放射联合Sorafenib对肝癌细胞的不同时效作用

【目的】在人肝癌细胞中观察放射联合Sorafenib对细胞生长的作用,并探讨其作用途径。【方法】选择人肝癌SMMC-7721和BEL-7402细胞株,分为单纯放射组(IR)、放射前30min联合Sorafenib组(IR+S-pre)和放射24h后联合Sorafenib组(IR+S-post)。细胞克隆形成实验检测照射后细胞克隆形成率,绘制细胞存活曲线并计算放射增敏比;细胞增殖抑制实验检测6Gy照射后第1、2、3、4、5、6d细胞增殖情况;免疫荧光染色观察照射后DNA损伤阳性细胞比例;流式细胞仪检测放射后细胞凋亡比例。【结果】细胞克隆形成实验结果显示,IR+S-pre放射后细胞克隆形成增加,放射增敏比在SMMC-7721和BEL-7402细胞中分别为0.78和0.88;而IR+S-post放射后细胞克隆形成减少,放射增敏比在SMMC-7721和BEL-7402细胞中分别为1.43和1.23。细胞增殖抑制实验显示IR+S-pre与IR放射后细胞增殖抑制率相似,而IR+S-post放射后细胞增殖抑制率明显提高。Sorafenib在SMMC-7721与BEL-7402中均有诱导细胞凋亡作用。IR+S-pre在放射后24h细胞凋亡比例明显增高[IRvsIR+S-pre:(6.1±1.0)%vs(18.3±2.0)%(SMMC-7721),(8.2±2.1)%vs(17.0±2.4)%(BEL-7402),P<0.001]。IR+S-post在放射后48h细胞凋亡比例明显增高,[IRvsIR+S-post分为(6.9±2.0)%vs(15.9±1.8)%(SMCC-7721),(8.0±1.5)%vs(14.2±2.5)%(BEL-7402),P<0.05]。放射后30min,IR+S-pre与IR的DNA受损阳性细胞比例无明显差异。放射后6hIR+S-pre的DNA受损阳性细胞残留比例明显下降[IRvsIR+S-pre:(59.9±2.4)%vs(23.8±2.9)%(SMMC-7721),(46.4±3.8)%vs(25.0±3.0)%(BEL-7402),P<0.001]。【结论】放射联合Sorafenib对肝癌细胞作用具有明显时效性,放射24h后联合Sorafenib增加放射引起的细胞克隆性生长抑制和增殖抑制,而放射前30min联合Sorafenib作用相反。