知识经济与高等农业院校的对外培训

面对知识经济的来临，高等农业院校的对外培训应该采取怎样的方针，实施怎样的方法，在未来的国际竞争中抓住机遇，协调发展，成为有志向发展对外培训教育的高等农业院校必须关注的热点问题。本文试就面对知识经济，高等农业院校应作哪些调整和改革，提出一些看法。

阳春市合水镇蚕桑生产的问题与对策

本文分析了广东省阳春市合水镇的蚕桑生产和管理的现状,提出了巩固和稳定发展阳春市蚕业的参考性建设。

广东桑花叶病农业防治试验研究

1.桑园定点调查抗青10号、伦40号、试11号桑品种,以及不定期不定点调查沙二×109号桑品种桑花叶病年中消长规律发现,伦40号桑属高抗品种,全年都不发病,抗青10号桑具一定的抗性,而沙二×109号、试11号均属高感品种,在病害发生高峰期的4—5月份,枝发病率均达80％以上;2.收获形式分别为春刈桑、冬根刈春打顶桑,全年留枝杆长40cm或60cm的桑树,当年桑花叶病发病轻,高峰期持续期间短;而收获形式分别为全年留枝杆桑,夏刈桑和冬根刈桑的桑树,当年桑花叶病发病重,高峰期持续期间长;3.桑树采用春刈,冬根刈春打顶,全年留枝杆长40cm和全年留杆长60cm的收获形式,可以避过当年桑花叶病的发生高峰期。

应用基因枪将蚕抗菌肽基因导入水稻获抗白叶枯病株系

将天蚕抗菌肽Ｂ基因应用基因枪法导入水稻发芽种胚，获得转基因植株。经Ｂａｓｔａ抗性鉴定，应用ＰＣＲ技术和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分折表明，抗菌肽Ｂ基因已整合到水稻的基因组。Ｔ３抗白叶枯病株系Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分折证明抗菌肽Ｂ基因在ＲＮＡ水平有表达。

转基因食品安全性检验的核酸检测技术研究

以国际市场上转基因食品的主流产品转基因大豆及玉米和我国生产的转基因辣椒为材料 ,以PCR方法为基础 ,研究适用于转基因食品安全性检验的核酸检测技术。针对抗除草剂 (孟山都公司 )GM 大豆 ,转Bt 176玉米 (Novartis Ciba Geigy公司 )及转抗菌肽辣椒 (华农 )产品的插入基因及调控序列设计不同引物进行PCR检测。建立了转基因大豆、玉米、辣椒的鉴别和相关标记基因、目的基因检测的技术 ,该方法简便快速 ,检测结果与标准及申报材料相符。

抗菌肽AD基因的改造及在毕赤酵母中的表达

采用PCR技术改造抗菌肽AD基因 ,将其C末端改造为Asn编码 ,改造后的抗菌肽CecropinAD基因克隆到 pPICZα_A载体上 ,构建成酵母重组分泌型表达载体 ,转化毕赤酵母 (Pichiapastoris)受体菌GS115中 .采用zerocin抗性标记筛选重组转化子 ,经摇瓶发酵 ,浓缩发酵液进行酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析和抑菌活性检测 .结果表明 ,改造后的CecropinAD基因在毕赤酵母中获得了表达 ,表达产物经α_Factor信号肽引导分泌到胞外 ,具有较强的杀菌活性 .

重组抗菌肽的制备及其对水产养殖中常见病原菌的抑菌效果

采用YEPD培养基诱导发酵生产重组抗菌肽。经 72h培养 ,由重组酵母表达并分泌到培养基中的抗菌肽活性可高达 5 0 0 0U/ml。用纸片扩散法和试管稀释法测定重组抗菌肽对水产养殖常见病原菌的抑菌效果。结果表明 ,抗菌肽对水产养殖常见病原菌嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)、梅氏弧菌 (Vibriometschnikovi)、迟钝爱德华氏菌 (Edwardsiellatarda)及温和气单胞菌 (A .sobria)有较好的抑菌效果 ,最小抑菌质量浓度为 4 μg/ml、杀菌质量浓度为 8μg/ml。对抗菌肽抑菌过程的超微结构观察表明 ,抗菌肽的抑菌方式是通过作用于细菌的细胞膜而导致菌体裂解死亡。本研究目的在于探讨基因工程抗菌肽在水产养殖中的应用。

辣椒子叶离体培养和植株再生体系的建立

选用辣椒 (CapsicumannuumL .) 4个栽培品种和 2个杂交亲本的子叶进行诱导不定芽分化、生长及生根成苗试验 ,从中筛选出 3个较好的激素配方 ,建立了辣椒栽培品种的高效快速离体植株再生体系。外植体分化频率可达 10 0 % ,每外植体平均分化不定芽数10 .9个 ,出苗 8～ 10株。发现添加氨基酸混合物 (LY)对不定芽的诱导分化及生长有较强的促进作用。从子叶外植体培养起至再生苗出瓶需 5 0～ 5 5d ,最快的 1批仅 44d。

茄科作物抗青枯病水培法鉴定研究I.烟草、辣椒、番茄的水培条件及营养液配方筛选

对辣椒、番茄、烟草幼苗水培条件下营养液通气增氧时间和营养液配方进行了筛选试验。结果表明 ,在基本满足幼苗正常生长前提下 ,营养液每小时通气 1 5分钟可满足水中溶氧值的需要 ;筛选出的MS改良营养液更能增加参试植物的生长量 ,该营养液加入 1mg/L吲哚丁酸 (IBA)

人工合成柞蚕抗菌肽D基因转化沙田柚

采用根癌农杆菌介导法将柞蚕抗菌肽Ｄ基因导入沙田柚上胚轴等外植体，经卡那霉素筛选，获得了若干转基因植株对这些植株进行胭脂碱电泳检测、点印迹杂交、ＰＣＲ扩增和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析。

家蝇抗菌物质的诱导

针刺损伤诱导的家蝇三龄幼虫免疫血淋巴对动、植物病原菌有广谱的抗菌活性，同时，未经诱导的家蝇幼虫也具有抗菌活性。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析表明：外源诱导能增强原有抗菌物质的表达量，并能激活新的蛋白产生。

家蚕新微孢子虫MG_1、MG的研究 Ⅰ.形态、病原性和传染途径

家蚕微粒子病是由家蚕微粒子虫(Nosemabombycis Nageil)寄生家蚕而引起的一种传染性蚕病,除食下传染外,因其还能通过胚种传染给子代而被列为蚕种生产的检疫对象。

家蚕分离的微孢子虫Vairimorphasp.MG_4的研究

从家蚕分离到一种小型微孢子虫 (MG4 )。MG4 孢子大小为 2 72± 0 1 2 μm× 1 98±0 2 2 μm ;孢子具单核、双核 2种类型 ,极丝在 6～ 9圈之间 ;在家蚕体内以 2种不同的生活史发育 ,发育过程符合变态孢虫属Vairimorpha微孢子虫发育特征 ;对家蚕有弱的食下传染能力 ,主要寄生在后部中肠的气管丛 ;

转抗菌肽基因辣椒蛋白质检测技术研究

以转抗菌肽BD基因辣椒为材料 ,研究建立转基因食品中外源目的蛋白的检测技术 ,并建立对其忠实表达状况和安全性进行评价的模式。以柞蚕蛹免疫血淋巴作为标准 ,对照检测转抗菌肽辣椒目的蛋白表达的忠实性 ,采用针对转基因食品技术特点而预先设计的技术路线进行分析检测。研究和检测步骤为 :目的蛋白经粗提 ,达到初步纯化。再用两次CM Sepharose FF离子交换柱层析进行中度纯化。纯化产物通过测定抗菌活性、电泳及生物自显影、质谱进行鉴定。系统的检测结果表明 ,以抗菌肽目的基因构建的重组体在导入辣椒后 ,所表达的外源目的蛋白与对照标准蛋白的理化性质、抗菌活性、分子量一致 ,说明在该转基因辣椒中抗菌肽目的基因的表达是忠实的 ,与期望值相符。本研究建立了目的蛋白抗菌肽D的分离纯化及鉴定技术 ,建立了转基因辣椒外源目的蛋白的鉴定方法。

家蝇免疫血淋巴对几种动、植物病原菌的抑菌作用

针刺损伤诱导的家蝇三龄幼虫免疫血淋巴对几种动、植物病原菌具有抗菌活性。同时，未经诱导的家蝇幼虫血淋巴也具有抗菌活性，但外源诱导能衡量增强抗菌物质的活性，这表明家蝇免疫血淋巴中抗菌物质的表达可能受结构基因的调控。

抗菌肽AD基因的合成

设计并合成了一种新型抗菌肽基因，合成的抗菌肽（ｃｅｃｒｏｐｉｎ）ＡＤ基因全长１４０个碱基对，克隆于ｐＣＲＴＭ２１载体上，经ＤＮＡ序列分析证实，合成的ｃｅｃｒｏｐｉｎＡＤ基因的碱基序列与设计序列完全一致．

新型抗菌肽基因设计、合成及其在酵母中的表达(Ⅰ)——杂合抗菌肽基因的设计与合成

以化学合成并证实抗菌活性和抗菌谱都高于天然抗菌肽的杂合肽ＣｅｃｒｏｐｉｎＡ１－１１Ｄ１２－３７的氨基酸序列为基础，选用酵母高频使用密码子设计了一种新型抗菌肽基因，基因合成采用二次ＰＣＲ（聚合酶链式扩增）方法．设计和合成的基因全长１４０个碱基对，包括氨基酸编码序列、起始密码子、终止密码子和两端限制性内切酶ＢａｍＨＩ、ＥｃｏＲＩ、ＳａｌＩ识别顺序，合成的基因克隆于ＰＣＲＴＭ２．１载体上．经ＤＮＡ序列分析证实，合成基因碱基序列与设计序列完全一致．

柞蚕杀菌肽对桉树青枯病假单胞菌的杀菌作用

桉树、木麻黄青枯病是广东省林业主要病害，近年为害猖獗导致严重损失。本文报道柞蚕杀菌肽Ｄ对桉树、木麻黄青枯病假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ）的杀菌作用。以荧光黄染料隅联的杀菌肽作用于青枯病假单胞菌，用电镜及激光共焦扫描显微镜观察，发现杀菌肽能迅速地将菌体包围、作用于细胞膜，造成许多小孔并进入胞内，尔后损伤的小孔扩大形成喇叭口，内含物由此泄出胞外，最后菌体变成空囊而死亡。

22种化学物和紫外线对λDNA的遗传毒性分析

采用具有遗传毒性的受试化学物处理λＤＮＡ后，经体外包装，形成噬菌体颗粒，感染宿主菌ＬＥ３９２，噬菌斑发生率将显著降低。用这一方法对２２种化学物和紫外线测试的结果表明，丝裂霉素Ｃ等１３种受试化学物和紫外线对λＤＮＡ具有遗传毒性。根据用限制性内切酶消化和凝胶电泳分析的结果认为，丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）、甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）和９－氨基吖啶（９－ＡＡ）对λＤＮＡ的遗传毒作用机理，可能是它们分别造成了λＤＮＡ分子发生随机断裂、ＤＮＡ交联和在碱基热点上结合的移码突变。