人血清类粘蛋白的研究进展

随着法医血清学和人类遗传学研究的不断深入,一些新的人类血液遗传标记已被国外学者报道。人类血清类粘蛋白(Orosomucoid,简称ORM)就是其中之一。由于ORM表型频率在大多数人群中分布较好,具有较高的个人识别机率和非父排除率,因此,ORM是法医血清学一个很有应用前途的遗传标记。

抗GC血清的制备及鉴定

作者用分离纯化的GC蛋白免疫新西兰兔制备了抗GC血清。鉴定结果表明,抗GC血清与进口商品抗GC血清特异性相同;与人血清其他蛋白没有交叉反应。琼脂双向扩散法测得抗血清效价为128;可检出GC蛋白的最低浓度为3.1μg/ml。免疫电泳法可测出入血清三种GC表型。

抗人精液血清特异性的研究

确证精斑常用抗人精液血清作沉淀反应。这种抗血清特异性差，常与人类某些体液发生交叉反应，以致精斑确证试验结果不可靠，影响鉴定结果的准确性。作者用人类精子、精浆、精液与人类精浆特异性抗原p30分别免疫家兔，制备各种抗血清，用环状沉淀、琼脂双向扩散及免疫电泳等技术对这些抗血清的特异性进行丁研究，报道如下。

抗α-1酸性糖蛋白血清的制备

作者用分离纯化的α-1酸性糖蛋白免疫新西兰兔,制备抗α-1酸性糖蛋白血清。鉴定结果表明,制备的抗血清与进口商品抗α-1酸性糖蛋白血清特异性相同;与人血清其他蛋白无交叉反应。琼脂双向扩散法测得抗血清效价为128,检出α-1酸性糖蛋白的最低浓度为204μg/ml。

单克隆抗体酶联免疫吸附抑制试验测定G2m(n)因子及成都地区汉族频率调查

作者应用单克隆抗体,首次建立了检测人类免疫球蛋白同种异型 G2m(n)因子的酶联免疫吸附抑制试验。并调查了成都地区汉族群体 G2m(n)因子的频率。在被调查的517份血清中,G2m(n)因子阳性率为79.69%。由此计算出 G2m(n)基因频率为0.5493,方差为0.0004。

分析扩增DNA序列测定人发的性别

最常用的DNA分析方法是测DNA的限制性片段长度多态性(restriction fragme nt length polymorphism，RFLP)。此法需要微克量的未降解大分子DNA，一般难以从案例检材中获得。聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)能使DNA的特异区域扩增，供序列分析，

体外DNA扩增技术鉴定血痕性别三例报告

本文报道用体外DNA扩增技术对3例刑事案中的人血痕标本进行性别鉴定。其方法是从血痕标本中微量抽提DNA,用蛋白酶K进行消化。然后用两组引物Y1.1与Y1.2和Alu9.1与Alu9.2及国产FD耐热DNA聚合酶进行聚合酶链反(PCR)扩增DNA,电泳分析Y及Alu重复序列,从而判断血痕的性别。

α_2HS-糖蛋白、α_1-抗胰蛋白酶和GC的同步分型与应用

作者应用等电聚焦技术,建立了同步检测α_2HS-糖蛋白表型,α_1-抗胰蛋白酶亚型和GC亚型的方法。本法累计个人识别机率为0.9701,累计非父排除率为0.5811、是国内外同步电泳分型史鉴别效率最高的方法。在11例亲子鉴定中应用本法取得了满意结果。

人类免疫球蛋白同种异型G2m（23）因子在中国人群中的分布

应用单克隆抗体酶联免疫吸附抑制实验，对我国３个民族８个群体２１０４份血样进行了免疫球蛋白同种异型Ｇ２ｍ（２３）因子检测。经多元相关和多元回归分析发现，中国人Ｇ２ｍ（２３）基因频率分布呈沿海拔高度和纬度变化的渐变群。据此建立了可预测中国人群Ｇ２ｍ（２３）基因频率的多元回归方程。本文还讨论了Ｇ２ｍ（２３）基因频率形成渐变群的原因。

成都地区汉族群体C_3表型频率调查与血痕中C_3表型的检测

用醋酸纤维素薄膜电泳免疫固定法,调查了成都地区汉族群体 C_3表型频率的分布。在400例无关健康献血员中发现三种 C_3表型,SS 型397例,FS 型2例,SS_(var)型1例,其基因频率是 C_3~S=0.9963,C_3~F=0.0025,C_3^(Svar)=0.0013。表现型观察值与期望值吻合(p>0.95)。37℃和室温中放置2天的血痕,4℃中放置23天的血纱布和放置35天的玻璃上血痕,-20℃中放置至少87天血液的 C_3表型,可全部检出。人血清在室温中放3天,4℃中放13天,-20℃中至少放106天,可以全部检出 C_3表型。5例亲子鉴定案中检查了 C_3系统。

中国人COL2A1基因座的扩增片段长度多态性

用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）、高分辨聚丙烯酰胺凝胶水平电泳及银染技术对位于人类Ⅱ型胶原基因终止密码下游非转录区１．３ｋｂ处的可变数目串联重复序列（ＣＯＬ２Ａ１ＶＮＴＲ）进行了研究。制备了由人类不同基因型ＤＮＡ混合而成的人类等位基因分型参考物，根据实验结果进行了命名。新命名法在一定范围内达到国际标准化。对１２０名中国汉族无关个体的分型结果表明，该群体样本含有由１４个ＣＯＬ２Ａ１等位基因构成的２３种基因型，包括４种新的等位基因，基因频率分布与德国白人群体有显著性差异，说明该基因座不仅是重要的法庭血液遗传标记，而且是人类遗传学的有用标记。

成都地区汉族群体抗凝血因子Ⅲ的遗传多态性

用等电聚焦免疫固定技术，调查成都地区225名无血缘关系汉族男女青年血浆抗凝血因子Ⅲ（ATⅢ）表现型的分布，发现B、AB两种普遍型和一种BV变异型；推算出ATⅢ的基因频率，即ATⅢ*A=0．1022，ATⅢ*B=0．8956，ATⅢ*V=0．0022。该遗传标记在中国人群中的频率分布系国内首次报道。

Gc蛋白的分离纯化

本文报道Gc蛋白的分离与纯化.人血浆经DEAE-Sephadex-A50, Sephadex G100和DEAE-Sephadex-A50三次柱层析即可获得纯化Gc.纯化Gc经PAGE, SDS-PAGE和免疫电泳等证明,其纯度和特异性均符合要求.

用斑点ELISA方法检测p30确证人类精斑

作者建立了检测精浆特异性抗原p30的斑点ELISA试验方法,确证人类精斑。p30最小检出量为0.4ng。用该法盲测了室温存放1年的生物性斑痕180例,无一例假阳性和假阴性,证明用此法确证人类精斑的敏感性和特异性均优于传统的方法,具有操作简便、快速,检材用量小,结果准确等优点。

原发性胰腺癌ABH物质含量与肿瘤恶性程度关系的研究

用免疫组化ＡＢＣ法对２６例原发性胰腺癌ＡＢＨ物质含量进行了研究，结果发现：癌细胞ＡＢＨ物质阳性者较正常细胞少，低分化腺癌ＡＢＨ物质较高、中分化腺癌少。浸润的癌细胞ＡＢＨ物质含量较原发灶少。同时．发现癌细胞中Ｈ转化为Ａ、Ｂ物质以及将ＡＢＨ物质分泌至管腔的功能发生障碍。提示原发性胰腺癌细胞ＡＢＨ物质的含量与肿瘤的分化程度呈正相关。

分泌抗人精子单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

建立两株分泌抗人精子单克隆抗体的杂交瘤细胞株G_8与E_(10),采用洗涤人精子免疫Balb/c小鼠,取免疫脾与Balb/c小鼠的Sp2/0骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞诱生腹水的方法。Elisa,IIF或酶标抗体免疫组化法结果发现,G_8与E_(10)单抗与人精子(射出精子、睾丸、副睾管及输精管中的精子)及睾丸各级生殖细胞均发生反应;与人甲状腺上皮细胞、肾小管上皮细胞、胰腺导管上皮细胞以及胰岛均发生不同程度的交叉反应,与其他33种人体正常组织、9种人体液与分泌液、8种不同种族的动物精子均不发生交叉反应,说明在一般情况下这两种抗体可用于鉴定人类的精液斑以及精液与阴道分泌液的混合斑。两种单抗与人精子的顶体部、赤道部、后核帽、颈部及中段结合,证明精子特异性表面抗原分布于这几个区域。两种抗体均属IgG_1,G_8与E_(10)抗体的效价分别为1:512与1:1024。

人体组织ABH物质的亚细胞定位

采用胶体金标记抗体包埋后免疫染色免疫透射电镜技术对正常人胃、十二指肠、横结肠细胞的ＡＢＨ物质亚细胞定位进行研究，发现ＡＢＨ物质定位于胃粘膜上皮和颈粘液细胞的粘原颗粒和后者的Ｇｏｌｇｉ器、主细胞的酶原颗粒，十二指肠粘膜上皮细胞和Ｂｒｕｎｎｅｒ腺细胞的粘原颗粒及Ｇｏｌｇｉ器，横结肠粘膜上皮吸收细胞的微绒毛及杯状细胞的粘原颗粒内。证实上述细胞的ＡＢＨ物质由Ｇｏｌｇｉ器产生而进入分泌颗粒，然后随粘液一起胞吐分泌。笔者还对ＡＢＨ物质阳性与阴性细胞相嵌现象，包理剂对ＡＢＨ抗原和超微结构的影响等进行了讨论。

用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法调查西藏藏族群体GC亚型频率报道

作者采用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法检测了142例西藏地区无关藏族青年男女GC亚型,发现6例变异型,其中2例1A变异;1例1c变异;3例1F1S-2变异,这种新的变异型,迄今国内外尚未见报道。GC亚型的基因频率分别为:GC*1F=0.3921、GC*1S=0.3705、GC*2=0.2266、GC*1A=0.0072、GC*1C=0.0036。个人识别机率为0.8079;非父排除率为0.3430。

胶乳凝集试验及其在精斑检验中的应用

精斑检验在鉴定法医学性犯罪案件中有很重要的作用,精斑确证试验的方法主要有:形态学方法、化学方法、生物化学方法及免疫学方法。这些方法各有其优点和一定的局限性,目前仍较多地采用精子检出法和抗人精液血清琼脂双扩,而输精管结扎术者及精子缺乏症者其精斑中无精子,抗人精液血清特异性不够好便难以检出。

从烧焦尸体的残留组织检测死者ABO血型1例

从人体组织检测ABO血型在法医学实践中具有重要意义。我室先后采用不同方法测定人体组织的ABO血型。作者在探索理化因素对人体组织细胞ABH物质的影响时,发现水煮100℃40分钟的皮肤及舌组织仍能正确判定ABO血型。从烧焦尸体的残留组织测定ABO血型,国内外尚未见报道,本文报道1例。