一株鹅-鱼养殖环境下罗非鱼无乳链球菌的分离鉴定及药物敏感性分析

【目的】为确定鹅-鱼立体养殖环境下引发罗非鱼疾病的病原菌,通过分析病原菌的生长特性、致病性与药物敏感性,为罗非鱼病的深入研究与精准防控提供科学依据。【方法】从患病罗非鱼组织中分离病原菌,采用形态观察、生理生化鉴定、16S rRNA序列分析等方法鉴定菌株;绘制菌株生长曲线,分析温度、盐度及pH值对病原菌生长的影响;通过腹腔注射和拌料口服投喂方式人工回归感染健康罗非鱼,分析病原菌的致病性;采用药敏纸片法测定病原菌对11类共26种抗菌药物的敏感性。【结果】从患病罗非鱼的脑组织中分离纯化得到一株优势菌株,编号为SAYJN,经形态学观察、生理生化鉴定、16S rRNA序列分析及回归感染试验,鉴定此菌株为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae);SAYJN菌株的生长迟缓期为0~5 h,对数期为5~12 h;最适生长温度37℃、最适pH值7.0、最适盐度为5‰。腹腔注射和拌料口服投喂SAYJN菌株均可感染健康罗非鱼;水温为29(±1)℃时,腹腔注射SAYJN菌液对罗非鱼有较强的致病性,半致死浓度(LC_(50))为2.4×10^(8)CFU/mL;SAYJN菌株致病力与其浓度和水温密切相关。SAYJN菌株对甲氧苄啶、庆大霉素、新霉素等6种药物产生耐药性,对恩诺沙星、环丙沙星、阿米卡星等4种药物中度敏感,对多西环素、氟苯尼考、利福平等16种药物敏感。【结论】无乳链球菌SAYJN菌株是鹅-鱼立体养殖环境下罗非鱼疾病爆发的主要病原菌,该菌的致病力强弱与其浓度和水温密切相关。

嗜水气单胞菌感染暗纹东方鲀脾脏的蛋白质组学分析

为了解暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)受到病原菌感染后参与应答的主要蛋白的功能与调控作用,采用TMT标记、高效液相色谱(HPLC)分级技术以及基于质谱的定量蛋白质组学技术,分析了暗纹东方鲀感染嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)12 h后脾脏组织的蛋白表达水平,鉴定差异表达蛋白,并通过亚细胞定位、GO(Gene Oncology)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)对差异表达蛋白进行进一步分析.本次实验共鉴定到306个差异表达蛋白,其中120个上调表达蛋白,186个下调表达蛋白;利用平行反应检测实验(PRM)对4个(1个上调,3个下调)与免疫相关的差异蛋白进行验证,其结果与蛋白质测序结果一致;亚细胞定位结果显示:差异表达蛋白主要定位在细胞质、细胞核和胞外;GO分析发现:差异表达蛋白参与的主要生物进程有代谢过程、细胞进程和单一生物进程,主要的分子功能有结合、催化活性和机构分析活性;KEGG通路分析结果显示:差异表达蛋白主要参与了核糖体、视黄醇代谢、卟啉和叶绿素代谢、ECM受体相互作用、吞噬体、叶酸生物合成、药物代谢、酪氨酸代谢等通路.研究结果为进一步探究病原菌感染暗纹东方鲀的致病机理提供了一定的理论基础.