海洋微生物合成的抗肿瘤活性物质

本文就海洋微生物的生态分布以及近年来筛选自海洋微生物的抗肿瘤活性物质作一综述。已从海洋微生物中发现包括含氮类、内酯类、酮类、醌类、多糖类等多种抗肿瘤活性物质。产这些活性物质的有链霉菌属、小单孢菌属、钦氏菌属、交替单孢菌属、芽孢杆菌属、黄杆菌属、土壤杆菌属以及其它未定菌。对海洋微生物复杂多样生态特点的研究将有利于发现新型的抗肿瘤活性物质。

热研二号柱花草组织培养研究

研究结果表明，利用热研二号柱花草无菌苗的子叶为外植体，在M2培养基（MS基本成分＋0．8％琼脂＋3．0％蔗糖＋1．0mg／L萘乙酸＋4．0mg／L激动素，pH6．0）培养可诱导分化出愈伤组织和枝条。1月龄枝条在M7培养基（1／2MS基本成分＋0．8％琼脂＋1．0％蔗糖＋0．5mg／L萘乙酸＋0．05％活性炭，pH6．0）培养可诱导生根，生根率60％，获得了具有根、茎、叶的完整柱花草组培植株。25和50μg／ml浓度的卡那霉素均能完全抑制子叶形成愈伤组织和愈伤组织再分化。

一条卡瓦胡椒特异RAPD带转化成SCAR标记的研究

采用27份不同来源的胡椒属(Piper)材料和1份不同属的草胡椒(Peperomia pellucida)材料用引物OPQ-03扩增得到一条约400碱基对(bp)卡瓦胡椒特异片段。对该片段进行了克隆和序列分析,并根据序列分析结果将上述RAPD分子标记转化为重复性和特异性更好的SCAR(sequence characterized amplifiedre-gions,序列特征化扩增区)分子标记。本研究设计出了1对卡瓦胡椒特异SCAR引物P7.1(5′-GGT CAC CTC ACC GCA GCA GGA TGA ACG-3′)和P7.2(5′-GGT CAC CTC AAT GAC ATG GGA TGA ATC-3′),用这对特异引物对本次试验的28份材料进行PCR扩增,结果只有不同属的草胡椒材料无任何扩增,其它材料均扩增出了预期大小440bp的特异带。

柱花草核rDNA的ITS1序列分析

首次对42个柱花草种质的ITS1序列进行了比较分析。结果表明：42个炭疽病敏感与抗病柱花草种质的ITS1序列长度变化范围为302～314bp，G＋C含量的变化范围为44％～45％；在它们的ITS1序列中，有8个插入位点，13个缺失位点，68个变异位点；并在15个限制性酶切位点上也存在差异；种质间的遗传分化距离变异范围为0．006～0．053，平均值为0．021。呆用非加权成对平均数法（UPGMA）构建了聚类树系图，42个柱花草种质可分为两大类、15个小类。该结果较好地反映了这些种质的差异。

人类肿瘤坏死因子相关凋亡配体活性部位基因在毕赤酵母中的表达

探讨了人类肿瘤坏死因子相关凋亡配体 (TRAIL)生物活性部分在巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)中的分泌表达。由于TRAIL活性部位区第 149 15 0氨基酸含有一个Kex2位点 ,根据Pichiapastoris分泌表达的特点 ,对 149位氨基酸进行了改造 ,使其编码的氨基酸由Arg突变为Lys。这样使TRAIL在分泌的过程中不被Kex2切割 ,保证了片段的完整。序列分析正确后 ,将编码TRAIL的可溶区的基因片段插入到酵母表达载体pPIC9K中 ,使之位于α 因子信号肽下游 ,且与之同框 ,构建分泌型表达载体pPIC9K TRAIL。采用原生质体法将重组质粒转化Pichiapastoris菌株GS115 ,获基因工程菌株Pichiapastoris(pPIC9K TRAIL)。将工程菌用甲醇诱导培养 3～ 4d ,对摇瓶发酵的培养上清进行SDS PAGE、Westernblot分析和体外生物活性检测 ,结果发现发酵液中分子量约为 19kD和 38kD的蛋白质能被TRAIL多克隆抗体特异性识别 ,且具有在体外诱导肿瘤细胞凋亡的活性。通过薄层扫描分析显示目的蛋白最高可占可溶性总蛋白的 36 %。上述实验结果表明 ,在Pichiapastoris中表达的TRAIL能以寡聚体的形式存在并且具有生物学活性。

VP7/IFNα-2b融合蛋白防治轮状病毒腹泻的可行性

轮状病毒(RV)外壳蛋白VP7可用作抗原;通过构建植物表达载体,将该抗原基因导入植物细胞,最终在植物细胞中获得抗原蛋白的表达;这种蛋白能保持自然免疫特性,口服能诱发粘膜免疫反应,从而达到对RV的预防作用。干扰素作为一种广谱的抗病毒蛋白质,能对RV引起的肠炎起治疗作用。本文提出利用干扰素与轮状病毒表面抗原融合蛋白用于防治轮状病毒腹泻的构想,并对其可行性作了探讨。

海口地区耐药金黄色葡萄球菌检测及其流行病学分析

了解海口地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)在医院环境中的分布及其阳性率变化.