期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
多重PCR方法检测大肠杆菌O157∶H7的初步研究 被引量:13
1
作者 朱文冠 薛素强 +2 位作者 洪洁心 崔剑峰 郭霄峰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期428-432,共5页
目的研究一种快速、特异的检测大肠杆菌O157∶H7的多重PCR方法。方法以大肠杆菌O157∶H7的O157抗原基因(rfbE基因)、鞭毛H7抗原基因(fliC基因)、粘附素基因(eaeA基因)和志贺样毒素Ⅰ、Ⅱ(SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因)为扩增对象,设计能导至目的... 目的研究一种快速、特异的检测大肠杆菌O157∶H7的多重PCR方法。方法以大肠杆菌O157∶H7的O157抗原基因(rfbE基因)、鞭毛H7抗原基因(fliC基因)、粘附素基因(eaeA基因)和志贺样毒素Ⅰ、Ⅱ(SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因)为扩增对象,设计能导至目的片段大小不同的5对引物,通过优化条件,建立了可用于粪便检测的大肠杆菌5重PCR。结果在同一扩增体系中,检测了5株不同来源的大肠杆菌O157∶H7及27株非大肠杆菌O157∶H7细菌。结果表明,该方法能从2株大肠杆菌O157∶H7中扩增出rfbEf、liC、eaeA、SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因,它们的大小分别为582 bp、802 bp、487 bp3、68 bp和177 bp。而另外3株大肠杆菌O157∶H7也能扩增出除eaeA、SLT-Ⅱ基因外的其它3个基因片段。表明该方法可用于检测大肠杆菌O157∶H7,还可检测细菌是否含有毒素基因。在检测27株非大肠杆菌O157∶H7,除O149出现SLT-II扩增产物和O1∶H7出现fliC基因扩增产物外,其它非大肠杆菌O157∶H7的扩增结果均为阴性,表明该方法有较高的特异性。当粪便样品经增菌培养12 h,用该5重PCR体系能检测出最初接种量为5cfu/g粪便的样品。结论本5重PCR方法具有较高的特异性和敏感性,可迅速、有效地将大肠杆菌O157∶H7与其它非大肠杆菌O157∶H7相区别,同时还能检测O157∶H7中的毒力因子。因此,通过进一步研究,本方法有望应用于临床大肠杆菌O157∶H7感染的辅助诊断。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 H7 PCR rfbE基因 fliC基因 eaeA基因 SLT-Ⅰ基因 SLT-Ⅱ基因
下载PDF
表达绿色荧光蛋白嵌合狂犬病病毒HEP-GFP株的拯救 被引量:9
2
作者 刘晓慧 艾军 +2 位作者 郭霄峰 孙京臣 梁红茹 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期401-403,共3页
Green fluorescent protein(GFP)gene was inserted into the pseudogene(ψ)region of genome of rabies virus rHep-Flury strain,and a recombinant rabies virus carrying GFP,designated as HEP-GFP,was rescued by reverse geneti... Green fluorescent protein(GFP)gene was inserted into the pseudogene(ψ)region of genome of rabies virus rHep-Flury strain,and a recombinant rabies virus carrying GFP,designated as HEP-GFP,was rescued by reverse genetics system.It was demonstrated that green fluorescent protein could be expressed in the chimeric virus after 5 passages in BHK-21 cell line.The research indicated that the pseudogene(ψ)region in the genome of rHEP-Flury strain,as an independent functional unit in the process of virus assembly,could independently carry and express exogenous genes. 展开更多
关键词 狂犬病毒 嵌合病毒 绿色荧光蛋白
下载PDF
ELISA与FAVN方法检测犬狂犬病抗体的比较 被引量:15
3
作者 孙招金 薛素强 +2 位作者 刘晓慧 郭霄峰 郭慧霞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期204-206,共3页
比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与细胞培养病毒中和试验(FAVN)检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体。将40只犬免疫兽用狂犬病疫苗后,第14d静脉采血分离血清,分别采用ELISA法和国际贸易指定试验FAVN法检测血清样品,试验犬免疫第21d攻击狂犬病毒B... 比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与细胞培养病毒中和试验(FAVN)检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体。将40只犬免疫兽用狂犬病疫苗后,第14d静脉采血分离血清,分别采用ELISA法和国际贸易指定试验FAVN法检测血清样品,试验犬免疫第21d攻击狂犬病毒BD06株。结果表明,两种方法检测结果差异不显著(p≥0.05,p=0.19),FAVN、ELISA法检测狂犬病抗体与攻毒试验结果的阳性符合率均为100%。 展开更多
关键词 狂犬病抗体 ELISA FAVN
下载PDF
狂犬病毒HEP-dG株的拯救 被引量:4
4
作者 刘晓慧 艾军 +3 位作者 孙招金 陈晶 孙京臣 郭霄峰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期203-206,共4页
目的筛选免疫原性高、致病性低的狂犬病疫苗候选株。方法应用反向遗传技术,在狂犬病毒弱毒株HEP-Flury株全基因组3'-N-P-M-G-L-5'的假基因区域(G与L之间),插入一个G基因,构建携带双G基因的全长感染性克隆,其与辅助质粒共转染BHK... 目的筛选免疫原性高、致病性低的狂犬病疫苗候选株。方法应用反向遗传技术,在狂犬病毒弱毒株HEP-Flury株全基因组3'-N-P-M-G-L-5'的假基因区域(G与L之间),插入一个G基因,构建携带双G基因的全长感染性克隆,其与辅助质粒共转染BHK-21细胞,盲传十代,用荧光抗体和RT-PCR鉴定病毒。结果成功获得携带双G基因的狂犬病毒HEP-dG株,该病毒在BHK-21细胞中稳定生长,其病毒滴度达到1010FFU/mL。结论HEP-dG株会为研制高效的狂犬病病毒基因工程口服疫苗提供了良好的疫苗候选株。 展开更多
关键词 狂犬病毒 G基因 反向遗传学
下载PDF
大肠杆菌O_(157):H_7 rfbE基因和fliC基因的克隆与序列分析 被引量:3
5
作者 朱文冠 杨德胜 郭霄峰 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第9期22-24,共3页
根据已发表的E.coliO_(157):H_7EDL933株的rfbE基因和fliC基因,设计了两对引物,分别对两个O_(157):H_7菌株的rfbE基因和一个菌株的fliC基因进行PCR,并将PCR产物克隆于pMD18-T载体质粒。测序结果表明,获得到了与理论相符的582bprfbE基因... 根据已发表的E.coliO_(157):H_7EDL933株的rfbE基因和fliC基因,设计了两对引物,分别对两个O_(157):H_7菌株的rfbE基因和一个菌株的fliC基因进行PCR,并将PCR产物克隆于pMD18-T载体质粒。测序结果表明,获得到了与理论相符的582bprfbE基因片段和802bpfliC基因片段。一株菌的rfbE基因存在无意义突变(两个)。而另一株菌fliC基因有一个有意义突变(aac→gac) 展开更多
关键词 E.COLI O157:H7 rtbE基因 fliC基因 克隆 大肠杆菌O157:H7 FLIC E基因 序列分析 O157:H7
下载PDF
表达犬细小病毒VP2蛋白的嵌合狂犬病病毒生物学特性的研究 被引量:3
6
作者 牛学锋 刘晓慧 +5 位作者 孙招金 施赫赫 陈晶 江飙 孙京臣 郭霄峰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期362-367,共6页
为获得狂犬病病毒和犬细小病毒的二联疫苗,本研究运用分子生物学技术在狂犬病病毒基因组的G基因与L基因之间插入犬细小病毒VP2基因,通过反向遗传操作系统拯救获得了含犬细小病毒VP2基因的嵌合狂犬病病毒HEP-Flury(VP2),并研究了该病毒... 为获得狂犬病病毒和犬细小病毒的二联疫苗,本研究运用分子生物学技术在狂犬病病毒基因组的G基因与L基因之间插入犬细小病毒VP2基因,通过反向遗传操作系统拯救获得了含犬细小病毒VP2基因的嵌合狂犬病病毒HEP-Flury(VP2),并研究了该病毒的生物学特性。结果表明,嵌合狂犬病病毒HEP-Flury(VP2)可以在BHK-21细胞上稳定繁殖,在传代10次后,外源基因VP2能高效表达;以HEP-Flury(VP2)免疫小鼠,可以诱导免疫小鼠产生抗狂犬病病毒和抗犬细小病毒的抗体。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 反向遗传 犬细小病毒 疫苗
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部