异硫氰酸苄酯治疗未分化甲状腺癌的机制研究

目的研究异硫氰酸苄酯(benzyl isothiocyanate, BITC)治疗未分化甲状腺癌(anaplastic thyroid cancer, ATC)的机制。方法网络药理学分析:BITC和ATC关键靶点筛选, 并进行GO和KEGG富集分析。验证:运用AutoDock软件对BITC及ATC关键靶点进行对接;细胞实验:首先, BITC作用于2种ATC细胞株8505C和CAL-62, 流式细胞术分析细胞凋亡情况, 然后自噬抑制剂硫酸羟基羟氯喹(HCQ)和3-甲基腺嘌呤(3MA)分别与BITC联合应用, 实时荧光定量PCR检测LC3B基因水平及Western印迹法检测NF-κB、LC3BⅡ、Beclin-1、Bcl-2表达量;动物实验:CAL-62构建小鼠肿瘤模型, 分别用腹腔注射BITC(100 mg/kg)和生理盐水治疗, 隔天给药, 共21 d, 肿瘤组织免疫印迹检测LC3B Ⅱ、Bcl-2、Beclin-1及NF-κB的表达。结果共筛选出10个关键靶点, 对接结合能均小于≤-4.0 kcal/mol;KEGG显示关键靶基因主要富集于NF-κB信号通路、凋亡等信号通路。BITC对2种ATC细胞株8505C和CAL-62有抑制作用, IC50值分别为27.56和28.30 μmol/L, NF-κB、Beclin-1及Bcl-2的表达降低, 而LC3B Ⅱ表达升高, LC3B基因表达水平明显升高。3MA与BITC联合应用, 抑制细胞作用增强, 同时增加LC3B Ⅱ的表达;HCQ增加LC3B Ⅱ表达, 但并未增强抑制细胞活力作用。小鼠肿瘤模型中, 与对照组相比治疗组LC3B Ⅱ表达增加, Bcl-2、Beclin-1及NF-κB表达降低。结论 BITC在体外和体内均抑制ATC细胞的生长, 破坏ATC细胞的自噬降解, 抑制NF-κB通路。

基于血液学指标探讨免疫治疗晚期非小细胞肺癌预后因素及列线图构建

目的基于血液学指标探讨接受免疫治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的影响因素, 以此构建列线图预测模型并进行评估。方法回顾性分析2018年1月至2020年6月在华北理工大学附属医院、唐山市人民医院接受程序性死亡受体1抑制剂单药或联合方案治疗的80例晚期NSCLC患者的临床资料。分别收集基线期、最佳缓解期和疾病进展(PD)期的血液学指标, 采用Cox比例风险回归模型分析患者预后的独立影响因素。根据多因素分析结果构建列线图预测模型, 并采用受试者操作特征曲线、一致性指数(C-index)和校准曲线评估模型的预测效能。结果截至随访截止日期, 80例患者中63例PD, 患者中位总生存期(OS)为16.9个月。单因素分析显示, 年龄(HR=2.09, 95%CI为1.17~3.74, P=0.013), 治疗线数(HR=2.23, 95%CI为1.21~4.12, P=0.010), 基线期的淋巴细胞与单核细胞比值(LMR)(HR=0.75, 95%CI为0.57~0.97, P=0.028), 最佳缓解期的D-二聚体(HR=1.00, 95%CI为1.00~1.00, P=0.002)、乳酸脱氢酶(LDH)(HR=1.01, 95%CI为1.00~1.01, P=0.006), PD期的血红蛋白(HR=0.97, 95%CI为0.96~0.99, P<0.001)、D-二聚体(HR=1.00, 95%CI为1.00~1.00, P=0.002)、C-反应蛋白(HR=1.01, 95%CI为1.00~1.01, P=0.011)、白蛋白(ALB)(HR=0.91, 95%CI为0.87~0.96, P=0.001)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)(HR=1.16, 95%CI为1.05~1.27, P=0.002)和LMR(HR=0.62, 95%CI为0.42~0.90, P=0.012)均是接受免疫治疗晚期NSCLC患者预后的影响因素。采用最小绝对收缩和选择算子回归对单因素分析中P<0.10的变量进行筛选, 得到9个可能的影响因素, 分别为年龄, 最佳缓解期的纤维蛋白原、LDH, PD期的血红蛋白、D-二聚体、C-反应蛋白、LDH、ALB和LMR。将上述变量进行多因素分析显示, 年龄(HR=0.91, 95%CI为0.86~0.97, P=0.004)、PD期的LDH(HR=1.01, 95%CI为1.00~1.01, P=0.013)和ALB(HR=0.82, 95%CI为0.67~0.99, P=0.041)均是接受免疫治疗晚期NSCLC患者预后的独立影响因素。基于上述指标构建的列线图模型预测患者1、2年OS率的曲线下面积分别为0.77(95%CI为0.65~0.89)、0.75(95%CI为0.66~0.88), C-index为0.71(95%CI为0.64~0.78), 校准曲线显示预测概率与实际发生概率一致性较好。低风险组患者(n=40)的中位OS为29.9个月(95%CI为22.5个月~NA), 明显优于高风险组(n=40)[13.4个月(95%CI为11.4~23.5个月), χ^(2)=11.30, P<0.001]。结论年龄、PD期的LDH和ALB均是接受免疫治疗晚期NSCLC患者预后的独立影响因素, 基于上述指标构建的列线图模型对预测接受免疫治疗晚期NSCLC患者1、2年OS率具有良好的区分度和校准度。