锌对大鼠成骨细胞膜Ca^(2+)-ATP酶活性的调节

为了研究锌对大鼠成骨细胞膜Ca2+ -ATP酶和Na+ 、K+ -ATP酶活性的影响及其机制,实验设对照组和3个补锌组。采用孔雀绿比色法同步测定膜Ca2+ -ATP酶和Na+ ,K+ -ATP酶活性,以研究Zn2+ 对酶活性的影响以及蛋白激酶C或钙调素特异性抑制剂对Zn2+ 诱导的成骨细胞膜Ca2+ -ATP酶活性的影响。结果表明,Zn2+ 可以显著提高成骨细胞膜Ca2+ -ATP酶活性,但对Na+ ,K+ -ATPase活性无影响;钙调素特异性抑制剂R24571对Zn2+ 诱导的Ca2+ -ATPase活性无影响,钙调素对膜Ca2+ -ATP酶基础活性也无激活作用;蛋白激酶C特异性抑制剂三氟拉嗪可使Zn2+ 诱导的Ca2+ -ATP酶的活性显著降低。因此,锌可能通过蛋白激酶C介导调节成骨细胞膜Ca2+

锌激活体外培养大鼠成骨细胞肌醇磷脂信号转导系统

目的： 研究锌对体外培养大鼠成骨细胞肌醇磷脂信号转导系统的影响。方法： 从大鼠颅骨分离出成骨细胞，于 Ｄ Ｍ Ｅ Ｍ 培养基中进行传代培养。实验分为对照组、１０μｍｏｌ／ Ｌ、２５μｍｏｌ／ Ｌ 及５０μｍｏｌ／ Ｌ Ｚｎ２ ＋ 剂量组：分别测定了 Ｚｎ２ ＋ 对成骨细胞长期或短期作用后蛋白激酶 Ｃ（ Ｐ Ｋ Ｃ） 活性及三磷酸肌醇（ Ｉ Ｐ３） 含量的变化。根据被磷酸化多肽底物的量测定 Ｐ Ｋ Ｃ 活性，按照３ Ｈｍ ｙｏ肌醇掺入及层析分离法测定 Ｉ Ｐ３ 含量。结果： （１） 三个不同剂量的 Ｚｎ２ ＋ 作用于大鼠成骨细胞３ 天后， Ｉ Ｐ３ 含量及 Ｐ Ｋ Ｃ 活性均显著高于对照组；且随着 Ｚｎ２ ＋ 剂量的增加， Ｉ Ｐ３ 含量及 Ｐ Ｋ Ｃ 活性有相应增加的趋势；（２） 在短期实验中，２５μｍｏｌ／ Ｌ Ｚｎ２ ＋ 对成骨细胞的作用比较明显，仅作用１５ 分钟， Ｉ Ｐ３ 含量即明显提高，且在以后的各个作用时点均明显高于对照组，但时间效应曲线平坦；５０μｍ ｏｌ／ Ｌ Ｚｎ２ ＋ 组 Ｉ Ｐ３ 含量在各个时点略低于２５μｍｏｌ／ Ｌ Ｚｎ２ ＋组；１０μｍ ｏｌ／ Ｌ Ｚｎ２ ＋ 组略高于对照组。２５μｍｏｌ／ Ｌ Ｚｎ２ ＋ 、５０μｍ ｏｌ／ Ｌ Ｚｎ２ ＋ 组 Ｐ