脑源性神经营养因子基因转染培养肌母细胞的表达

目的 了解含脑源性神经营养因子 (BDNF)基因的表达质粒PSVCEPBDNF CAT在培养肌母细胞中的表达情况及LipofectAMINE阳离子脂质体介导的转染效率。 方法 按每 2 μg表达质粒PSVCEPBDNF CAT由 2 0 μlLipofectAMINE包裹后转染至细胞浓度为 2× 1 0 8个 /L的3 .5cm培养皿培养的肌母细胞中 ,连续观察细胞形态 ,48h后用免疫细胞化学和免疫电镜的方法来检测其表达情况。结果 培养肌母细胞在转染 6h吞噬脂质体最显著 ,转染 48h后 ,40 %的肌母细胞胞质内有BDNF基因表达 ,免疫电镜结果证实表达在细胞质近胞膜处。结论 含BDNF微基因的表达质粒PSVCEPBDNF CAT可以在培养肌母细胞中表达 ,脂质体转染的方法简便、有效。