原发胃癌中p15基因及蛋白表达的异常

目的检测胃癌组织中p15基因及启动子甲基化状态和P15蛋白表达情况。方法选择p15基因及启动子区域,用PCR-SSCP,MSP(甲基化特异的PCR)法、测序和免疫组化等方法对100例胃癌患者的癌组织和癌旁组织进行检测。结果 11％的病例P15表达阴性,9％的病例具有p15基因启动子区的高甲基化,9％的病例同时有P15表达阴性和p15基因启动子区的高甲基化,p15异常与低分化胃癌有关,p15基因发现两例DNA序列改变。结论 p15基因在胃癌中起一定作用且p15基因启动子区域高甲基化是胃癌中p15基因失活的主要原因。

改进的甲基化特异PCR法及在抑癌基因p16检测中的应用

目的 介绍一种 Ｃｐ Ｇ 岛甲基化分析方法，即甲基化特异的 Ｐ Ｃ Ｒ（ ｍ ｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐｏｌｙｍ ｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ ， Ｍ Ｓ Ｐ） 法以及对该法的改进。方法 用亚硫酸氢盐修饰被测 Ｄ Ｎ Ａ 后，再进行甲基化与非甲基化特异的 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增，并对 Ｍ Ｓ Ｐ 法进行改进。应用该法分析了颌面部鳞癌中ｐ１６ 基因５′ Ｃｐ Ｇ 岛甲基化状态。结果 发现一些颌面部鳞癌组织中有ｐ１６ 基因５′ Ｃｐ Ｇ 岛的甲基化。采用加热变性代替强碱变性，用透析法脱盐，以及用限制酶 Ｔａｑ Ⅰ取代 Ｂｓｔ Ｕ Ｉ来判断甲基化与非甲基化的扩增片段等均取得了良好的效果。结论 Ｍ Ｓ Ｐ 法是一种较为简便、灵敏和具特异性的甲基化检测方法，改进后该方法更加简便可行。

与成人多囊肾病PKD1紧密连锁的四种微卫星DNA在中国人群中的多态性

目的为了评估成人多囊肾病ＰＫＤ１基因内的微卫星ＤＮＡＫＧ８及与ＰＫＤ１紧密连锁的微卫星ＳＭ６、ＣＷ４和ＣＷ２在基因诊断中的有效性。方法采用ＰＣＲ、聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）和银染法分析了部分无血缘关系的中国汉族人。结果在中国汉族人群中ＫＧ８有６种等位片段，其多态信息量（ＰＩＣ）为０．３１２；ＳＭ６具有２４种等位片段，其ＰＩＣ为０．８０；ＣＷ４有９种片段，ＰＩＣ为０．８５０；ＣＷ２有７种，ＰＩＣ为０．８１４。而白种人中ＫＧ８有８种，ＰＩＣ为０．５４５；ＳＭ６有１６种，ＰＩＣ为０．６５３；ＣＷ４有９种，ＰＩＣ为０．７８２；ＣＷ２有１３种，ＰＩＣ为０．８０９。结论研究人群与文献报道的白种人群相比，这四种微卫星在种类和分布上均有差异，表明二核苷酸重复在不同民族中存在差异；ＳＭ６、ＣＷ４和ＣＷ２是高度多态的遗传标记，可用于ＡＰＫＤ的连锁基因诊断。

常染色体显性多囊肾病PKD1基因及其蛋白质

常染色体显性多囊肾病ＰＫＤ１基因及其蛋白质丁兰张思仲常染色体显性多囊肾病（ＡＤＰＫＤ）是人类最常见的单基因遗传病之一，为了阐明ＡＤＰＫＤ的生化缺陷和发病机理，研究者采用了定位克隆的方法研究此病，即首先从基因着手，再研究蛋白质的性质，并以此来阐明发病机...

染色体定向跳跃克隆PCR方法及其初步应用

染色体定向跳跃克隆ＰＣＲ方法及其初步应用余裕炉△张思仲近１０多年来，由于λ科斯体、酵母人工染色体等大容量克隆载体的构建和使用，以及染色体步移和跳跃等基因克隆技术的发明，促进了逆向遗传学的迅速发展，与之相适应而发展起来的基因克隆策略——定位克隆也得到了...

双链引物聚合酶链反应

目的 建立一种操作简单、不仅能够在反应开始之前发挥预防和降低非特异性扩增，而且能够在整个反应过程中都发挥这种作用的 Ｄ Ｎ Ａ 体外扩增技术。方法 人工合成脆性 Ｘ 智力低下１ 号基因（ Ｆ Ｍ Ｒ１）５′非翻译区序列特异单链引物和与其互补的引物，并将后者的３′末端进行修饰，使其失去延伸能力；最后将它们混合并退火成双链引物，再将双链引物加入 Ｐ Ｃ Ｒ 反应体系中进行热循环扩增。结果 在１５ 个标本的双链引物 Ｐ Ｃ Ｒ 反应中都得到了较使用常规 Ｐ Ｃ Ｒ 特异性更高的扩增产物。结论 双链引物 Ｐ Ｃ Ｒ 是一种特异性更好的 Ｄ Ｎ Ａ 体外扩增技术。

精蛋白异常及正常原发不育男性精蛋白2基因5'端GA重复区的研究(摘要)

运用ＰＣＲ技术对９４例原发不育患者的精蛋白２基因（ＰＲＭ２简称Ｐ２）５′端ＧＡ重复区进行了分析，以比较各等位片段的分布，并在异常组进行突变筛查。材料和方法９４例原发性男性不育患者来自本院男性门诊，年龄２５～４０岁。经蛋白电泳筛查，分为精蛋白正常组（８...