滑膜肉瘤动物模型的分子细胞遗传学研究

用１例日本滑膜肉瘤（ＳＳ）患者的瘤组织标本接种裸鼠，获得了肿瘤生长。亲本肿瘤与裸鼠肿瘤在病理组织形态上存在一定差异，＿但两者的免疫组织化学特征相同。染色体分析表明，ＳＳ细胞株存在染色体数目和结构异常，＿患者外周血淋巴细胞染色体核型为正常女性，４６，ＸＸ。ＳＳ细胞株巴氏小体检出率低于对照，其正常Ｘ染色体比易位Ｘ染色体晚复制１７小时。ＤＮＡ印迹实验表明，ＳＳＤＮＡ存在Ｄ２Ｓ３座位等位片段丢失，Ｄ１Ｓ５７，Ｄ１７Ｓ５和Ｄ１３Ｓ３０座位基因的部分缺失，但无ＤＸＳ７，ＤＸＳ１４和Ｄ２Ｓ４４座位基因改变。

Ewing氏肉瘤的分子细胞遗传学研究

用1例Ewing氏肉瘤(ES)患者(例3)的瘤组织mRNA构建了cDNA文库,从中筛选出含有与人γ-烯醇化酶(γ-cnolase,γENO)基因同源的cDNA克隆,根据其中同源性>70％的第1216和1534号核背酸序列,设计合成了1对人γENO基因特异性引物,用PCR从例3瘤组织DNA中分离出1个181bp片段。用其作DNA探针与EcoRI、BamHI及HindⅢ酶切的例1和例2患者配对的正常组织(N)和瘤组织(T)以及例3的TDNA杂交,在患者的NDNA中识别出2-6个等位片段,在例3TDNA中识别出1-4个等位片段,在例2 TDNA中识别出多个等位片段的丢失,在EcoRI酶切的例1 TDNA中识别出1个17.5kb新片段,在BamHI酶切的例1 TDNA中识别出丢失1个2.8kb片段。此外,用DIS57、D2S44、D2S3、D13S30、D17S5 5个DNA标识探针与例1和例2配对的N和TDNA杂交表明,两例患者的TDNA丢失1个D2S44等位片段,例1 TDNA有D13S30基因的部分扩增,例2 TDNA有D2S3,D13S30及D17S5基因的部分缺失,3例ES瘤细胞均存在染色体数目及结构异常,其中例2和例3有t(11;22)(q24;q12)异常。

一个上皮样肉瘤细胞株的分子细胞遗传学研究

对建成的一个上皮样肉瘤(ES)细胞株进行了染色体分析和DNA印迹实验研究。结果表明,该瘤株染色体众数45,丢失1个22号染色体;结构异常为del(3)(q21.1)以及5、6、9和12号衍生染色体。用定位于人染色体3q13.1-q22的pPCC41A2克隆作为DNA标识探针,在该瘤株DNA中检出PCCB基因的部分缺失。本研究结果提示del(3)(q21.1)及PCCB基因的改变可能与ES癌变有关。

限制性内切酶缓冲液诱导人和家兔染色体显带的研究

用限制性内切酶AluI、缓冲液或空白处理人染色体标本，发现AluI及缓冲液均能诱导出类C和G带，其中缓冲液诱导的类C带频率虽低于酶原液，但明显高于空白对照；而G带的诱导率无明显差异．此外，用限制性内切酶HaeⅢ和HinfI及其缓冲液处理中国小型白兔外周血染色体标本，也诱导出了相应的类C和G带．

非同位素PCR－SSCP方法的初步临床应用

单链构象多态性检测法（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）是近年发展起来的一项检测人类基因组突变的新技术。然而，在该技术中需要使用放射性同位素标记的核苷酸或引物，从而限制了其广泛临床研究及诊断方面的应用。本文报告一种改进的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法，该方法不用同位素标记引物，而直接在溴乙啶染色的聚丙烯酰胺凝胶上显示ＳＳＣＰ。用该方法对５５例平滑肌肉瘤ｐ５３基因第７外显子突变的检测表明，３８％的瘤组织ＤＮＡ存在异常的ＳＳＣＰ。其中１０例有ＨａｅⅢ和ＭｓｐＩ酶切位点的突变（１８％），１９例有突变型ｐ５３蛋白的过度表达（９例同时有异常ＳＳＣＰ改变）。而ｐ５３质粒ＤＮＡ，平滑肌瘤及Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病患者基因组ＤＮＡ无ｐ５３基因第７外显子扩增片段的异常ＳＳＣＰ改变。同时，还使用该方法对临床诊断的２０例Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病患者和８例健康对照进行了β－淀粉样蛋白前体基因第１６和１７外显子的扩增及分析，均未发现有异常ＳＳＣＰ改变及ＥｃｏＲＩ，ＢｃｌＩ酶切位点的突变。本研究结果提示，该非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法可靠、敏感、简便、快速，具有潜在的推广价值。

用非同位素PCR－SSCP检测Alzheimer病患者P53基因的初步研究

用非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病患者Ｐ５３基因的初步研究毛新，曾仲，黄明生，牟庶华华西医科大学精神科遗传室赵坡华西医科大学病理科Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病是常见的以神经系统退行性变为特征的老年神经精神病，其患病率在发达国家为４０～５０％。...

成都市地面水有机萃取物的微核、淋转和Ames实验研究

作者采用人外周血培养细胞微核测定、体外淋转及Ames实验对成都市地面水有机萃取物进行了检测。结果表明,10个采样点的有机萃取物诱发的微核形成率均高于阴性对照(P<0.01;10％DMSO诱导的淋转率为79.41±12.34,5μgMMC诱导的淋转率为40.85±8.15,7个采样点(4、5、6、7、8、9及10)的有机萃取物诱导的淋转率明显低于10％DMSO(P<0.01);2号和9号点的有机萃取物的Ames实验阳性。本文就微核、Ames实验、SCE及淋转实验结果与地面水有机物污染的关系进行了讨论。

成都市河水有机萃取物对人外周血培养细胞SCE的影响

为了探讨成都市工业废水排放渠道的河道水体有机萃物是否具有潜在的致突变性,沿流经市区的沙河、府河及南河设立10个水样采集点,用改良的 XAD-2树脂柱分离富集水样所含有机物。用4例受试者外周血培养细胞 SCE 检测分离的有机物表明,1、2、3及9号点水样分离的有机物诱发 SCE 频率明显升高(P<0.05),且随有机物浓度的增加而升高。此外,随着10个点水样分离的有机物浓度的增加,Ⅱ期分裂细胞数明显下降。本文就 SCE 频率升高的意义及在致突变性检测中的作用进行了讨论。

肾细胞癌P53、c－erbB－2癌蛋白高表达与预后的关系

应用突变型Ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２抗体和微波炉抗原修复法对３１例肾细胞癌进行免疫组化研究。结果显示突变型Ｐ５３和ｃ－ｅｒｂＢ－２癌蛋白的高表达阳性率分别为３５．５％和７４．２％；阳性患者的５年存活率分别为２７．２％和４３．５％，而阴性患者的５年存活率则分别为７０．０％和８７．５％。提示突变型Ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２的高表达可能与肾细胞癌的预后有关（Ｐ＜０．０５），并可能成为肾细胞癌的恶性标志和预后的辅助指标之一。