癫痫大鼠黑质GABA能神经纤维及末梢的免疫组织化学研究

用谷氨酸脱羧酶(GAD)的免疫组化技术对马桑内酯诱发的癫痫大鼠黑质进行研究,发现发作前组和发作6小时组黑质GAD免疫反应强度及GAD免疫反应阳性纤维及末梢的密度明显低于对照组(P<0.01),但发作前组和发作6小时组之间差别没有显著性(P>0.05),提示由马桑内酯诱发的癫痫与黑质GAD含量或GABA含量的下降有关。

大鼠丘脑下部室管膜上皮细胞间加压素和催产素神经元的免疫组织化学观察

本文应用免疫组化PAP技术观察了位于大鼠丘脑下部第三脑室室管膜上皮细胞之间的加压素(VP)和催产素(OXT)神经元。在视前区第三脑室空周,见有较多的OXT神经元和较少的VP神经元紧贴室管膜分布,其突伸至室管膜下神经毡,有的穿行于室管膜上皮细胞之间并多与室管膜上皮细胞接触。在室旁核平面,比较远离脑室的VP、OXT神经元发出长突起行向第三脑室,有的穿过室管膜上皮伸至第三脑室腔(图3)。在上述二区域也发现个别OXT及VP神经元的胞体位于第三脑室侧壁及底壁的宝管膜上皮细胞之间。此外,在视上核前部及结节部,VP神经元的树突,大多伸向脑的腹侧面,有的树突似乎伸入了蛛网膜下腔。上述这两种肽能神经元与室管膜上皮的密切位置关系,可作为VP、OXT神经元具有感受脑脊液的变化或直接向脑脊液释放其分泌产物等设想的形态学基础。

黄芪注射液对骨髓抑制性贫血小鼠造血调控的实验研究

目的观察黄芪注射液(Astragalus membranaceus injection,AMI)对放、化疗因素所致骨髓抑制性贫血小鼠造血的影响,并探讨其可能的机制。方法:采用Co^(60)照射、注射环磷酰胺、氯霉素复合造模建立贫血小鼠模型,并将动物随机分为三组:AMI给药组Ⅰ、Ⅱ和对照组,分别腹腔注射AMI[500 mg/kg、1000 mg/kg]或等量生理盐水,第7日全自动血球仪检测外周血和骨髓有核细胞,并应用免疫组化和造血祖细胞体外培养技术,检测骨髓有核细胞BcL-XL和BcL-2蛋白的表达及进行三系造血祖细胞集落计数。结果:AMI给药组Ⅰ的RBC、HB、PLT(P<0.05)和BM(P<0.01)明显高于贫血对照组;同时给药组Ⅰ的CFU-E、BFU-E、CFU-Meg和骨髓有核细胞抗凋亡蛋白BcL-XL 的表达也明显高于贫血对照组(P<0.05或P<0.01).给药组Ⅱ的CFU-E和骨髓有核细胞抗凋亡蛋白BcL-XL的表达也高于贫血对照组(P<0.05)。结论:黄芪注射液可以通过上调抗凋亡蛋白BcL-XL表达减轻骨髓有核细胞的凋亡,并促进红系、巨核造血。

黄芪注射液影响贫血小鼠粒单系、红系造血及作用机制的探讨

目的 :研究黄芪注射液对贫血小鼠粒单系和红系血发生的影响 ,并探讨其作用机制。方法 :制备贫血小鼠模型 ,随机分为给药组和对照组 ,采用造血祖细胞体外培养等实验血液学技术。结果 :一定浓度的黄芪注射液体内作用可使贫血小鼠血清集落刺激因子 (CSF)水平明显升高 ,刺激贫血小鼠粒单系、红系造血祖细胞增殖和分化以及骨髓基质细胞增殖 ,使降低的骨髓有核细胞 (BMC)数以及外周血象明显回升 ,黄芪注射液和造血细胞直接一起孵育对粒单系祖细胞 (CFU GM)和红系祖细胞 (CFU E、BFU E)的产率无明显影响。结论

松果腺褪黑激素对大鼠下丘脑视交叉上核AVP VIP肽能神经细胞的影响

本研究选用成年健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠建立松果腺切除和松果腺褪黑激素（ＭＬＴ）注射模型，并设置正常、松果腺切除假术、生理盐水注射三种对照组。ＭＬＴ注射时间分别为１０００，１７００，２４００。实验组、对照组动物均存活３０天，于上午９００麻醉、固定、取材、切片、ＡＢＣ免疫组化染色、显微图象分析系统（ＭＩＡＳ）相对定量分析处理，目的在于观察ＭＬＴ对ＳＣＮ不同肽能神经细胞的作用。结果表明：ＭＬＴ对ＳＣＮ内ＡＶＰ样神经细胞无显著作用，而可促使其ＶＩＰ样神经细胞中ＶＩＰ含量增多。

肝硬化患者血清一氧化氮水平的变化及意义

目的 :探讨肝硬化患者血清一氧化氮 (NitricOxide,NO)水平变化及意义。方法 :采用硝酸还原酶法检测 32例肝硬化患者外周血NO水平。结果 :肝硬化患者血清NO水平明显高于正常对照 (P <0 0 5 ) ,且随着腹水的出现 ,功能性肾功衰竭的发生 ,其NO水平显著升高 (P <0 0 5 )。结论 :NO水平的升高可能是肝硬化并发症产生的重要原因 ,检测血清NO可作为判断肝硬化病情严重程度的指标之一。

大鼠下丘脑弓状核的形态计量研究

为了探讨急性癫痫弓状核形态改变与可复性，我们采用光、电镜技术和形态计量方法对下丘脑弓状核进行了形态定量研究。结果显示：弓状核切面面积为317500±6460um2，神经元胞体和胞核的等效直径分别为12.94±0.34um和8.54±0.43um，暗细胞内线粒体、粗面内质网、高尔基复合体、溶酶体、游离核相体和分泌颗粒的面积分数分别是5.87±1.98％、3.53±0.25％、0.81±0.49％、2.13±0.42％、10.53±0.46％和0.86±0.35％，其面数密度（单位面积为30um2）分别为15.68±1.14um-2、21.29±3.52um-2、10.20±0.42um-2、5.62±067um-2、101.35±7.55um-2和5.22±0.77um-2.本文还对弓状核的形态结构、神经元类型及其功能进行了讨论。

改良脱钙骨切片制作法

用脱钙骨制作骨切片与制作骨磨片的方法相比，其具有下列优点：1．大大节省劳力和时间；2．切片质量高于磨片；3．有利于科研和教学。常规脱钙骨制作切片的方法有多种，但均存在一些缺点：首先，制作时间一般都比较长，如果脱钙处理不当还会损坏骨的结构；其次，脱钙骨经硫堇——苦味酸染色后，切片用明胶粘片时常易出现苦味酸褪色；另外，经二甲苯透明时又易发生卷片等现象。为了克服上述缺点，作者在常规方法的基础上进行了改良。1．取新鲜长骨5－Ic毫米长，在10％甲醛内固定一周。2．改良脱钙液配制；氯化铝8克，盐酸10毫升，甲酸8毫升，蒸馏水100毫升。3．经改良脱钙液脱钙，脱钙程度以用双面刀片刚好切断为度。大约只要两天，此法缩短了脱钙时间，不损伤骨结构。4．快速火棉胶包理法包埋，切片16—18微米，收集于蒸馏水中街染。5．染液配制：（1）硫重贮备液：硫莫1克，蒸馏水45毫升，加温溶解，冷后再加95％酒精50毫升，过滤待用。（2）硫虽染色液：将硫童贮备液20毫升加入5％石碳酸水溶液100毫升内，混匀后再加1毫升浓氟水即可使用。6染色：（1）切片入硫董染色液内10－30分钟，时间过长，染色易产生沉淀。（2）蒸馏水洗后人苦味酸饱和液1分钟，时间不宜过长，否则组织结构不清晰。

人胎海马生长抑素和神经生长因子免疫阳性神经元的研究

人胎海马生长抑素和神经生长因子免疫阳性神经元的研究李永红保天然李秀群（华西医科大学组织胚胎学教研室）大量证据表明，中枢神经系统（ＣＮＳ）中含生长抑素（ＳＳ）或神经生长因子（ＮＧＦ）的细胞、纤维及其受体广泛地分布于脑的各部，它们在ＣＮＳ的生长发育和生理...

一氧化氮合成酶阳性神经元在猫和大鼠下丘脑的分布

下丘脑是大脑皮质下自主神经系统的调控中枢，对于维持内脏活动、内分泌与情绪行为之间的平衡起着非常重要的控制和中介作用。一氧化氮（NitricOxide，NO）作为一种全新的神经信息物质，在神经系统担负着重要的信号传递任务，对下丘脑内递质与激素的释放具有刺激或抑制性中介作用。猫作为重要的实验动物，其下丘脑内NOS阳性神经元的分布还未见报导。本文应用NADPH－d组织化学方法显示猫和大鼠下丘脑中NOS阳性神经元的分布情况，以补充这方面资料的不足，并探讨NOS阳性神经元在不同种属间的分布差异。采用成年雄性家猫和SD大鼠各五只，灌注固定。恒冷箱切片，切片在含0．3％TritonX一100’0·6mg／ml硝基四唑氮篮（Nitrobluetetrazoll－um，NeT，Slgma），0．sing／mlβ—NADPH（Sigma，还原型）的0.05M／LTris—HCI缓冲液（PH0）中，37℃，孵有二小时，中止反应，并裱片、封片。观察见到，猫和大鼠下丘脑室旁核有密集深染的大型NOS阳性胞体；背内侧核、腹内侧核、结书内侧核、下丘脑外侧区、下丘脑后区、室周区、弯窿周核等处有中等染色的中、小型阳性细胞。二者明显不同的是，猫视交叉上核内分布有深染的中小阳性细胞，而大鼠视交叉上核内NOS细胞阴性。大鼠视上核和环状核内有明显的大中型阳性细胞。

免疫组化法研究松果腺的神经供给

切除大鼠双侧颈上节后用免疫组化PAP法和荧光法处理，主要观察松果腺浅部。发现：（1）对照及实验组松果腺浅部均含VIP纤维。多数纤维沿血管走行，少量分布在松果腺细胞之间，实验组纤维数量与对照组相比，无明显差异。（2）对照及实验组松果腺浅部显示出DβH和NPY样阳性纤维。数量较VIP纤维少，实验组纤维数量较对照组减少近半。（3）实验组5－HT纤维大大减少。纤维与松果腺细胞的荧光强度减弱。以上结果表明松果腺浅部纤维除来自颈上节外，尚有脑源性或其它来源的神经支配。

用原位杂交组化方法探测肾上腺中合成前脑啡肽原的mRNA

取经Zambonis’固定液固定的豚鼠肾上腺作冰冻切片.切片经预杂交后,用含生物素标记的前脑啡肽原A(PPA)的cDNA探针的杂交液孵育,然后孵于链霉抗生物素-辣根过氧化物酶复合物溶液中,用DAB呈色.结果:约90％的肾上腺髓质细胞呈阳性反应,阳性反应产物位于细胞质中。

大鼠丘脑板内核向大脑皮质和尾-壳核的投射——荧光素双标法

将荧光素DY注入大鼠的大脑皮质背外侧面的感觉区、运动区和扣带回前分,同时将FB注入尾-壳核,在丘脑板内核见到了DY标记细胞、FB标记细胞和双标细胞。DY标记细胞较少,排列稀疏,FB标记细胞较多,排列紧密。DY标记细胞多散在于FB标记细胞之间,在少数动物也见DY标记细胞集聚成团。同时注射扣带回前分皮质和尾-壳核之后,双标细胞出现于中央内侧核和中央外侧核;注射运动皮质和尾-壳核后,双标细胞除见于已有报导的中央外侧核外,在旁中央核也见到了双标细胞。双标细胞数量少,且在不同动物数量也不一致。半数实验动物的板内核未出现双标细胞,这可能是由于轴突分支向皮质和尾-壳核投射的细胞少,也可能还由于荧光索只注射于皮质和尾-壳核的某一点,一个神经元向此二处投射的轴突分支未能同时都被标记之故。

家兔旁臂内侧核区微量注射羟基马桑毒素所致呼吸效应

实验在44只戊巴比妥钠麻醉、双侧颈迷走神经切断的家兔上进行。一侧旁臂内侧核(NPBM)区微量注射1μ1(10μg)羟基马桑毒素(Tutin)(n=13),均可见呼(Te)、吸(Ti)时程,呼吸频率和膈肌肌电积分幅度改变,最突出的反应是呼吸暂停(n=4)。一侧注射后2～7h仍未出现呼吸停止的动物。

大鼠发育过程中视皮层神经元电生理与形态学特性的相关性——细胞内染色研究

目的 研究大鼠不同发育阶段视皮层神经元电生理学与形态学特性的关系 ,观察电生理特性和形态变化的同步化程度 ,认识正常视觉发育的细胞内机制。方法 应用脑片膜片钳全细胞记录技术和细胞内标记相结合的方法 ,获得 4～ 2 8d Sprague- Dawleg(SD)大鼠视皮层神经元的细胞内微电极记录 ,再进行细胞内标记和组织学染色。 结果 成功标记 2 3例细胞 ,其中锥体细胞与非锥体细胞在电生理特性上差异有显著性。不同发育阶段视皮层神经元形态学上的成熟度不同。 结论 1视觉发育过程中 ,视皮层锥体细胞和非锥体细胞的电生理学特性反映其参与不同的视皮层神经元回路的整合功能。 2视觉发育可塑性关键期内 ,视皮层神经元形态和电生理特性变化的同步化程度大于视皮层下结构。