神经电生理监测技术在脊髓髓内肿瘤切除术中的应用

目的探讨神经电生理技术联合监测对预防脊髓髓内肿瘤切除术中脊髓神经功能损伤的意义。方法回顾性分析26例脊髓髓内肿瘤的病例资料,均行手术切除治疗,术中应用体感诱发电位(SEP-P40)和运动诱发电位(MEP-ABP)监测。结果术后2周随访脊髓神经功能JOA评分改善10例,不变13例,下降3例。JOA评分改善者,手术前后SEP-P40潜伏期、波幅改变及MEP-ABP潜伏期改变均具有统计学意义(P<0.01)。JOA评分不变者,手术前后SEP-P40潜伏期、波幅改变及MEP-ABP潜伏期改变均无统计学意义(P>0.05)。结论脊髓髓内肿瘤切除术中使用神经电生理联合监测能及时反映神经功能变化,术中电生理指标变化与病人术后神经功能改变一致。联合监测可提高术中操作的安全性,能避免或减少并发症。

多模式神经电生理监测在脊柱手术的应用

目的综合分析多模式神经电生理监测在脊柱手术的应用。方法回顾性分析107例脊柱手术病例资料,病人在脊柱手术过程中,均接受多模式(肌电图、体感诱发电位、运动诱发电位)神经电生理监测。结果在107例脊柱手术病人中,监测结果异常率为30.84%(33/107),监测结果正常74例(69.16%,74/107)。手术前后视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在脊柱手术中,应用多模式神经电生理监测,能够降低病人脊髓损伤的风险,可使病人获得较好预后。

高血压脑出血病人神经内镜血肿清除术后预后不良发生率及相关因素分析

目的:观察神经内镜血肿清除术治疗高血压脑出血(hypertensive intracerebral hemorrhage,HICH)病人的预后不良发生率及相关危险因素。方法:回顾性分析接受神经内镜手术治疗的152例HICH病人临床资料,均获得超过12个月随访。根据术后1年Barthel指数(BI)将病人分为预后良好组(BI>60分)98例和预后不良组(BI≤60分)54例。比较2组病人年龄、性别、格拉斯哥昏迷评分(GCS)、是否发生中线偏移、术前出血量、出血部位、手术时机、手术时间、脑脊液循环通畅时间、术后颅内压、血肿清除率、术前合并症进,并采用logistic回归分析探讨神经内镜术后预后不佳的危险因素。结果:单因素分析显示,预后良好组术前出血量、发生中线偏移率、手术时机在晚期比例和脑脊液循环通畅时间均少于预后不良组(P<0.05~P<0.01),GCS评分和血肿清除率均高于预后不良组(P<0.05和P<0.01)。Logistic回归分析结果显示,术前出血量多(OR=1.638)、GCS评分低(OR=0.612)、手术时机晚(OR=2.750)和发生中线偏移(OR=3.677)均为HICH病人神经内镜术后预后不良的独立危险因素(P<0.05~P<0.01)。结论:HICH病人神经内镜术前可通过缩短病人等待时间和减少出血量来提高预后效果。

丰富环境联合褪黑素对SAMP8小鼠学习记忆功能及脑神经细胞凋亡的影响

背景:脑老化后神经细胞凋亡增多,其机制不明确。近年研究表明,褪黑素可调节多种凋亡因子的表达,丰富环境作为一种治疗阿尔茨海默病的有效方案已投入临床使用,然而二者合用是否有更好的疗效及其各自的作用机制目前尚不清楚。目的:探讨丰富环境与褪黑素联合干预对SAMP8小鼠学习记忆功能及脑神经细胞凋亡的影响。方法:选用3月龄雄性SAMP8小鼠24只,利用随机数字表法分成4组:对照组、丰富环境组、褪黑素组和联合处理组,每组6只。对照组和褪黑素组小鼠饲养于标准环境,丰富环境组和联合组饲养于丰富环境,直至小鼠满4月龄;满4月龄次日,褪黑素组、联合处理组小鼠开始皮下注射褪黑素8 mg/(kg·d),对照组、丰富环境组皮下注射等量生理盐水,共30 d。给药结束后继续饲养于原环境至11月龄,采用筑巢实验和Morris水迷宫实验评估小鼠学习记忆能力;行为学实验结束后,采用NeuN免疫荧光/TUNEL双标染色及尼氏染色观察海马CA1区细胞凋亡情况,采用Western blot法检测海马中凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2、P53的表达。结果与结论:①与对照组相比,其他3组小鼠的筑巢实验得分、Morris水迷宫跨平台次数、海马CA1区NeuN免疫反应性、尼氏染色阳性细胞数量、海马中Bcl-2蛋白表达显著增加(P<0.05),联合处理组上述指标值显著多于丰富环境组、褪黑素组(P<0.05);②苏木精-伊红染色显示,与对照组相比,其他3组小鼠海马CA1区神经细胞形态和排列较佳;③与对照组相比,其他3组小鼠的Morris水迷宫逃避潜伏期、海马CA1区免疫荧光/TUNEL双阳性细胞数量及Caspase-3、Bax、P53蛋白表达水平显著降低(P<0.05),联合处理组上述指标值显著低于丰富环境组、褪黑素组(P<0.05);④结果表明,丰富环境和褪黑素对SAMP8小鼠的学习记忆功能、脑神经细胞凋亡具有改善作用,其机制可能与调控小鼠海马神经细胞P53/P21通路来减少细胞凋亡有关;且将丰富环境和褪黑素联合应用的疗效很可能高于单方案治疗。

BMSCs移植通过激活AMPK/mTOR信号通路介导的自噬抑制大鼠蛛网膜下腔出血后神经元凋亡

目的:探究大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后骨髓间充质干细胞(BMSCs)的干预对神经细胞凋亡和自噬的作用及其过程。方法:将48只Sprague-Dawley(SD)大鼠(雄性)随机分为:假手术(Sham)组、模型(SAH)组、模型组+骨髓间充质干细胞(BMSCs)组、模型组+BMSCs+AMPK抑制剂(Compound C)组,共4组,每组12只。除Sham组外,其他组通过造模形成具有血管内点的SAH样本,Compound C组、BMSCs组分别将Compound C和10μL生理盐水在模型制作前30 min,用大鼠大脑立体定位器经左侧脑室注入大鼠,造模成功后将2μL浓度为1×108/mL的细胞悬液于大鼠造模后1 h经脑室注入。观察大鼠脑组织水肿程度;用Garcia评分量表测试大鼠的神经功能,TUNEL染色监测大鼠海马回的神经元凋亡情况;免疫组化反映大鼠海马回LC3-Ⅱ与Beclin-1两种蛋白表达;应用Western blot检测Beclin-1,LC3-Ⅱ以及AMPK通路中的p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR等蛋白的暴露量。结果:与Sham组相比,SAH组大鼠脑水肿加重,神经元凋亡率增高,神经功能减弱,蛋白质颗粒降低(P<0.05),p-AMPK及其相关蛋白的暴露率降低(P<0.05);与SAH组相比,BMSCs组脑水肿减轻,神经元凋亡率下降,且LC3-Ⅱ、Beclin-1及p-AMPK蛋白明显增加,p-mTOR蛋白明显减少(P<0.05);与BMSCs组相比,Compound C组大鼠脑组织水肿加重,神经凋亡率上升,神经功能减弱(P<0.05),LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-AMPK蛋白表达含量降低,p-mTOR蛋白含量升高(P<0.05)。结论:BMSCs移植可减轻SAH后的神经元凋亡;其原理可能是激活AMPK/mTOR通路,加强神经元的自噬,从而抑制其向凋亡的转化。

神经细胞铁死亡在蛛网膜下腔出血大鼠脑组织中的表达及其作用

目的 探究神经细胞铁死亡在蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage, SAH)大鼠早期脑损伤(early brain injury, EBI)期间的表达情况及其神经功能损害的关系。方法 48只健康雄性SD大鼠被随机分为4组:假手术组(Sham组)、蛛网膜下腔出血组(按造模后取材时间不同分为3个亚组:SAH 6 h组、SAH 24 h组、SAH 72 h组),每组12只。用血管内穿刺法进行SAH造模,Sham组大鼠仅行血管穿刺,但不刺破血管。参照Garcia评分表检测各组大鼠的神经功能评分,干湿重法脑组织含水量;HE染色观察神经细胞形态并统计坏死数量,普鲁士蓝染色观察脑组织中铁沉积情况;吸光光度法检测各组大鼠脑组织铁含量、脂质过氧化物丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)活性,标准曲线法检测谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量。结果 与Sham组比较,SAH 6 h、24 h、72 h组大鼠的神经功能评分显著降低(P<0.05)。与Sham组比较,SAH 24 h、72 h组大鼠脑组织含水量明显升高(P<0.05),但SAH 6 h组差异无统计学意义(P>0.05)。与Sham组比较,SAH 24 h、72 h组大鼠脑组织海马CA1区神经元细胞坏死数明显增多(P<0.05),SAH 6 h组神经元细胞坏死数量差异无统计学意义(P>0.05)。普鲁士蓝染色结果显示,在Sham组脑皮质组织中,没有发现明显的铁沉积,SAH 6 h组脑皮质组织中有少量铁沉积;与Sham组比较,SAH 24 h、72 h组大鼠脑组织中铁沉积明显增多(P<0.05)。与Sham组比较,SAH 24 h、72 h组大鼠脑组织中铁含量、MDA含量明显增加(P<0.05),GSH含量和GPX4活性显著降低(P<0.05)。结论 神经细胞铁死亡在SAH大鼠EBI期间出现,且呈时间依赖性,72 h最为严重;其可能与神经功能损害有关。

急性脑血管病并发医院感染经济损失的病例对照

目的探讨急性脑血管病住院后医院感染所造成的经济损失,使医务人员对急性脑血管病住院后医院感染的危害有更直观的认识,提高其感染预防控制意识。方法采用1∶1配对病例对照研究方法,唐山市协和医院2015年1月至2017年9月急性脑血管病患者住院后并发医院感染的64患者作为病例组,同期未发生感染的64例患者作为对照组,比较两组患者住院费用等差异。结果两组患者的平均总费用(中位数)差异有统计学意义(P<0.05),平均每例患者由医院感染所造成的经济损失为7965元,直接经济损失5757元,间接经济损失2276元,延长住院天数6d;在直接分类费用中,两组监护费、治疗费、药品费、床位费、化验费、护理费、检查费比较,差异有统计学意义(P<0.05),在间接分类费用中,两组伙食费、误工费、陪护费比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论急性脑血管病后发生医院感染明显增加患者的直接费用、间接费用和住院时间,给患者造成巨大的经济损失,应采取有效管理方法,控制医院感染。

循证护理实践类文献撰写中存在的问题及建议

自20世纪90年代“循证护理实践”的概念引入我国，对护理学科的发展起了重要促进作用。越来越多的护理人员投入到循证护理实践研究中，其文章的数量也飞速增长。但目前已发表的有关循证护理实践的文章显示，在实际循证护理实践中存在一些对该概念和方法理解上的误区。相关文献反映出绝大多数研究未能遵循循证护理理念，仅以“循证”冠名，没有严格遵循循证护理实践方法，同时文章也缺完整报告[1]。本文就循证护理实践类文献的类型、方法及报告进行分析，旨在促进我国护理人员正确理解循证护理实践原则，有效地应用循证护理实践方法，促进循证证据的临床应用。

氧自由基/JNK信号通路在蛛网膜下腔出血大鼠神经细胞自噬中的作用机制

目的自噬是真核细胞中产生的一种细胞防御机制,决定应激损伤后细胞的恢复、修复、损伤、加重或死亡。探讨氧自由基/c-Jun氨基端激酶(JNK)信号通路在蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠神经细胞自噬中的作用。方法 160只雄性SD大鼠随机数字表法分成假手术组、SAH组、低剂量依达拉奉组、高剂量依达拉奉组。除假手术组外,其余组采用枕大池二次注血法制作SAH大鼠模型,假手术组向枕大池2次注入0.3 mL等渗盐水,余操作与SAH组一致;低剂量依达拉奉组、高剂量依达拉奉组在建模成功后经尾静脉分别给予依达拉奉(5 mg/kg,10 mg/kg,1次/24 h)。光镜观察海马区神经细胞形态结构,采用硫代巴比妥酸法检测大脑组织丙二醛水平;免疫组织化学法观察磷酸化JNK、自噬标志蛋白(Beclin-1和LC3-II)变化趋势,实时荧光定量PCR检海马区JNK mRNA、Beclin-1 mRNA、LC3 mRNA表达水平。结果 SAH组海马区可见坏死神经细胞,表现为细胞出现核溶解、核碎裂或核消失结构不清;与假手术组比较,SAH组各时间点神经细胞存活率均明显减少(P<0.05)。低剂量依达拉奉组、高剂量依达拉奉组神经细胞形态结构损伤均减轻,视野中死亡神经细胞减少;与SAH组比较,低剂量依达拉奉组、高剂量依达拉奉组各时间点神经元存活率均明显增多(P<0.05)。与假手术组比较,SAH组各时间点丙二醛均明显增多(P<0.05);与SAH组6、24、48、72 h丙二醛水平[(4.98±0.72、6.38±0.86、7.86±0.82、9.26±0.96)mmol/L]比较,低剂量依达拉奉组[(3.08±0.60、4.02±0.72、4.96±0.91、5.01±0.74)mmol/L]、高剂量依达拉奉组[(2.16±0.52、2.74±0.66、3.02±0.59、3.24±0.60)mmol/L]均降低(P<0.05)。与假手术组比较,SAH组各磷酸化JNK、Beclin-1和LC3-II免疫阳性反应增强。与SAH组比较,低剂量依达拉奉组、高剂量依达拉奉组磷酸化JNK免疫阳性反应减弱,Beclin-1和LC3-II免疫阳性反应增强。与假手术组比较,SAH组各JNK mRNA、Beclin-1 mRNA和LC3-II mRNA表达水平增加(P<0.05)。与SAH组比较,低剂量依达拉奉组、高剂量依达拉奉组JNK mRNA表达水平降低,Beclin-1 mRNA和LC3-II mRNA表达水平增强(P<0.05)。结论 SAH后氧自由基激活JNK信号通路,调控Beclin-1和LC3-Ⅱ表达介导神经细胞丢失。

ICU护士工作价值观现状及影响因素

目的了解三级甲等医院的ICU护士工作价值观现状及影响因素,为临床管理、干预研究提供基础依据。方法对河北省两家三级甲等医院230名ICU护士,应用自行设计的一般情况调查表、工作价值观量表进行问卷调查。结果河北省两家三级甲等医院ICU护士工作价值观总得分为(156.13±24.48)分;单因素分析显示,不同工作年限、家庭收支状况、家人健康状况、子女花销、工作强度、绩效考核是否满意、晋升机会是否公平、是否有合理培训和进修、在单位自我价值能否实现、单位人际关系与ICU护士工作价值观得分差异均具有统计学差异(P<0.05)。多元线性回归分析显示,其中人际关系情况和家人健康情况与ICU护士工作价值观具有统计学差异(P<0.05)。结论河北省两家三级甲等医院的ICU护士工作价值处于中等水平,其中人际关系非常融洽,家人身体健康的ICU护士工作价值观水平较高,医院相关的管理者应针对评分较低项目制定干预与管理措施,进一步提高ICU护士工作价值观。

经皮微球囊压迫术中球囊反复爆裂病人1例

原发性三叉神经痛是常见的神经系统疾病之一,根据病人情况及病情程度,可选择不同的治疗方法,其中经皮微球囊压迫术(percutaneous microballoon compression,PMC)因其微创、重复性好而备受欢迎。PMC是由Mullan等[1]在1983年提出的一种治疗顽固性三叉神经痛的手术方式,通过充盈球囊压迫半月节造成神经的机械性损伤,从而达到治疗的目的。术中球囊充盈容积一般在0.4~1 ml,压迫时间为1.5~2.5 min。球囊呈“梨形”提示手术预后良好[2,3]。颅底卵圆孔为该术式的必经之路,对于颅底解剖结构正常者采用该术式通常术程顺利且可以取得良好的治疗效果,对于颅底解剖结构异常者则不然。

中重型颅脑损伤患者继发应激性溃疡机制和防治策略研究进展

中重型颅脑损伤是复杂的危重临床疾病,容易继发应激性溃疡(stress ulcer,SU)值得关注.中重型颅脑损伤继发应激性溃疡的机制复杂,多与颅内压增高,迷走神经兴奋,儿茶酚胺分泌增多,胃黏膜灌注减少,H+逆向渗透有关.治疗颅脑损伤的同时,积极预防应激性溃疡是改善患者预后的关键.质子泵抑制剂(proton pump inhibitor,PPI)、组胺受体拮抗剂(histamine H2 receptor antagonists,H2RA)被广泛应用于应激性溃疡的预防和治疗,但是其预防效果和药物副作用方面还存在较大争议.应激性溃疡的发生涉及多种因素的综合作用,既往研究为临床提供了一定的参考价值,但是很难精准地指导临床应激性溃疡的科学防治,未来应依据大量循证医学证据制定应激性溃疡防治指南,明确干预时机,预防性用药适应症,形成规范化治疗.

生活质量在脑卒中偏瘫患者二元应对与焦虑抑郁间的中介效应

目的 调查并讨论脑卒中偏瘫患者与其配偶在面对偏瘫情况时的二元应对水平现状。然后,基于主-客体互倚模型的方法来探讨生活质量在脑卒中偏瘫患者的二元应对水平对焦虑抑郁的中介作用。方法 调查患者的一般资料,并根据二元应对量表、HAMA、HAMD、婚姻调适量表、脑卒中专用生活质量量表对2020年10月—2021年8月619对住院脑卒中偏瘫患者其配偶进行相关的问卷调查,然后采用SPSS23.0统计学软件对所得数据进行多元分层回归分析以及Spearman相关性分析;并基于主-客体互倚模型,分析生活质量在脑卒中偏瘫患者二元应对水平对焦虑抑郁的中介作用。结果 619对患者及配偶当中,双方二元应对均低于平均水平的为243对,双方二元应对处于平均水平为226对,双方二元应对均高于平均水平的为150对。脑卒中偏瘫患者的生活质量与患者二元应对、患者婚姻的调试水平、配偶的二元应对水平、配偶婚姻调试水平呈正相关的关系(r=0.456、0.492、0.442、0.433,P<0.05);与患者焦虑、抑郁呈负相关的关系(r=-0.734、-0.860,P<0.05)。生活质量在患者二元应对水平对患者的焦虑、抑郁中介效应占比17.55%、23.20%;在配偶二元应对水平对患者的焦虑、抑郁的中介效应占比为38.21%、44.12%。结论 脑卒中偏瘫患者的二元应对水平中等;生活质量与患者二元应对、患者婚姻调试、配偶二元应对、配偶婚姻调试水平呈正相关关系;与患者焦虑、抑郁呈负相关关系。生活质量在患者二元应对水平对患者的焦虑、抑郁的影响中起到了部分的中介作用。在临床护理工作中,引导患者和配偶积极二元应对,为改善患者生活质量,开展新的健康教育奠定基础。

基于动脉自旋标记的动脉瘤性蛛网膜下腔出血短期预后模型构建及评价:一项前瞻性研究

目的 构建基于动脉自旋标记的动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)短期预后模型,评价模型效能。方法 前瞻性选取本院的107例aSAH患者作为研究对象,均行动脉自旋标记检查。根据出院后90 d的改良Rankin量表评分将患者分为预后良好组和预后不良组。比较2组的年龄、Hunt-Hess量表评分、改良Fisher量表评分、格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分及血细胞参数等数据。用LASSO-Logistic回归分析aSAH预后的风险因素。构建预后模型,采用ROC曲线、校准曲线和决策曲线分析评估模型效能。结果 预后不良组的年龄、Hunt-Hess量表评分、改良Fisher量表评分、中性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞/淋巴细胞比值和系统免疫炎症指数均高于预后良好组(P<0.05),GCS评分、血小板/淋巴细胞比值、同侧局部脑血流(rCBF)值和rCBF比值均低于预后良好组(P<0.05)。LASSO-Logistic回归分析结果显示,年龄>44岁和Hunt-Hess量表评分3~5分是aSAH预后的独立危险因素(P<0.05),GCS评分>9分和rCBF比值>0.66是aSAH预后的独立保护因素(P<0.05)。模型A(由年龄、Hunt-Hess量表评分和GCS评分构成,0.961)和模型B(由年龄、Hunt-Hess量表评分、GCS评分和rCBF比值构成,0.981)的ROC曲线下面积差异无统计学意义(P>0.05)。模型A的校准曲线与理想曲线重合度中等,模型B的校准曲线与理想曲线重合度高;模型A(0.042)的平均绝对误差值高于模型B(0.014)。在大部分风险阈值范围内,模型B的净收益均高于模型A。结论 aSAH患者的年龄、Hunt-Hess量表评分和GCS评分有助于判断其不良预后。联合rCBF比值构建的模型判断aSAH患者不良预后的价值更高。

昼夜节律与创伤性脑损伤相关性的研究概况:基于文献计量学与可视化分析

目的通过文献计量学分析和可视化方法探索在脑损伤和昼夜节律相关研究领域的研究历史、现状、热点与趋势。方法从Wos Core Collection(WoSCC)数据库中检索、筛选和下载脑损伤和昼夜节律相关的文章。检索时间从建库到2022年9月30日。采用VOSviewer(version 1.6.18)和CiteSpace(version 6.1.R2)软件进行文献计量学和可视化分析。结果共检索出171篇脑损伤和昼夜节律相关文章。自2014年起,关于脑损伤和昼夜节律相关的文章数量呈逐年上升趋势。此外,该研究领域内来自不同机构、国家和作者之间的合作并不活跃。结论昼夜节律在脑损伤中的作用机制相关研究还处于起步阶段,睡眠和睡眠障碍可能是昼夜节律和脑损伤研究领域未来的前沿和趋势。

以颈部抬起无力为首发表现的颅内静脉窦血栓1例报告

颅内静脉窦血栓形成(cerebral venous sinus thrombosis,CVST)是一种缺血性脑血管疾病,临床上较为少见且临床表现无明显特异性。华北理工大学附属医院神经内科四病区收治的1例以颈部抬起无力为首发症状的颅内静脉窦血栓形成患者,现对其临床资料进行报道并对相关文献进行复习,以讨论颅内静脉窦血栓形成的病因、发病机制、临床表现、辅助检查、治疗及预后,旨在为此类患者的早期诊治提供参考性意见。

法舒地尔对大鼠蛛网膜下腔出血早期脑损伤的行为能力及海马区神经细胞凋亡的影响

目的探讨法舒地尔对大鼠实验性蛛网膜下腔出血(SAH)早期脑损伤的行为能力及海马区神经细胞凋亡的影响。方法雄性成年健康SD大鼠随机分为假手术(sham)组、蛛网膜下腔出血(SAH)组、药物(Fasudil)组,每组各8只。颈内动脉刺破法建立大鼠SAH模型,各组干预后72 h穿梭箱实验测试大鼠行为能力,麻醉处死,海马区组织进行HE染色观察细胞形态,TUNEL染色观察凋亡细胞数量。结果对比sham组,SAH组逃避反应时间(ERT)延长,主动回避反应率(AARR)降低,海马区HE染色正常神经细胞较少,TUNEL染色表达细胞增多,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对比SAH组,Fasudil组ERT缩短,AARR升高,海马区HE染色正常神经细胞较多,TUNEL染色表达细胞减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SAH后大鼠行为能力较差,海马区神经细胞凋亡明显。法舒地尔可减轻早期脑损伤,减少神经细胞的凋亡,改善大鼠的行为能力。

脑缺血后处理对大鼠大脑海马区Notch1、Cyclin D1和CDK4蛋白表达的影响

目的:探讨基于Notch1信号通路观察缺血后处理(CIP)对全脑缺血再灌注(I/R)大鼠海马区神经元中Cyclin D1和CDK4蛋白表达的影响,阐明其机制。方法:128只健康的雄性SD大鼠随机分为假手术组、I/R组(改良的Pulsinelli四血管阻断法制作)、CIP组(在彻底再灌注之前进行反复3次的再通/阻断血管)和DAPT组(实施CIP之前3h按10mg·kg-1·d-1腹腔注射DAPT),每组32只。分别在缺血后6、24、48和72h采用HE染色观察各组大鼠海马区神经元表现并计算存活率,免疫组织化学染色观察Cyclin D1、CDK4和Notch1表达的细胞,Western blotting法观察各时间点大鼠海马区中Cyclin D1、CDK4和Notch1蛋白的表达水平。结果:HE染色,与假手术组比较,I/R组大鼠海马区神经元结构损伤,各时间点海马区神经元存活率明显降低(P<0.05);与I/R组比较,CIP组相应时间点大鼠海马区神经元存活率明显升高(P<0.05);与CIP组比较,DAPT组相应时间点大鼠海马区神经元存活率明显降低(P<0.05)。免疫组织化学染色,与假手术组比较,I/R组大鼠海马区Notch1、Cyclin D1和CDK4阳性细胞数增加(P<0.05);与I/R组比较,CIP组大鼠海马区Cyclin D1和CDK4阳性细胞数增加(P<0.05),Notch1阳性细胞数明显增加(P<0.05);与CIP组比较,DAPT组大鼠海马区Cyclin D1和CDK4阳性细胞数增加(P<0.05),Notch1阳性细胞数明显减少(P<0.05)。Western blotting法,与假手术组比较,I/R组大鼠海马区Notch1、Cyclin D1和CDK4蛋白表达水平升高(P<0.05);与I/R组比较,CIP组大鼠海马区Cyclin D1和CDK4蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Notch1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与CIP组比较,DAPT组的Cyclin D1和CDK4蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Notch1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:CIP对神经元的保护作用可能是通过提高Notch1蛋白活性和抑制Cyclin D1和CDK4蛋白实现的。

纳洛酮对蛛网膜下腔出血大鼠海马区神经细胞自噬的影响

目的探讨纳洛酮对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠海马区神经细胞自噬的影响。方法将108只健康雄性清洁级SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH组、纳洛酮组,每组36只。假手术组只进行造模手术不刺破血管,SAH组利用颈内动脉穿刺法制成大鼠SAH动物模型,纳洛酮组在造模成功后立即给予纳洛酮(1 mg∕kg体质量)腹腔注射,每12小时注射1次,用药至处死的各时相点。假手术组和SAH组采用同样方法注射同等体积的0.9%氯化钠溶液。每组又按6 h、24 h、72 h时间点分为3个亚组(每个亚组12只SD大鼠)。穿梭箱实验观察三组大鼠的行为学变化;苏木素-伊红(HE)染色观察海马区神经细胞形态变化;免疫组织化学检测自噬特异性标志物Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ)在大鼠海马区神经细胞的表达。结果与假手术组相比,SAH组6 h、24 h、72 h各时间点逃避反应次数减少[(24.83±3.24)次比(14.41±1.98)次,(25.33±2.64)次比(16.25±2.18)次,(25.16±2.82)次比(18.33±2.57)次](P<0.05),逃避反应时间增加[(3.54±0.99)s比(9.09±1.38)s,(3.55±0.84)s比(8.73±1.13)s,(3.54±0.83)s比(8.00±1.04)s](P<0.05),海马区正常神经细胞数量减少[(122.67±5.55)个比(84.25±12.63)个,(122.25±5.50)个比(75.58±11.11)个,(121.58±5.68)个比(67.75±10.55)个](P<0.05),表达Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白的阳性细胞数量增高[(20.50±3.45)个比(31.41±4.96)个,(20.33±2.77)个比(47.67±7.35)个,(20.50±3.59)个比(43.17±6.46)个;(17.08±3.00)个比(27.42±3.40)个,(17.50±2.31)个比(39.83±4.67)个,(17.41±2.57)个比(31.50±4.06)个](P<0.05)。与SAH组比较,纳洛酮组各时间点逃避反应次数增多[(14.41±1.98)次比(16.50±1.93)次,(16.25±2.18)次比(19.25±2.30)次,(18.33±2.57)次比(22.50±2.20)次](P<0.05),逃避反应时间减少[(9.09±1.38)s比(8.05±1.24)s,(8.73±1.13)s比(6.56±1.09)s,(8.00±1.04)s比(5.36±0.97)s](P<0.05),海马区正常神经细胞数量增多[(84.25±12.63)个比(94.75±11.06)个,(75.58±11.11)个比(84.50±9.21)个,(67.75±10.55)个比(77.33±9.88)个](P<0.05),表达Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白的阳性细胞数量增高[(31.41±4.96)个比(36.17±4.06)个,(47.67±7.35)个比(57.58±6.68)个,(43.17±6.46)个比(52.75±7.35)个;(27.42±3.40)个比(30.92±4.19)个,(39.83±4.67)个比(48.33±5.66)个,(31.50±4.06)个比(38.58±5.40)个](P<0.05)。结论纳洛酮的干预可适度激活SAH大鼠海马区神经细胞自噬的表达,并具有脑保护作用。

脑缺血后处理对脑缺血再灌注大鼠Notch1信号通路及学习记忆功能的影响

目的探讨脑缺血后处理(CIP)对全脑缺血大鼠Notch1信号通路及其学习记忆功能的影响。方法将128只健康的雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、脑缺血再灌注模型组(CIR组)、脑缺血后处理组(CIP组)、抑制剂组(DAPT组),每组32只。采用改良的Pulsinelli四血管阻断法制备全脑缺血模型;DAPT组是在实施CIP前腹腔注射γ分泌酶抑制剂(DAPT)。Morris水迷宫测试检测大鼠学习记忆功能,HE染色观察海马CA1区神经细胞形态变化;免疫组织化学法、Western blotting法检测大鼠脑组织海马CA1区Notch1在海马区的表达情况。结果与sham组比较,CIR组海马区存活细胞率显著降低(P<0.05),Notch1阳性细胞数及Notch1蛋白的表达水平明显升高(P<0.05);与CIR组比较,CIP组海马区存活细胞率显著升高(P<0.05),Notch1阳性细胞数及Notch1蛋白的表达水平明显升高(P<0.05);与CIP组比较,DAPT组海马区存活细胞率显著降低(P<0.05),Notch1阳性细胞数及Notch1蛋白的表达水平明显降低。结论 CIP可促进脑缺血再灌注大鼠学习记忆功能恢复,其机制可能与激活Notch1信号通路有关。