棕榈科观赏植物真菌病害鉴定

鉴定了采自广州和顺德棕榈科观赏植物上的9种病原真菌,即银海枣小球腔菌(LeptosphaeriaphoenixP.G.Xi,Y.X.ChenetZ.D.Jiang)、围小丛壳[Glomerellacingulata(Stonem)Spauld.etSchrenk]、球色单隔孢(BotryodiplodiatheobromaePat.)、灰葡萄孢(BotrytiscinereaPers.)、辣椒炭疽[Colletotrichumcapsici(Syd.)Butl.＆Bisby]、棒弯孢(CurvulariaclavataJain.)、棕榈拟盘多毛孢(PestalotiopsispalmarumCooke)、异线拟茎点(PhomopsisheteronemaSacc.)、棕竹拟茎点(PhomopsisrhapidisGonz偄lezFragoso).其中银海枣小球腔菌为新种,模式标本保存于华南农业大学植物病害标本室.

根癌农杆菌介导的水稻纹枯病菌转化系统的建立

为建立水稻纹枯病菌的T-DNA插入诱变转化系统,以水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani AG-1ⅠA)强致病力菌株GD118为转化的初始菌株,从预诱导时间、共培养时间、共培养时乙酰丁香酮的浓度、共培养温度和共培养时固体诱导培养基(SIM)的pH值等5个方面对转化条件进行了优化,成功地建立了适合于水稻纹枯病菌根癌农杆菌介导转化(ATMT)的优化系统。这个优化系统的转化条件如下:以30μg/mL的潮霉素B作为转化子的筛选浓度,预诱导8h,共培养20h,共培养时固体诱导培养基上的乙酰丁香酮浓度为200μmol/L,共培养温度25℃,共培养时固体诱导培养基pH5.6～5.8。采用这个系统筛选到的转化子继代培养5代后,在含30μg/mL潮霉素B的PDA平板上仍表现明显的抗性。从得到的转化子中随机抽取10个,利用根据抗潮霉素hph基因设计的特异性引物进行PCR扩增,转化子均能扩增出500bp左右的预期条带;与此同时,以4个根癌农杆菌作为阳性对照,用根癌农杆菌Vir基因特异引物对转化子进行PCR扩增,以排除转化子受农杆菌污染所致的假阳性,结果表明:4个根癌农杆菌均能扩增出Vir基因条带(730bp),而10个转化子均未能扩增出相应条带。以上两个PCR扩增的实验结果清楚地表明,T-DNA已经插入到目标菌株GD118中。

13种植物丝核菌对水稻、甜玉米、黄瓜和甘蓝的交互致病性

从13种植物上分离得到58个丝核菌(Rhizoctonia spp.)菌株,在确定其种类和融合群的情况下,将所有供试菌株分别接种于水稻(Oryza sativa L.)、甜玉米(Zeamays var.saccharata)、黄瓜(Cucumis sativus)及甘蓝(Brassica capitata)上,测定其致病性。结果表明:从玉米(Zea mays)和甜玉米上分离得到的菌株(大部分归属于AG-1)的致病力最强;其次为其它植物上分离的菌株(归属于AG-4),其致病力属于中等;从其它植物上分离得到的、归属于其它融合群及非立枯丝核菌的菌株的致病力最弱。

广东省凤梨科观赏植物真菌病害鉴定

为给观赏植物病害的防治提供科学依据,根据病害症状和病原菌的形态特征以及有关文献的分类系统,鉴定了1998-2000年在广东调查的12种凤梨科观赏植物真菌病害,即围小丛壳[Glomerrellacinghlata(Stonem.)Spauld.etSchrenk]、辣椒刺盘孢[Colletotrichumcapsici(Syd.)Butl.etBisby]、水塔花星裂盘菌(PhacidiumbillergiaeL.ZengetP.K.Chi)、凤梨顶多毛孢菌(BartaliniaananassaL.Zeng,Z.D.JiangetP.K.Chi)、可可球二孢(BotryodiplodiatheobromaePat.)、钝头粘盘孢菌(ColletogloeumobtusumSutton)、油球拟茎点霉[Phomopsisdiplodinoides(Sacc.)Punith.]、筒凤梨拟茎点霉(PhomopsisspectabilisV.G.Rao&B.R.D.Yadav)引起的叶斑病,灰霉(BotrytiscinereaPers.)引起的花腐及分别由强雄腐霉(PythiumarrhenomanesDrechsler)、簇囊腐霉(PythiumtorulosumCoker&Patterson)和蕨柱帚霉(CylindrocladiumpteridisWolf)引起的根茎腐、叶基茎基腐和茎基腐。其中,星裂盘菌叶斑病、顶多毛孢叶斑病为凤梨科观赏植物的新病害;钝头粘盘孢菌、油球拟茎点霉为中国真菌新记录种。在温室生产中,以围小丛壳引起的叶炭疽病、筒凤梨拟茎点霉引起的叶斑病发生普遍而严重;根茎腐、叶基茎基腐和茎基腐在部分生产单位常引起死苗或死株,给生产上?

植物病原真菌学的教学优化与实践

为了加强专业教育和提高学生的综合素质,《植物病原真菌学》课程教学从以下五个方面作了一些有益的探索:(1)专业思想的培养与教育;(2)教学内容的拓展与更新;(3)多媒体教学的应用;(4)加强实验和实践教学;(5)科研水平与教师素质的提高。

广东省姜科观赏植物真菌病害的病原鉴定

1998年至 2 0 0 0年在广东省进行姜科 (Zingiberaceae)观赏植物真菌病害系统调查中鉴定到 9种病原真菌 ,其中华山姜球腔菌Mycosphaerellaalpini suishaenscolaL .Zeng ,Z .D .JiangetP .K .Chisp .nov .、姜花假尾孢菌PseudocercosporahedychiaeL .ZengetP .K .Chisp .nov .和红苞小草蔻茎点霉Phomaalpini henriicolaL .ZengetP .K .Chisp .nov .为新种 ,其它真菌分别为 :省藤球座菌Guignardiacalami (H .&P .Sydow)vonArx&E .Muller、姜小球腔菌Leptosphaeriazingiberi (Saw .)V .Dhar,L .S .SrivastavaetH .Sahambi、胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides (Penz.)Sacc.、胡枝子拟盘多毛孢PestalotiospislespedezaeSyd .、星形拟盘多毛孢PestalotiopsisstellataBerk .&Curt.、姜拟茎点霉PhomopsisnatalinaeDosSantos。 3个新种的模式标本保存于华南农业大学真菌标本室 (SCHM )。

蛋白激发子产生菌链格孢(Alternaria spp.)JH505菌株分子系统学研究

在传统真菌形态学分类研究的基础上,运用遗传学、分子生物学研究手段,结合生物信息学方法对具有诱导植物增产抗病的蛋白激发子产生菌链格孢(Alternaria spp.)JH505菌株进行了分子系统学研究。克隆了该菌株长度为1 267bp的rDNA序列。结果表明,rDNA包含部分18S rRNA、28S rRNA序列及完整的5.8S rRNA、转录外间隔区(ITS1、ITS2)rRNA序列,与A.tenuissima、A.cinerariae、A.dianthi、A.brassicae、A.zinniae相应的rDNA分别具有100%、98%、97%、97%和96%的相似性。结合菌落形态、孢子特征以及rDNA分析,鉴定该菌株为细极链格孢菌(A.tenuissima)。

中国苹果产业进出口及其植物检疫情况

在对中国苹果产业发展概况及苹果进出口贸易现状进行梳理的基础上,介绍了国际贸易绿色壁垒对中国苹果出口的影响,由进境苹果检疫中的重要事件,阐述了植物检疫对中国苹果产业健康发展的重要性。

广东香蕉枯萎病菌生理小种的鉴定

以4—5片叶的组培香蕉苗和粉蕉苗为材料，采用伤根浸菌液的接种法对分离自番禺、中山、肇庆、珠海、顺德等地的香蕉枯萎病菌株进行了致病性测定，同时观察了各菌株在Komada改良培养基上菌落形态特征．结果表明在广东的确存在香蕉枯萎病菌1号和4号2个小种，认为致病性测定结合Komada改良培养基上菌落形态特征是鉴定香蕉枯萎病菌生理小种的简单、快速而又可靠的方法．

纯培养拟茎点霉属真菌的产孢条件

对8种拟茎点霉纯培养下的产孢条件进行了筛选和比较.结果表明,拟茎点霉产孢的最佳培养基为苜蓿煎汁+Czapek培养基,其次为燕麦片琼脂培养基和苜蓿杆+水琼脂培养基;最适温度范围为22～25 C;最佳光照时间为每天12h(日光灯40W,与培养物问的距离约为30cm):合适的pH值范围为5.6～6.8.

水稻抗纹枯病突变体的离体筛选

以水稻成熟胚培养产生的愈伤组织和悬浮细胞为筛选材料,以广东省水稻纹枯病菌Rhizoctonia solaniKühn强致病力菌株GD-11和GD-118产生的粗毒素为选择压力,从水稻品种的选择、粗毒素致病力的鉴定、突变体的筛选方法、突变体的再生以及突变体再生植株对粗毒素的抗病性鉴定等方面展开研究,建立了水稻抗纹枯病突变体的筛选体系并获得了抗病突变体.筛选体系为:两步筛选法,即以粤香占的愈伤组织和悬浮细胞为筛选材料,以φ(粗毒素)为3.5%和4.0%分别作为第1、2步的处理浓度,每一步处理的时间为20 d;筛选出的突变体再生苗的病情指数为37.55,而原始型再生苗的病情指数为87.50,抗病效果达57.08%.

我国南方六省(区)水稻纹枯病菌遗传多样性的研究

对来自海南、福建、广西、云南、湖南和广东等我国南方 6个代表性省 (区 )的 72个水稻纹枯病菌菌株进行了RAPD聚类分析及致病力测定。结果表明 ,供试菌株存在丰富的遗传多样性。通过使用 10个随机引物对该病菌基因组DNA进行PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳 ,共获得 2 10条DNA谱带 ,其中 5条为特征带 ,2 0 5条为多态带 ,条带多态率为98%。在 0 5 4左右的相似性系数水平 ,所有供试菌株被划分为 6个类群 ,所有来自同一省 (区 )的菌株均聚类为同一类群或亚类群。DNA条带的多态性与地理来源呈现明显的相关性 ,但与致病力的强弱无明显的相关性。

香蕉枯萎病菌的风险性分析

由尖孢镰刀菌古巴专化型Fusarium oxysporum f.sp.cubense引起的香蕉枯萎病是世界性的香蕉毁灭性病害之一,也是国际植物病害检疫对象和我国广东省、福建省补充的植物检疫对象。为加大对该病的防治和检疫力度,控制其扩散、蔓延和危害,保护香蕉生产的安全,促进我国香蕉非疫区的建设,通过全面搜集香蕉枯萎病菌的相关资料,参照国际上有害生物风险性分析方法,采用定量分析指标体系,从香蕉枯萎病菌的国内外分布状况、潜在的经济危害性、定殖和扩散的可能性、风险管理难度以及香蕉的经济价值、生态和社会效益等几个方面对香蕉枯萎病菌的风险性进行了定性和定量分析,并进行了综合评价。结果表明,香蕉枯萎病菌的风险性值为2.12,属于高度危险的检疫性有害生物(病原菌),对我国香蕉产业的发展会造成严重的威胁,应加强风险性管理力度。

纯培养下拟茎点霉分生孢子的形成及意义

以18种共23个拟茎点霉菌株为材料,比较了在25℃、12h光照(40w日光灯)/d条件下不同培养基上甲、乙型分生孢子的形成情况。结果表明,苜蓿煎汁+Czapek培养基能促使多数拟茎点霉菌株形成甲、乙两型分生孢子,其形态及大小也与自然寄主上的相一致。根据纯培养获得的形态特征对原始描述缺乙型分生孢子特征记载的Phomopsis durionis, homopsis sterculicola, Phomopsis macadamii, Phomopsis lucumicola和Phomopsis tinea进行了补充描述。

离体筛选的水稻抗纹枯病突变体的生理生化特性分析

对离体筛选的水稻抗纹枯病突变体(突变型)和未经筛选的原品种(原始型)的愈伤组织经水稻纹枯病菌Rhizoctonia solani粗毒素处理后24 h内的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性以及木质素含量的变化进行了研究.结果表明:突变型的PAL、POD和PPO比活性以及木质素含量均明显高于原始型;8 h时,PAL、POD、PPO比活性和木质素含量(D280 nm)在突变型和原始型中分别为5.493 1,0.022 0、24.896 6、2.924 2 U.mg-1.m in-1和2.716 5、0.009 9、18.838 7、1.732 1;上述3种酶活性在突变型中出现波峰的时间一般在8 h,早于原始型的12 h或更迟.由此说明离体筛选的水稻抗纹枯病突变体的抗病机制与一般抗性品种类似.

土壤环境因素对水稻纹枯病菌腐生定殖能力的影响

研究了土壤含菌量、温度、含水量和 p H值对水稻纹枯病菌在土壤中腐生定殖能力的影响。研究结果表明 :土壤含菌量越大 ,腐生后的定殖率越高 ,但未达到腐生处理前的水平 ;随着腐生温度的升高 ,定殖率逐渐下降 ,当腐生温度达到 4 0℃时 ,定殖率迅速下降到 8.0 % ;土壤含水量在 15 %时腐生能力最强、定殖率最高 ,达到 84 .0 % ,而在土壤含水量较大或较小时腐生定殖能力都不高 ;另外 ,该病菌喜好酸性的土壤环境 ,在 p H6 .0时腐生能力最强、定殖率最高 ,达到 85 .3%。

香蕉枯萎病菌4号生理小种毒素解毒剂的筛选及对香蕉防御酶活性的影响

从15种候选解毒剂中筛选出对香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)4号生理小种(简称Foc 4)毒素解毒效果最好的2种解毒剂——硫酸锌和井冈霉素。在2 g.L-1浓度下,硫酸锌和井冈霉素对Foc 4毒素的钝化率分别为76.67%和71.33%,而在5 g.L-1浓度下,它们的钝化率分别为90.33%和80.00%。探索了毒素—硫酸锌和毒素—井冈霉素处理体系在2 g.L-1和5 g.L-1浓度下对香蕉苗5种防御酶(PAL、POD、PPO、SOD和CAT)活性的影响。结果表明,在这个处理体系中,香蕉苗PAL和PPO酶活高峰出现的时间(PAL 36 h、PPO 36 h和48 h)较毒素单独处理(PAL 48 h、PPO 60 h)早;SOD和CAT酶活高峰出现的时间与对照基本一致;而POD酶活高峰出现的时间较复杂。总体上,这个处理体系的酶活高于毒素单独处理和无菌水对照。"毒素—硫酸锌处理体系"在PAL、SOD整体酶活上高于"毒素—井冈霉素处理体系",而后者在其他3种酶活上普遍高于前者。

香蕉受枯萎病菌侵染后酚类物质含量的变化

对人工接种香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporumf.sp.cubense后香蕉体内总酚及阿魏酸含量的变化进行了研究.结果表明:接种的和对照的香蕉体内的总酚和阿魏酸含量总体上都呈上升趋势,这可能是由于香蕉本身就是一类多酚植物,香蕉体内酚类物质含量随植株生长而增加的缘故.然而,接种的香蕉体内的总酚和阿魏酸含量明显高于对照的香蕉体内的总酚和阿魏酸含量,例如,接种WG5菌株28 d后粉蕉的总酚和阿魏酸含量分别为546和74.8μg/mL,而对照的相应品种在同一时间的总酚和阿魏酸含量分别为184和68.6μg/mL,表明罹病香蕉体内高水平的酚类物质含量与香蕉枯萎病菌的侵染有关.

香蕉受枯萎病菌侵染后内源激素含量的变化

对香蕉受枯萎病菌Fusarium oxysporumf.sp.cubense侵染后体内赤霉酸(GA3)、吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)3种内源激素含量的变化进行了测定.结果表明:接种的香蕉苗体内的GA3、IAA和ABA的含量均高于未接种的对照,表明香蕉枯萎病菌的侵染引起了香蕉体内GA3、IAA和ABA的积累,此3种植物内源激素与香蕉受枯萎病菌感染的病程相关.

广州地区13种作物丝核菌的鉴定

从广州地区13种作物上分离得到57个丝核菌(Rhizoctoniaspp.)菌株.依菌丝直径、细胞核数目和培养性状等鉴定出52个立枯丝核菌(R.solani)、2个水稻丝核菌(R.oryzae)和3个双核丝核菌(binucleateRhizoctonia);并对52个立枯丝核菌(R.solani)菌株进行了融合群归类,其中有30个菌株属于AG 1 IA、1个属于AG 1 IB、4个属于AG 1 IC、12个菌株属于AG 4、3个菌株属于AG 2 2ⅢB、2个菌株未知其归属.