有和无甘油的聚丙烯酰胺胶在检测突变时的差别

有文献报道 ,在非变性的聚丙烯酰胺中加入甘油可提高SSCP检测的灵敏度 .作者采用PCR SSCP、加 5%的甘油或未加甘油的 10 %非变性聚丙烯酰胺胶和DNA测序技术 ,来检测常染色体显性多囊肾病致病基因PKD1的突变 .结果发现 ,同一个病人在未加甘油的10 %非变性聚丙烯酰胺胶中 ,有 4条单链带 ,而在加 5%的甘油的 10 %非变性聚丙烯酰胺胶中仅有两条单链带 ;两种胶上均有迁移率较正常双链带慢一条的双链带 .测序结果显示 ,在有异常迁移率带的个体的 1条DNA分子中缺失 1个G .我们的实验提示 ,加入甘油后检测灵敏度不及不加甘油的非变性聚丙烯酰胺 ;并且证实 ,仅有一个碱基的缺失会导致在SSCP胶上双链带位置出现一条迁移率比正常双链带迁移率慢的带 .这是由于缺失一个碱基的DNA链与正常的DNA链间会形成有一个碱基突出来的杂合分子 ,导致其迁移率比完全碱基互补的分子迁移率慢 .因此作者建议在进行SSCP筛查未知突变时 ,最好采用不加甘油的非变性的聚丙烯酰胺胶 ,这既省力省钱 ,又灵敏 .在判读SSCP胶时 ,不可将在双链带位置有 1条比正常迁移率慢的带就判定为插入突变 .此时要判定突变的性质 ,最好测序 .

奥沙利铂加长春瑞滨与顺铂加长春瑞滨治疗晚期非小细胞肺癌的随机对照研究

目的探索奥沙利铂+长春瑞滨(NL方案)与顺铂+长春瑞滨(NP方案)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效、不良反应及患者的生活质量.方法可评价疗效的NSCLC患者以2:1比例随机分入治疗组与对照组.治疗组70例,化疗方案为长春瑞滨25 mg/m2静脉冲人,第1,8天;奥沙利铂130 mg/m2静脉滴注,第2天;21 d为1个周期.对照组32例,化疗方案为顺铂80 mg/m2静脉滴注,分2～3 d给予;长春瑞滨用法同治疗组.结果治疗组与对照组的有效率分别为35.7%和43.8%(P=0.4),中位肿瘤进展时间分别为4.7个月和5.5个月(P=0.6),1年生存率分别为38.5%和58.6%(P=0.07).治疗组Ⅰ～Ⅱ度感觉异常发生率为68.4%,显著高于对照组的36.4%(P=0.0017);而治疗组Ⅰ～Ⅱ度粒细胞减少率为49.4%,显著低于对照组的70.6%(P=0.037).两组患者各项生活质量评分差异无统计学意义.结论奥沙利铂+长春瑞滨治疗晚期NSCLC疗效确切,患者耐受性良好,为晚期NSCLC的治疗提供了一种新的选择.