非人灵长类动物精原干细胞研究进展

精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是维持精子发生的一类干细胞,由于与人亲缘关系的相近性,使得开展非人灵长类动物SSCs研究具有重要的理论意义和比较医学价值。本文综述了非人灵长类动物SSCs的生物学特性、鉴定方法、冷冻保存、移植及生精细胞缺失模型建立等方面的研究进展。

血小板HLA抗原修饰动物实验研究

目的探讨mPEG-BTC对HLA修饰的生物学意义及机理及其用于“通用”血小板开发的可行性。方法以HLA-A2型淋巴细胞为指示细胞,微量淋巴细胞毒试验研究mPEG修饰HLA的效果,检测修饰对血小板聚集、粘附、释放功能的影响,兔和猴动物试验观察修饰血小板的效果。结果mPEG-BTC修饰血小板HLA抗原成功,修饰血小板的粘附、聚集功能有所增强,分泌功能不受影响,实验动物输注修饰血小板后无不良反应,24h血小板升高指数及血小板回收率显示输注有效。结论MPEG-BTC可以修饰血小板HLA抗原,提示制备“通用”血小板可能可行。

人工驯养条件下食蟹猴B病毒抗体水平变化规律研究

目的研究人工驯养条件下食蟹猴B病毒抗体水平变化规律,便于有效控制自繁食蟹猴的BV感染率。方法随机选取409只对不同月龄自繁食蟹猴,采用BV ELISA法进行BV抗体监测。结果新生仔猴刚出生时均携带不同程度的BV抗体,但随着月龄的增加,BV抗体水平开始下降,至5月龄时BV抗体阳性率降至最低(12.3%),之后BV抗体水平逐渐升高。结论人工驯养条件下食蟹猴B病毒抗体水平呈由高到低再升高的趋势,5月龄时断奶可最大限度地获得BV抗体阴性猴。

分子标记在猕猴遗传多样性研究中的应用

分子标记目前已成为研究遗传多样性的主要工具,为此,简要综述了几种常用的分子标记(RFLPs、RAPD、mtDNA、微卫星DNA、SNPs)的检测方法及其在猕猴种群遗传多样性研究中的应用,为国内猕猴遗传多样性的研究提供参考。

猕猴SPF种群的建立及保持过程中B病毒抗体监测研究

目的 建立适合SPF猕猴种群建立与保持所需的B病毒抗体监测模式。方法 采用BVEIA及BVELISA等方法对本中心自繁自育仔猴从断奶开始进行BV感染情况跟踪。结果 从自繁自育猴中随机挑选 2 18只断奶食蟹猴 ,92只断奶猕猴 ,经过近两年反复筛选得到 2 5只SPF食蟹猴 ,9只SPF猕猴 ,此结果经美国BioReliance公司检测得到确认。结论 该模式能有效监测猕猴BV抗体变化 ,为本中心在国内建立猕猴SPF种群提供了有力的技术保障。

恒河猴主要组织相容性复合体(MHC)的多态性研究概述

恒河猴是应用最广泛的非人灵长类实验动物,其MHC基因是一个庞大的与免疫功能密切相关的基因群(也称为Mamu基因),在进化过程形成了Mamu基因不同的存在状态,使得不同个体的Mamu基因在数量和功能上有所差异,同时有些个体还产生了特异性的MHC基因,它的多态性和免疫反应的复杂性相对应。因此,恒河猴MHC多态性的研究,有助于生物科学的发展及指导以恒河猴为动物模型的各种实验。本文主要阐述了恒河猴Mamu基因的结构和功能,以及部分MHC等位基因与疾病的关系,并简要描述了中国恒河猴特异性的MHC基因。

猕猴、食蟹猴群中STLV-1病毒感染状况的研究

目的 摸清STLV I感染现状 ,从而有效地降低STLV 1在猕猴、食蟹猴群中的感染率。方法 采用STLV 1ELISA法对猕猴、食蟹猴血清进行抗体检测。结果 本中心送美国BioReliance公司的 2 4 5 5只出口猴血清 ,10 3份血清呈STLV Ⅰ抗体阳性 ,19份血清呈STLV I抗体可疑 ,其余血清均为STLV 1抗体阴性。结论 猕猴、食蟹猴群中STLV 1的平均感染率为 4 97% ,其中猕猴STLV 1感染率为 2 7% ,食蟹猴STLV 1感染率为 5 4 % ,是猕猴STLV 1感染率的 2倍 ;随着年龄的增长 ,猕猴 (食蟹猴 )STLV

应用微卫星标记对海南和广西恒河猴遗传多样性的研究

目的研究微卫星DNA多态性在海南和广西恒河猴遗传多样性中的应用。方法利用11个微卫星位点，对来自这两个地区的恒河猴进行了遗传检测，并通过POPGEN32软件计算各个微卫星座位的等位基因频率、有效等位基因数目（Ne）、多态信息含量（PIC）和遗传杂合度（H）。结果所选择的11个微卫星位点均存在高度的遗传多态性，H为0．6848-0．8785；PIC为0．5826-0．8345；Ne为3．0000-7．1553。以11个微卫星标记为测度，广西恒河猴的Ne、PIC和H的平均值均高于海南猴，分别为4．2583、0．7090、0．7706（广西恒河猴）和4．2054、0．7025、0．7656（海南恒河猴）。结论这种差别可能与地域来源有关。这些研究为微卫星标记分析恒河猴遗传多样性提供理论基础。

BV EIA、BV ELISA在检测食蟹猴BV抗体中的比较研究

本中心待出口美国、德国的 5 34份食蟹猴血清用国产BVEIA抗原检测片检测后送美国BioReilance公司进行检测。 5 34份血清中 ,11分为阳性 ,5份为可疑 ,5 18份为阴性。经美国复检 5 14为阴性 ,8份为可疑 ,12份呈阳性。两者的检测符合率达 95 9% ,说明BVEIA检测准确度已达到国际检测水平 ,可为国内猕猴生产单位控制BV检测质量提供有力的技术保证。

猕猴、食蟹猴群中STLV-1病毒感染状况研究初报

[目的]摸清STLV-1感染现状,从而有效地降低STLV-1在猕猴、食蟹猴群中的的感染率。[方法]采用STLV-1ELISA法对猕猴、食蟹猴血清进行抗体检测。结果本中心送美国BioReliance公司的2455只出口猴血清,103份血清呈STLV-1抗体阳性,19份血清呈STLV-1抗体可疑,其余血清均为STLV-1抗体阴性。[结论]猕猴、食蟹猴群中STLV-1的平均感染率为4.97%,其中猕猴STLV-1感染率为2.7%,食蟹猴STLV-1感染率为5.4%,是猕猴STLV-1感染率的2倍;随着年龄的增长,猕猴(食蟹猴)STLV-1的感染率也随之升高。

应用微卫星标记对海南和广西恒河猴遗传多样性的研究

本研究利用11个微卫星位点,对海南和广西恒河猴进行了遗传检测,并通过POPGEN32软件计算各个微卫星座位的等位基因频率、有效等位基因数目(Ne)、多态信息含量(PIC)和遗传杂合度(H)。结果表明,所选择的11个微卫星位点均存在高度的遗传多态性,H为0.6848~0.河河猴的Ne、PIC和H的平均值均高于海南猴,分别为4.2583、0.7090、0.7706和4.2054、0.7025、0.7656,这种差别可能与地域来源有关。这些研究为微卫星标记分析恒河猴遗传多样性提供理论基础。

猴舍自动控温动物栖息架装置的设计与应用

目的为了加强实验动物的福利建设,针对目前灵长类实验动物生产单位的猴舍冬季保暖方式的局限性,本文详细介绍了一种猴舍自动控温的动物栖息装置系统。方法本套系统采用的是逆卡诺循环原理,以空气能热泵热水器作为供热源,将热水通过热镀锌铁管输入每间猴房,既能直接散热,又能作为猴子攀爬跳跃的嬉戏架。结果因为散热管网的水温温度保持在40℃左右,天冷时猴群基本上白天都喜欢呆在供热管上玩耍,而晚上则都蹲挤在供热管上睡觉。猴群的体况在冬季都能保持和平时一致。与上一年度相比,猴群的发病率和死亡率有明显的降低;而出生率和繁殖存活率也有所提高。结论本套装置系统具有丰富灵长类实验动物活动的空间层次、恒温可调和自动控制的特点,经过实测该系统具有供暖效果好、工作效率高、环保、节约人力和物力的显著优势。

人工饲养恒河猴血液生化正常参考值的测定与分析

目的了解人工饲养条件下不同地域来源恒河猴血液学和血液生化值之间的差异和相互关系。方法应用全自动血液分析仪和生化分析仪测定恒河猴的血液学指标22项和血液生化指标19项,同时用统计学方法分析比较了相同性别和相同年龄阶段的海南和广西恒河猴的血液学和血液生化值的差异及相互关系。结果在所测定的血液生化值中,海南猴的血糖(GLU)值都明显高于同组的广西猴;成年的海南猴的肌酐(Cr)、白蛋白(ALB)、间接血清胆红素(IBIL)明显低于成年的广西猴。海南恒河猴的红细胞平均比容(MCV)值明显高于同组的广西猴;雌性组中,海南恒河猴的嗜酸细胞总数(EOS)、嗜酸细胞百分数(EOS%)、MCV、单核细胞百分数(MONO%)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)明显偏高;青幼年组中,海南恒河猴MCV、中性粒细胞总数(NEU)明显偏低;成年组中,海南恒河猴MCV、NEU明显偏高,而MONO的值明显偏低。结论除了年龄和性别为主要的影响因素外,地域来源的不同也会影响到恒河猴血液学和血液生化参考值的差异。

B病毒感染的预防和治疗方法

B病毒是一种P4级传染性病原,能引起人脑脊髓炎,其天然宿主为猕猴,B病毒侵染猕猴后无症状或症状轻微,但它却能致人死亡。人被B病毒感染途径主要包括被动物咬伤、抓伤或被B病毒污染过的材料感染,人被BV感染后,若及时采取预防和治疗措施能提高生存机率。本文综述BV预防和治疗方法。

实验猴麻疹预防和治疗方案初探

实验猴麻疹是造成断奶仔猴死亡的重要传染病之一,本文对该病的临床诊断、护理、预防和治疗方案进行了初步研究,并提出了行之有效的预防、护理及治疗措施。经临床实践证明,该方案对实验猴麻疹的治愈率可达90%以上,值得在国内实验猴生产及科研单位推广应用。

实验猴直肠脱的防治

目的探索实验猴直肠脱的理想治疗方案。方法根据本中心治疗成功的经验对实验猴直肠脱的治疗方案、术后护理及预防措施进行了详细论述。结果经临床实践,本防治方案对实验猴直肠脱的治愈率可达90%以上。结论本方案可以在生产中推广应用。

猴T淋巴细胞趋向性病毒1型双抗原夹心ELISA检测试剂盒的研制

目的研制灵敏度和特异性高的检测实验猴血清中T淋巴细胞趋向性病毒-1型(STLV-1型)抗体的双抗原夹心ELISA(dsELISA)检测试剂盒。方法采用经原核表达系统表达并纯化的人T淋巴细胞白血病病毒-1型(HTLV-1型)的Env蛋白作为包被用抗原,建立了检测STLV-1的dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂,确定了dsELISA诊断试剂盒的相关条件,并经敏感性、特异性和重复性试验考查该试剂盒质量。结果试剂盒特异性好,批内重复试验变异系数(CV)<7%,批间重复试验CV<10%。对200份猴血清进行随机检测,与国际公认的诊断试剂盒(美国BioReliance公司)的符合率为97%。结论本试剂盒可初步应用于临床上实验猴STLV-1型抗体的检测。

不同饲养条件对恒河猴脱毛恢复的影响

目的探讨不同饲养条件对恒河猴脱毛恢复的影响,找出影响恒河猴脱毛的因素。方法比较不同饲养环境下恒河猴脱毛的恢复状况。结果半开放式饲养条件下,恒河猴脱毛恢复状况明显好于大栏式饲养条件。结论半开放式饲养条件有利于恒河猴的脱毛恢复,改进饲养管理条件是改善恒河猴脱毛的重要途径。

猴免疫缺陷病毒(SIV)双抗原夹心ELISA诊断试剂盒的研制及应用

目的研制灵敏、特异的检测血清中猴免疫缺陷病毒(Simian Immunodeficiency Virus,SIV)的双抗原夹心ELISA(dsELISA)诊断试剂盒并进行初步应用。方法采用原核表达系统表达并纯化的人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)包膜蛋白(gp41)作为包被用抗原,建立dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂,研制ELISA诊断试剂盒,经敏感性、特异性和重复性试验考核试剂盒的质量,并与美国BIORELIANCE公司试剂盒进行比较,将结果经美国VRL验证,判断本试剂盒与美国BIORELIANCE公司试剂盒两者之间的符合率。结果该试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。4℃条件下能保存8个月,与其他血清无交叉反应,与美国BIORELIANCE公司试剂盒检测结果的符合率为96%。结论研制成功的实验猴SIV ELISA检测试剂盒可用于临床检测。