一种检测麻痹性贝毒的高效液相色谱法

提出了一种利用高效液相色谱法同时分析麻痹性贝毒GTX组分和NEO/dc STX/ STX组分的方法.本法仅使用了一种缓冲溶液作为流动相,在Inertsil C8-3色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5 μm）上,采用梯度改变乙腈在流动相中的比例和流速,一次进样可同时定性及定量待测试样中的上述全部毒素组分.该缓冲溶液为9.0 mmol/L磷酸铵缓冲溶液（pH=7.2）,含有2.8 mmol/L的庚烷磺酸钠.色谱分离过程首先以纯水相缓冲溶液进行等度洗脱,在16.5～19 min向流动相中梯度加入1.5%的乙腈,加速GTX3和GCX2的洗脱,以避免GTX2的色谱峰与乙腈的溶剂峰重叠,随后从19 min开始加大流动相中乙腈的比例为8.5%,以缩短边缘组分的保留时间.荧光检测器的激发波长和发射波长分别设为330 nm和390 nm.用本方法分析染毒的华贵栉孔扇贝和近江牡蛎,证实了本方法对PSP毒素具有良好的分析测定效果.

贝类体内麻痹性贝类毒素的提取方法研究

采用浓度系列为0.04、0.07、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.40、0.50、0.70、1.0 mol/L的HCl和HAc溶液作为提取液,分别取10 mL提取液与10 g栉孔扇贝性腺混合,在沸水浴中加热5 min提取麻痹性贝类毒素（PSP）;同时采用0.3 mol/L HAc和0.2 mol/L HCl,于冰水浴中进行超声波提取麻痹性贝类毒素5-30 min。提取完成后将混合物于4℃冷冻离心机内离心5 min（3500 r/min）,取上清液并以0.1 mol/L NaOH或5 mol/L HCl调整至pH为2.0-4.0。经超滤膜过滤后的提取液以高效液相色谱柱后衍生荧光检测法进行毒素分析,研究毒素组分间的转化关系和提取效率,并与超声波提取法进行了比较。结果表明,采用0.04-0.25 mol/L HCl和0.04-1.0 mol/L HAc从贝肉中提取PSP毒素,各毒素组分浓度差异不大,当HCl浓度大于0.25 mol/L时,N-磺酰氨甲酰基类毒素C1浓度急剧降低,HCl浓度大于0.5 mol/L时,N-磺酰氨甲酰基类毒素C2和GTX5浓度急剧降低,三者在酸度过大的情况下分解或转化为膝沟藻毒素-2（GTX2）,膝沟藻毒素-3（GTX3）和石房蛤毒素（STX）。在相同浓度酸的情况下,超声波提取液中C1毒素的浓度显著低于沸水浴提取法,但C2的浓度略高于沸水浴提取液。