靶向人c-Cbl基因重组干扰慢病毒与过表达腺病毒载体的构建、鉴定以及病毒功效研究

目的:构建可调控c-Cbl基因表达的重组慢病毒与腺病毒并评估其功效。方法:应用基因重组技术,分别构建靶向人c-Cbl基因的干扰慢病毒和过表达腺病毒。采用定量PCR和免疫印迹法检测病毒感染后白血病细胞(HL60、THP1)c-Cbl基因表达与转录本的变化。结果:3个靶向人c-Cbl基因的重组干扰慢病毒载体经测序验证构建成功,包装的病毒滴度均大于1×10^(8)TU/ml,其中shRNA-2号慢病毒干扰效率最高,白血病细胞感染后c-Cbl基因的表达约下调95%,CBL蛋白的表达约下调60%;同时,靶向人c-Cbl基因的重组过表达腺病毒载体也经测序验证构建成功,包装的病毒滴度大于1×10^(9)TU/ml,细胞感染腺病毒后,c-Cbl基因表达可瞬时上调约10倍,CBL蛋白表达约上调1.5倍。结论:重组干扰慢病毒和过表达腺病毒均可高效感染白血病细胞,并能分别下调和上调c-Cbl基因与CBL蛋白的表达,为后续研究肿瘤细胞内c-Cbl基因功能打下前期基础。

模仿IgG4相关淋巴结病的多中心型Castleman病:易误诊病例的鉴别诊断及文献复习

目的通过学习1例少见的组织学特征与IgG4相关性淋巴结病类似的浆细胞型特发性多中心型Castleman病(PC-iMCD),总结两种易误诊疾病的鉴别要点,提高病理诊断水平。方法回顾性分析1例PC-iMCD患者临床资料,常规苏木素-伊红(HE)染色分析淋巴结组织结构及细胞形态,免疫组织化学染色及原位杂交分析免疫表型及EB病毒(EBV)感染状态,并结合文献分析讨论其与IgG4相关淋巴结病的鉴别诊断。结果48岁女性患者,临床表现为口干、多饮、皮肤瘙痒伴全身多处淋巴结肿大。实验室检查血清IgG、IgA、IgM及IgE水平均升高,血清IgG4显著升高(14.7 g/L),白介素-6(IL-6)异常升高(150.84 pg/mL)。病理检查显示淋巴结生发中心萎缩,套区淋巴细胞呈“洋葱皮”样围绕生发中心排列,滤泡间区扩张,其内见大量成熟的浆细胞呈片状浸润,灶区见含铁血黄素沉积及血管增生;免疫组化染色显示IgG4阳性浆细胞数大于100/高倍视野,IgG4阳性细胞/IgG阳性细胞比值>40%,Kappa及Lambda轻链呈非限制性表达;EB病毒编码RNA原位杂交(EBER)阴性。结论部分PC-iMCD与IgG4相关淋巴结病具有相似的组织病理学特征,单纯根据组织学及免疫表型难以将两者鉴别,正确诊断需结合IgG4相关病变诊断标准、排除性诊断标准、临床表现及实验室检查综合判断。

母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤临床病理特征分析

目的学习母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤(BPDCN)的临床病理及免疫表型特征,总结该少见肿瘤的病理诊断经验。方法回顾分析2例BPDCN患者临床资料,通过苏木素-伊红(HE)染色分析肿瘤组织及细胞形态,通过免疫组织化学染色分析肿瘤免疫表型,通过流式细胞学检测骨髓有无肿瘤侵犯,并结合文献分析。结果本报道中1例为97岁女性,临床以皮肤瘀斑结节为首发症状,肿瘤细胞真皮内弥漫浸润,不侵犯表皮,细胞中等大小,核形不规则,核仁不明显。另1例为69岁男性,临床以淋巴结肿大为首发症状,淋巴结结构完全破坏,肿瘤细胞弥漫浸润,细胞呈中等大小的母细胞样,核仁明显。2例免疫表型均表达CD123、CD4、CD56、TDT,不表达B系、T系淋巴细胞及髓系标志物,肿瘤均累及骨髓。结论BPDCN是一种罕见的淋巴造血肿瘤,临床常以皮肤病变或淋巴结肿大为首发症状,临床过程具高度侵袭性,通常伴有骨髓侵犯。该肿瘤需与具有母细胞形态的淋巴系肿瘤和白血病相鉴别,诊断需结合临床信息、HE形态及免疫组化结果综合判断。

骨科祛痰逐瘀方经MAPK/ERK通路诱导血管内皮细胞迁移与血管管腔形成

目的探究祛痰逐瘀方(Qutan Zhuyu Decoction,QZD)经MAPK/ERK通路诱导血管内皮细胞迁徙与血管管腔形成的作用,明确QZD在骨血管化重建中的机制。方法对大鼠进行QZD灌胃,并采集和分离获得含药血清;培养SVEC和10T1/2细胞,分别将二者分为空白组、bFGF组(阳性对照组)、QZD中药组(实验组),其中实验组为将QZD含药血清加入细胞培养基中。对干预后的SVEC进行迁徙实验,另外对SVEC进行管腔形成实验,对10T1/2进行免疫荧光染色观察中药促管腔形成效果,运用Western blot检测ERK1/2、p38等蛋白表达,研究QZD对SVEC的作用机制。结果 (1)QZD含药血清较空白组促进SVEC细胞的迁徙(P<0.05);(2)QZD含药血清较空白组可促进SVEC血管管腔形成,包括管腔面积(P<0.05)和管腔腔周长度(P<0.05);(3)荧光染色实验提示,QZD含药血清较空白组促进10T1/2细胞呈规律性聚集,并形成管腔状状态;(4)Western blot实验提示,QZD含药血清可促进SVEC中ERK1/2和p38的磷酸化(P<0.05)。结论 QZD经MARK/ERK通路调控和诱导血管内皮细胞的迁徙和血管官腔的形成,提示其可运用于骨血管化重建中。

腹腔镜辅助右半结肠癌根治术与传统开腹术对免疫功能及疗效的临床观察

目的探讨腹腔镜手术与传统开腹手术对右半结肠癌患者免疫功能指标及临床疗效的影响。方法选取80例右半结肠癌患者,随机分成两组,各40例分别行腹腔镜手术及传统开腹手术,分别比较两组患者手术前后免疫功能指标及相关临床疗效的差异。结果腹腔镜组及开腹组术后免疫指标CD3^+、CD4^+、CD8^+均出现不同程度下降,但腹腔镜组免疫指标CD3^+、CD4^+均优于开腹组(P<0.05);腹腔镜组术中出血量、术后胃肠排气功能恢复时间、住院时间均优于开腹组(P<0.05);两组手术时间及淋巴结清扫个数方面无显著差异(P>0.05)。结论腹腔镜手术治疗右半结肠癌不仅对患者免疫功能损害较低,还较开腹术具有术中出血量少、术后恢复快等优点,值得临床推广。

护士在抗击新型冠状病毒肺炎疫情期间心理压力及其影响因素的研究

目的调查护士在抗击新型冠状病毒肺炎疫情期间的心理压力及其影响因素。方法采用一般资料调查表、心理压力量表、社会支持量表、新型冠状病毒肺炎相关知识调查问卷,以便利抽样的方法、利用问卷星调查278名护士。结果本研究结果显示护士心理压力平均得分为(2.54±2.2)分,88.8%的患者处于低等水平;各个分量表中恐惧得分为最高,其次为抑郁、神经衰弱、强迫焦虑,疑病最低。护士心理压力与新冠肺炎知识、社会支持、文化水平等呈负相关,与科室呈正相关(P<0.05)。结论护理管理者在临床工作中要加强新冠肺炎防控知识、方法与技能的培训,充分利用社会支持,使护士能感受到来自家庭和同事的温暖,做好一线科室护士轮换休整到位,减轻护士的心理压力。

血管周围间隙扩散张量成像指数在评估帕金森病患者脑类淋巴系统功能中的价值

目的:探讨血管周围间隙扩散张量成像(DTI-ALPS)指数在评价帕金森病(PD)患者脑类淋巴系统功能中的价值。方法:自帕金森病进展标记物研究项目(PPMI)基线数据库中选取诊断为PD的153例患者及59例健康志愿者(HC组)纳入本研究,212例被试的临床资料(包括多种认知和运动测试量表评分和脑脊液检查资料)和MRI资料完整。本研究中分析了以下认知和运动测试量表的评估结果:霍普金斯语言学习测试(HVLT;其中包括即刻/总回忆测试、辨别记忆测试和维持记忆测试)、蒙特利尔认知功能评估量表(MoCA)、状态-特质焦虑问卷(STAI)、老年抑郁量表(GDS)、宾夕法尼亚大学嗅觉识别测试(UPSIT)、运动障碍协会统一帕金森病分级量表(MDS-UPDRS)第1~3部分及全部(total)及H-Y分级量表(Hoehn and Yahr stages)。脑脊液生物标记物包括Aβ42、a-syn、t-tau、p-tau、t-tau/Aβ42和p-tau/Aβ42。所有MR图像在Siemens 3.0T磁共振仪上完成采集。利用FSL及Image-J软件在每例被试的各向异性分数(FA)图上,分别在左侧大脑半球侧脑室体部水平的投射纤维区域、联合纤维区域及皮层下纤维区域勾画绘直径5.0 mm的球形感兴趣区,测量每种纤维在X、Y和Z轴方向的扩散率,并根据公式计算DTI-ALPS指数。比较PD组与HC组之间ALPS指数值的差异,并分析PD患者ALPS指数与临床指标及脑脊液生物标记物之间的相关性。结果:与HC组比较,PD组DTI-ALPS指数值显著减低(Z=3.769,P<0.001)。PD组ALPS指数与年龄呈负相关(r=-0.256,P=0.001);在控制年龄、性别及受教育年限三个因素后,PD组ALPS指数与MDS-URDRS-Ⅲ评分呈负相关(r=-0.245,P=0.002),与脑脊液p-tau浓度呈负相关(r=-0.357,P<0.001)。结论:DTI-APLS指数可用于评估PD患者类淋巴系统功能受损情况,在探索PD相关发病机制方面具有较好的应用前景。

入院准备中心制度在乳腺外科住院预约中的应用效果

目的探讨入院准备中心制度在我院乳腺外科住院预约统筹管理的实践情况。方法 2017年1月—12月广州市第一人民医院入院准备中心对乳腺外科30张床位实施病床集中预约管理,依据患者病情进行预约,合理安排患者入院。结果 2017年1至12月我院乳腺外科共预约入院1225人/次,成功办理预入院1096人/次,约占乳腺外科总入院人数的77.85%。预入院进行手术患者415人/次,其中3日内手术患者为285人/次,预入院三日内手术率为68.67%。结论预入院制度对乳腺外科病床进行集中预约管理能有效保证床位充分使用,为患者提供方便、有效的医疗服务,值得基层医院推广。

营养指标与乳腺癌患者临床结局的关系

目的探索营养指标与乳腺癌患者临床结局之间的关系。方法随访队列为2000年1月至2013年12月在广州市第一人民医院就诊,病理诊断为乳腺恶性肿瘤的患者1 319例。使用COX生存分析和Kaplan-Meier生存曲线,分析营养指标与乳腺癌患者术后2年无瘤生存之间的关联。结果经COX生存分析发现,白蛋白(HR=0.52,95%CI:0.36~0.76,P=0.001)、血红蛋白(HR=0.47,95%CI:0.24~0.91,P=0.026)、单核细胞计数(HR=0.61,95%CI:0.39~0.94,P=0.025)和单核细胞比例(HR=0.59,95%CI:0.39~0.89,P=0.012)是乳腺癌患者术后2年无瘤生存的保护因素。结论良好的营养状况是乳腺癌患者术后2年无瘤生存的保护性因素;术前评估患者营养状况并有针对性地给予干预,有助于改善乳腺癌患者的临床结局。

Reversine对高龄大鼠及肝纤维化大鼠的影响

目的探讨高龄大鼠与低龄大鼠肝脏衰老相关蛋白的表达差异及分析Reversine对不同年龄大鼠及肝纤维化大鼠的影响。方法年龄差异:将不同年龄F344大鼠分成低龄组、高龄组;分别给予药物干预,腹腔注射100μg/(kg·周)Reversine,分为低龄药物组和高龄药物组共4组。肝纤维化治疗:另取20只SD大鼠随机平均分为对照组、肝纤维化组、低浓度组(Reversine 50μg/kg)、高浓度组(Reversine 200μg/kg)。通过检测大鼠肝功能、病理染色观察大鼠肝脏形态以及免疫组化检测p16 INK4a、cyclin D1、TGF-β1、SMP30蛋白的表达。结果年龄差异各组F344大鼠的肝功能、肝脏组织形态及TGF-β1蛋白的表达无差异。实验结果提示SMP30蛋白的表达与年龄呈负相关,p16 INK4a的表达与年龄呈正相关。Reversine可下调高龄肝脏中p16 INK4a蛋白,并减少大鼠肝脏cyclin D1蛋白的表达。肝纤维化治疗结果提示Reversine可以通过降低肝纤维化大鼠肝脏α-SMA、TGF-β1蛋白的表达,减少胶原纤维的形成,达到减少肝纤维化程度的效果。结论p16 INK4a、SMP30蛋白可作为区分高龄肝脏与低龄肝脏的标记蛋白。Reversine可以通过下调高龄肝脏p16 INK4a蛋白,减少大鼠肝脏cyclin D1蛋白的表达。Reversine可以通过降低肝纤维化大鼠肝脏α-SMA、TGF-β1蛋白的表达,减少胶原纤维的形成,达到减少肝纤维化程度的效果,且不影响正常肝脏的功能,有可能开发成为延缓器官衰老的药物。

高密度脂蛋白亚型及炎症因子在脓毒症与创伤患者中的水平比较

脓毒症是重症监护病房(ICU)中患者死亡的重要原因[1,2],脓毒症产生的原因很复杂,包括促炎和抗炎因子的早期激活,激素和代谢反应的失常以及凝血的激活等[3]。高密度脂蛋白(HDL)能够将胆固醇从周围组织转运回肝脏,从而保护心血管;同时其也在先天性和适应性免疫反应中起重要作用。HDL具有生物多样性,包括抗炎、抗凋亡或抗氧化功能,因此实验研究已在脓毒性休克动物模型中测试了重构的HDL和载脂蛋白AⅠ(Apo A-I)模拟肽灌注的效果[4]。其中一些研究已经证明了这些HDL模拟物能够降低死亡率,并且减轻炎症状态[5]。

Reversine对小鼠乳腺癌4T1细胞增殖和凋亡的调控及相关作用机制的研究

目的研究reversine对小鼠乳腺癌4T1细胞的增殖和凋亡的影响,并探讨其相关作用机制。方法体外培养小鼠乳腺癌4T1细胞株,分别用不同浓度的reversine干预4T1细胞24、48 h,应用CCK-8法检测reversine对4T1细胞株的增殖抑制情况,计算半数抑制浓度IC50值;流式细胞术检测reversine对4T1细胞凋亡情况的影响;Western blot法检测细胞中Caspase-3、bax、bcl-2、TGF-β1、TIMP1和MMP9蛋白的表达情况。结果 CCK-8结果显示reversine可以抑制小鼠乳腺癌4T1细胞的增殖,并呈现时间剂量依赖关系。流式细胞检测结果显示低浓度组(10μg/m L)、中浓度组(25μg/m L)和高浓度组(50μg/m L)的细胞总凋亡率分别为(4.65±1.04)%,(11.68±0.69)%和(15.11±2.09)%;Western blot结果显示,应用reversine干预后,4T1细胞活化的Caspase-3表达增加(P<0.001),bax与bcl-2蛋白表达下降(P<0.001),bax/bcl-2比值增大(P<0.001),TGF-β1表达无差异(P>0.05),TIMP1、MMP9和Aurora B蛋白表达下调(P<0.01)。结论 Re-versine可以抑制小鼠乳腺癌4T1细胞的增殖,诱导细胞凋亡,reversine可以通过TIMP1/MMP9通路抑制4T1细胞的增殖。

Reversine对肝星状细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的研究Reversine对肝星状细胞增殖、凋亡及相关蛋白表达的影响,进一步探讨Reversine防治肝纤维化的机制。方法体外培养HSCs细胞,分别给予不同浓度Reversine(5、10、20、40μg/mL)处理24 h后,采用CCK-8法检测Reversine对HSCs细胞增殖抑制率;流式细胞术检测Reversine对HSCs凋亡的影响;细胞免疫荧光法检测TGF-β1、caspase-3、Aurora B、SMAD2/3、Desmin、p16INK4a、SMP-30、p66SHC等蛋白的表达情况。结果不同浓度Reversine(5、10、20、40μg/mL)明显抑制HSCs的增殖(38.03±9.05、44.97±5.85、55.33±2.40、64.19±3.66,F=27.356,P=0.000),且促进HSCs凋亡(13.14±1.87、15.85±1.00、20.57±0.90、21.24±1.07,F=298.75,P=0.000)。荧光显微镜显示Reversine作用HSCs后出现典型的细胞凋亡形态学改变,细胞体积变小,细胞质浓缩,细胞核固缩、碎裂,出现多倍体等,荧光定性检测发现TGF-β_1、caspase-3、Aurora B、SMAD2/3等蛋白有表达,Desmin、p16INK4a、SMP-30、p66SHC等蛋白未见表达。结论 Reversine能抑制肝星状细胞的增殖,诱导其凋亡,并且影响肝星状细胞TGF-β_1、caspase-3、Aurora B、SMAD2/3等蛋白质的表达。

胰腺实性假乳头状肿瘤病例报告并文献复习

目的报道1例中年女性胰腺实性假乳头状肿瘤病例,并通过文献回顾和复习,提高临床医生对此类罕见病的认识,减少该疾病的误诊、漏诊。方法回顾性分析1例中年女性胰腺实性假乳头状肿瘤的诊治经过,结合以往的文献报道,总结该疾病的临床表现、诊治方法。结果回顾文献显示:胰腺实性假乳头状肿瘤比较罕见,好发于年轻女性,属于低度恶性肿瘤。本例患者38岁女性,因腹痛入院。术后病理证实为胰腺实性假乳头状肿瘤。随访1年,未见明显复发和转移征象。结论胰腺实性假乳头状肿瘤临床表现无特异性,诊断主要依靠影像学检查和组织病理学结果。手术切除是胰腺实性假乳头状肿瘤首选治疗手段。

祛痰逐瘀方经miR-628/Pten/Runx2调控酒精性股骨头坏死骨稳态代谢机制研究

目的探究祛痰逐瘀方(QZD)经特异性miRNA调控酒精性股骨头坏死(AIONFH)内骨稳态代谢机制的作用及对坏死骨修复的影响。方法采集34例AIONFH患者(AIONFH组)和34例相对健康组的血清样本,应用miRCURY LNA^(TM) Universal RT microRNA PCR Panels提取获得高差异表达miRNA,并进行生物信息学分析;采集服用QZD的AIONFH患者(中药治疗组,n=8)、未服用药物患者及相对健康人群血清样本进行RT-qPCR验证,获得特异性miRNA表达。SPF级雄性大鼠随机均分为正常对照组(正常组)、酒精组(模型组)、酒精+QZD组(实验组);分别对股骨近端松质骨进行Micro-CT检查;组织进行HE染色、甲苯蓝染色和Trap染色检测;RT-qPCR测定特异性miRNA、Runx2、Pten表达。结果 (1)microRNA PCR Panels结果提示miR-628在AIONFH组中低表达,并经预测与骨稳态靶基因Pten和Runx2相关;(2)经QZD干预后中药治疗组血清内miR-628较未干预的AIONFH组升高;(3)经HE染色中,实验组可见骨小梁密度较模型组高、骨小梁形态改善;甲苯胺蓝染色提示,实验组形成的成骨细胞密度均显著高于模型组;Trap染色提示与模型组相比,QZD对破骨细胞分化有抑制作用;(4)在Micro-CT中实验组与模型组相比,前者BV/TV、Tb.Th、Tb/N等值升高(P<0.05);(5)RT-qPCR检测提示实验组miR-628、Pten和Runx2表达量均较模型组升高。结论 QZD经特异性miR-628/Pten/Runx2调控AIONFH内骨稳态代谢机制的作用,从而促进坏死修复。

急性结石性胆囊炎早期腹腔镜手术的可行性及中转开腹因素分析

目的探讨《东京指南2018》指导下急性结石性胆囊炎7天内早期行腹腔镜胆囊切除术的可行性及中转开腹因素,评估其对我国是否具有临床指导价值。方法回顾性分析202例急性结石性胆囊炎患者资料,根据手术时机不同分为早期手术组(≤7天)与延期手术组(>7天),对比两组的疗效;对早期手术的患者进行亚组分析,比较3天组与7天组的疗效;对中转开腹的危险因素进行统计学分析。结果早期手术组手术时间、中转开腹率、总并发症发生率和术后死亡率与延期手术组无差异(P>0.05),但总住院时间低于延期手术组(P<0.05)。3天组手术时间、中转开腹率、总并发症发生率和总住院时间与7天组比较无差异(P>0.05)。胆囊壁增厚和上腹部手术史是腹腔镜胆囊切除术中转开腹的独立危险因素。结论《东京指南2018》指导下急性结石性胆囊炎7天内早期行腹腔镜胆囊切除术是安全可行的,该指南实用性和指导性较强,值得我国临床推广应用。胆囊壁增厚和上腹部手术史是急性结石性胆囊炎行腹腔镜胆囊切除术中转开腹的独立危险因素,术前应综合准确评估,尽可能降低中转开腹率。

小剂量右美托咪定改善臂丛神经阻滞效果的随机对照研究

目的观察右美托咪定作为佐剂对罗哌卡因在锁骨上入路臂丛神经阻滞效果的影响。方法将55例上肢择期手术的受试者随机分为右美组和对照组。右美组:30μg右美托咪定(0.3 mL)+0.5%罗哌卡因,对照组:生理盐水(0.3 mL)+0.5%罗哌卡因。在臂丛神经阻滞操作后,按步骤评估和记录臂丛感觉、运动阻滞程度和起效时间。在术中定期监测和记录生命体征、不良事件的发生。手术后评估和记录术毕24小时生命体征、术后镇痛时间、臂丛神经感觉、运动阻滞的持续时间、术后恶心呕吐评分、补救镇痛药物用量和不良事件等数据。结果在臂丛神经的感觉和运动起效时间、感觉和运动阻滞持续时间、术后镇痛时间方面,右美组长于对照组,存在统计学差异(P<0.05)。两组间在术后生命体征变化、补救镇痛药物用量、术后恶心呕吐评分、不良事件等数据的比较,未见明显统计学差异(P>0.05)。结论右美托咪定(30μg)作为佐剂能加快罗哌卡因在锁骨上入路对臂丛神经阻滞的起效时间,增加其术后镇痛时间和对臂丛神经的感觉、运动阻滞时间,同时较少影响患者生命体征,具备一定的有效性和临床安全性。

不同麻醉方式对老年患者膝关节置换术后早期认知功能障碍的影响

目的观察不同麻醉方式对老年患者膝关节置换手术早期认知功能障碍的影响。方法择期行单侧膝关节置换术的老年患者120例,随机数字法分为:腰—坐骨神经阻滞联合喉罩全麻组(LL)、腰硬联合麻醉组(SE)和气管插管全身麻醉组(GA)三组,各组40例。LL组:使用0.5%罗哌卡因行腰丛和坐骨神经阻滞,静注丙泊酚1~2 mg/kg后,置入喉罩,术中持续静脉泵注丙泊酚,保留自主呼吸;SE组:使用罗哌卡因和利多卡因,实施常规腰硬联合麻醉;GA组:采用咪达唑仑、芬太尼、瑞芬太尼、丙泊酚、顺式阿曲库铵诱导与维持。釆用简易精神状态检查量表(MMSE)分别于术前1d(T 0)、术后1d(T 1)、3d(T 2)、7d(T 3),对患者进行认知功能评分及检测血浆皮质醇的水平。记录患者术前一般情况、手术时间、液体出入量、术中麻醉药的用量、术中、术后24小时内不良反应发生情况。结果与T 0时相比,GA组T 1-3时、SE组与LL组T 1-2时MMSE评分降低(P<0.05);三组患者T 1-3时,POCD的发生率无差异(P>0.05),与T 1时相比,SE组和GA组T 2-3时POCD的发生率降低(P<0.05);三组患者T 0-3时,CORT浓度无差异(P>0.05),与T 0时相比,三组T 1-3时的CORT浓度升高(P<0.05);与T 0时相比,POCD组与非POCD组T 1-3时血浆CORT水平升高(P<0.05),POCD组T 1-3时血浆CORT水平比非POCD组高(P<0.05);GA组的唤醒睁眼时间和拔管时间比LL组长(P<0.05),GA组丙泊酚用量比LL组多(P<0.05);三组患者的一般情况、手术时间、液体出入量、术后并发症无差异(P>0.05)。结论三种麻醉方式均可能导致老年患者膝关节置换术后早期认知功能障碍,但无差异;相比于腰硬联合麻醉和腰丛—坐骨神经阻滞联合喉罩麻醉,气管插管全身麻醉对手术患者认知功能的影响更为持久,临床上应给予足够重视;POCD组术后血浆CORT水平比非POCD组高,提示应激反应可能是早期POCD的发生机制之一。

天麻、法半夏水提物对ox-LDL诱导HUVECs损伤的影响

目的观察天麻、法半夏水提物对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响。方法体外培养HUVECs,随机数字表法分为对照组、模型组(80μg/mL ox-LDL)、天麻组(5mg/mL)、法半夏组(10mg/mL),均培养48h。流式细胞仪检测HUVECs细胞凋亡率、细胞增殖指数,Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)表达,实时荧光定量PCR法检测半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)RNA表达。结果与对照组比较,模型组HUVECs细胞凋亡率升高[(4.32±0.11)%比(0.34±0.01)%,P<0.05],HUVECs细胞增殖指数下降[(43.40±4.04)%比(63.76±2.71)%,P<0.05],VEGF表达下调[(0.09±0.03)比(0.85±0.06),P<0.05],VEGFR-2表达下调[(0.13±0.03)比(0.81±0.05),P<0.05],Caspase-3 RNA表达上调[(1.67±0.02)比(0.79±0.01),P<0.05],Caspase-9 RNA表达上调[(2.29±0.02)比(0.71±0.01),P<0.05];与模型组比较,天麻组、法半夏组HUVECs细胞凋亡率下降[(2.51±0.45)%、(2.12±0.13)%比(4.32±0.11)%,P均<0.05],HUVECs细胞增殖指数升高[(50.83±2.46)%、(51.41±2.86)%比(43.40±4.04)%,P均<0.05],VEGF表达上调[(0.60±0.04)、(0.30±0.03)比(0.09±0.03),P均<0.05],VEGFR-2表达上调[(0.55±0.05)、(0.56±0.03)比(0.13±0.03),P均<0.05],Caspase-3 RNA表达下调[(1.33±0.03)、(1.16±0.02)比(1.67±0.02),P均<0.05],Caspase-9 RNA表达下调[(1.86±0.09)、(1.82±0.02)比(2.29±0.02),P均<0.05];与天麻组比较,法半夏组HUVECs细胞凋亡率下降[(2.12±0.13)%比(2.51±0.45)%,P<0.05],HUVECs细胞增殖指数差异无统计学意义[(51.41±2.86)%比(50.83±2.46)%,P>0.05)],VEGF表达下调[(0.30±0.03)比(0.60±0.04),P<0.05],VEGFR-2表达差异无统计学意义[(0.56±0.03)比(0.55±0.05),P>0.05],Caspase-3 RNA表达下调[(1.16±0.02)比(1.33±0.03),P<0.05],Caspase-9 RNA表达差异无统计学意义[(1.82±0.02)比(1.86±0.09),P>0.05]。结论天麻和法半夏水提物均能抑制ox-LDL诱导的HUVECs损伤,其机制可能与上调VEGF和VEGFR-2表达、下调Caspase-3 RNA和Caspase-9 RNA表达有关。

逆转素对肝星状细胞炎症反应的影响及机制

目的探讨逆转素(Reversine)对肝星状细胞炎症反应的影响及机制。方法将体外培养的肝星状细胞随机分为五组,对照组常规培养,低浓度Reversine组加入终浓度为5μg/m L的Reversine培养,高浓度Reversine组加入终浓度为10μg/m L的Reversine培养,TNF-α组加入终浓度为0.05μg/m L的TNF-α培养,rh TNFR组加入终浓度为10μg/m L的Reversine及终浓度为0.5 mg/m L的重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白(rh TNFR,TNF-α抑制剂)培养。培养24 h,倒置显微镜下观察各组细胞形态改变,采用qRT-PCR法检测细胞中TNF-α、核转录因子κB p65(RELA)、IL-6、IL-17A mRNA表达。结果对照组细胞生长状态良好;其他四组细胞均发生形态改变,细胞间连接减少,出现皱缩、变圆、脱落等情况;上述改变程度,高浓度Reversine组、TNF-α组>低浓度Reversine组>rh TNFR组。与对照组比较,高浓度Reversine组IL-17A相对表达量降低,IL-6相对表达量升高;低浓度组RELA mRNA相对表达量增加;组间比较P均<0.05。与高浓度Reversine组比较,TNF-α组RELA、IL-17A相对表达量增加,IL-6相对表达量降低;rh TNFR组IL-6相对表达量降低,IL-17A相对表达量增加;低浓度组IL-6相对表达量降低,RELA、IL-17A相对表达量增加;组间比较P均<0.05。结论 Reversine可抑制肝星状细胞炎症反应,抑制IL-17A表达、促进IL-6表达可能是其作用机制。