转入大肠杆菌表达菌株BL21中。经IPTG诱导和蛋白纯化,成功获得了分子量约为46kD的GST-TFL1和22kD的His-TFL1融合蛋白。利用纯化的融合蛋白His-T...
为了获得敏感性和特异性高的TFL1多克隆抗体,本研究构建了GST-TFL1和His-TFL1原核表达载体并转入大肠杆菌表达菌株BL21中。经IPTG诱导和蛋白纯化,成功获得了分子量约为46kD的GST-TFL1和22kD的His-TFL1融合蛋白。利用纯化的融合蛋白His-TFL1作为抗原免疫,获得了TFL1的多克隆抗体血清。抗体血清经偶联了GST-TFL1融合蛋白的纯化基质进行免疫亲和纯化获得了纯化的TFL1多克隆抗体。免疫印迹检测抗体敏感性和特异性发现,纯化后的抗体不仅能特异地识别细菌内纯化的GST-TFL1和His-TFL1融合蛋白,也能与拟南芥中TFL1蛋白发生特异性反应。该研究结果为深入研究TFL1抑制植物开花的分子机制提供了有力的工具。
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关键词
TFL1
多克隆抗体
亲和纯化
特异性
敏感性
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职称材料
题名
拟南芥开花抑制基因TFL1多克隆抗体的纯化与特异性检测
1
作者
袁敏
张越
王莉
葛伟娜
张岚
邢继红
机构
华北理工大学生命科学学院/基因组学和计算生物学研究中心
南京农业
大学
植物保护
学院
河北农业
大学
真菌毒素与植物分子病
理
学
实验室
出处
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期18-23,共6页
基金
国家自然科学基金(31401212)
河北省自然科学基金(C2014209134)
文摘
为了获得敏感性和特异性高的TFL1多克隆抗体,本研究构建了GST-TFL1和His-TFL1原核表达载体并转入大肠杆菌表达菌株BL21中。经IPTG诱导和蛋白纯化,成功获得了分子量约为46kD的GST-TFL1和22kD的His-TFL1融合蛋白。利用纯化的融合蛋白His-TFL1作为抗原免疫,获得了TFL1的多克隆抗体血清。抗体血清经偶联了GST-TFL1融合蛋白的纯化基质进行免疫亲和纯化获得了纯化的TFL1多克隆抗体。免疫印迹检测抗体敏感性和特异性发现,纯化后的抗体不仅能特异地识别细菌内纯化的GST-TFL1和His-TFL1融合蛋白,也能与拟南芥中TFL1蛋白发生特异性反应。该研究结果为深入研究TFL1抑制植物开花的分子机制提供了有力的工具。
关键词
TFL1
多克隆抗体
亲和纯化
特异性
敏感性
Keywords
TFL1
polyclonal antibody
affinity purification
specificity
sensitivity
分类号
Q71 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
拟南芥开花抑制基因TFL1多克隆抗体的纯化与特异性检测
袁敏
张越
王莉
葛伟娜
张岚
邢继红
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
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