以雄性生殖细胞为载体建立转基因动物的研究进展

以生殖细胞为载体转入外源DNA是近年逐渐被采用的简便、有效的生产转基因动物方法。本文介绍了外源DNA能进入精子的实验证据 ;DNA与精子的作用机理和结合方式 ;简述了近年来以精子、精原干细胞为载体以及胞质内精子注射法建立转基因动物的原理和方法 。

建立大鼠胚胎神经干细胞克隆的实验研究

为了获得神经干细胞克隆 ,作者从胚胎大鼠脑前区取出神经组织 ,经酶消化 ,机械吹打 ,有限稀释法培养具有单细胞克隆能力的细胞群 ,再利用单细胞克隆技术连续传代培养获取亚克隆 ,采用免疫细胞化学技术检测并鉴定神经干细胞和分化后成熟神经细胞特异抗原的表达。发现从胎脑分离的细胞群具有形成连续克隆能力 ,并表达特异的神经干细胞蛋白 (Nestin) ;诱导分化后的细胞表达神经元和星形神经胶质细胞的特异抗原 (Tubulin和GFAP)。因而认为分离细胞克隆具有自我更新和多分化潜能 ,表达神经干细胞蛋白 ,有较强的体外增殖和分化成成熟神经细胞的能力 。

肌动蛋白的聚合

肌动蛋白的聚合杨亚龙（华西医科大学细胞生物学教研室，成都有６１００４４）细胞运动是动物细胞活动的基本特征之一，白血细胞的吞噬活动、哺乳类精子的受精、肿瘤的侵蚀与扩散等都与细胞运动有关。细胞运动除一些运动性细胞器（如伪足、鞭毛和纤毛）参与外，微丝的结构...

一种新的核仁组成区胶银染色技术

核仁组成区(Nucleolar OrganizerRegions,NORs)是位于细胞核仁内的DNA 环,具有 rRNA 基因,与 rRNA 的转录活性有关、在蛋白质合成中起重要的作用。遗传学家曾利用银染技术显示染色体核仁组成区来研究各种遗传缺陷性疾病。1986年 Ploton 建立丁一科改良的一步法胶银染色技术显示核仁组成区相关蛋白(Nucleoar Organizer Region Associa-ted Protein,AgNORs),虽然现在对这些蛋白染色的性质还不清楚,但该技术提供了一种快速检测核仁结构和活性改变的有效手段,已受到病理学界的高度重视,

乙肝病毒(adr亚型)X基因转基因小鼠的建立

运用二种制备转基因动物方法———显微注射法和以精原干细胞转染法 ,生产乙肝病毒X基因转基因小鼠 .再由PCR和肝组织免疫组化法 ,检测用上述两种方法生产的小鼠 .

乙肝病毒(HBV)X基因真核表达载体构建及其表达研究

:限制性内切酶酶切含两拷贝乙肝病毒 (HBV)全基因组的 pBR32 2质粒 ,得到含X基因 894bpDNA片段与载体 pcDNA3.1连接 ,构成中间载体 .以此中间载体为模板 ,PCR扩增X基因序列 ,与载体 pcDNA3连接 ,构建成X基因真核表达载体 .用脂质体转染法 ,在体外转染正常小鼠胎肝细胞 (FL)、人肝癌细胞 (SMMC 772 1)和人宫颈癌细胞 (HeLa) .以免疫组化染色法检测细胞中X蛋白表达 .结果显示 ,细胞中X蛋白表达呈低水平 .同时 ,筛选了一株能长期表达X蛋白的细胞株 .这些为进一步研究X基因的生物学功能、分子生物学特性以及建立转基因小鼠奠定基础 .