乳腺癌患者外周血淋巴细胞与肿瘤细胞体外化疗药敏相关性研究

探讨乳腺癌患者外周血淋巴细胞能否代替肿瘤细胞进行体外化疗药敏试验 ,以指导部分不能行肿瘤细胞化疗药敏检测患者的临床化疗 ,采用 MTT法体外药敏试验 ,检测了 30例乳腺癌患者外周血淋巴细胞和肿瘤细胞对 15种临床常用化疗药物的敏感性。结果表明 ,除 VCR外 ,乳腺癌患者外周血淋巴细胞对其余 14种化疗药物的敏感性与肿瘤细胞的药敏结果无相关性。

外周血淋巴细胞和肿瘤细胞体外化疗药敏相关性研究

采用MTT法体外药敏试验，检测了35例神经胶质瘤患者外周血淋巴细胞和肿瘤细胞对15种临床常用化疗药物的敏感性。结果：神经胶质瘤患者外周血淋巴细胞和肿瘤细胞对VM－26和TAX较敏感，对DDP、Me－CCNU、EADM、ADM、MMC、HCPT等敏感，对MTX 、ACR、VP－16、VCR、BLM则不敏感。患者外周血淋巴细胞和肿瘤细胞对上述化疗药物的敏感率无显著性差异（P>0.05）。以上结果提示，肿瘤患者外周血淋巴细胞化疗药敏检测对临床选择化疗药物具有重要参考价值,有可能代替肿瘤细胞药敏检测。

离体睾丸缺血再灌注损伤的实验研究

目的 探讨人离体睾丸缺血再灌注损伤的变化规律 ,了解益生注射液对其变化的干预效果。方法 采用 13人捐赠尸睾丸 2 6只 ,用 4℃ 2 5 0 m l高渗枸橼酸盐嘌呤液冷保存 ,再以此液 5 0 0 m l再灌注。实验组用含5 0 0 μg/ ml益生注射液同法操作 ,同一睾丸于单纯冷保存 (对照组睾丸 8只 ,实验组 8只 ) 6、12、18、2 4、36、48、6 0和72小时连续取材 ,冷保存 6、12、18、2 4和 36小时 (对照组与实验组每时间点各 1只 ,共 10只 )后 ,37℃复温再灌注 6和 12小时连续取材 ,作组织学及酶组织化学染色。结果 实验组睾丸组织 4℃冷保存 2 4小时内无明显病理改变 ;36和 48小时后出现精索血管内皮细胞肿胀、变性及部分脱落 ,曲细精管与生精上皮剥离 ,间质轻度水肿等损伤 ;冷保存 12小时乳酸脱氢酶与琥珀酸脱氢酶活性增高 ,2 4小时后又降低 ;一氧化氮合成酶活性于冷保存 18小时后降低再灌注后组织损伤加重。对照组睾丸单纯冷保存 12小时即出现精索血管内皮细胞肿胀、变性 ,2 4小时后加重 ,再灌注后精索血管大量内皮细胞变性脱落 ,曲细精管基膜剥离和间质水肿严重。结论 4℃冷保存 2 4小时内仅有内皮细胞轻微损伤 ,超过 2 4小时可引起睾丸血管及组织形态结构明显异常 ,37℃复温再灌注使损伤程度加重 ;益生注射液使?

反义寡核苷酸降低细胞株SMMC-7721/ADM之MRP基因表达的研究

目的研究反义硫代磷酸寡核苷酸（ＡＳ－ＯＤＮ）抑制人肝癌细胞耐药株（ＳＭＭＣ－７７２１／ＡＤＭ）ＭＲＰ 基因表达的作用。方法用人工合成互补于ＭＲＰ 基因ｍＲＮＡ特定片断的反义硫代磷酸寡核苷酸，以脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ为载体转染ＳＭＭＣ－７７２１／ＡＤＭ细胞株，用ＲＴ－ＰＣＲ测定ｍＲＮＡ表达，流式细胞技术测定细胞膜ＭＲＰ１蛋白Ｐ１９０表达及ＭＴＴ法检测细胞对柔红霉素（ＤＮＲ）和阿霉素（ＡＤＭ）的敏感性。结果 ＡＳ－ＯＤＮ能抑制 ＭＲＰｍＲＮＡ和其蛋白 Ｐ１９０表达，提高细胞对 ＤＮＲ和 ＡＤＭ的敏感性。结论① ＡＳ－ＯＤＮ能降低 ＭＲＰ基因表达；② ＭＲＰ介导的多药耐药（ ＭＤＲ）是ＳＭＭＣ－７７２１／ＡＤＭ耐药的重要机理之一。

MTT法检测乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的研究

目的 探讨乳腺癌细胞对临床常用 15种化疗药物的敏感性 ,以期指导治疗。方法 采用 MTT法检测 30例乳腺癌肿瘤细胞的体外药敏试验。结果 乳腺癌细胞对 CBP、BL M、5 - Fu、DDP、MMC、HCPT、MTX、EPI、DTIC、ADM、THP敏感 ,对 CBP、HCPT、DDP、BL M中度敏感。结论 乳腺癌千篇一律的化疗有较大的盲目性 ,应提倡个体化化疗。

50例神经胶质瘤体外化疗药物敏感性研究

目的 :探讨MTT法体外药敏试验在神经胶质瘤患者中应用的可能性。方法 :采用MTT法对50例人神经胶质瘤新鲜标本 ,进行了临床12种常用化疗药物的体外敏感性测定。结果 :采用简单机械法分离单细胞悬液 ,以每孔5×104胞量接种、1×PPC(血浆峰浓度)作用72小时为适宜的实验条件 ,试验的可评价率为98 % ;以抑制率>50%为敏感的判断标准 ,神经胶质瘤对VM26、DDP、MMC、ACLA、和VP 16较为敏感 ,敏感率在71.43%～26.53%之间 ;不同个体对同一药物及同一药物对不同个体的敏感性具有明显的差异。结论 :MTT法具有简便、快速、客观、成功率高等特点 ,在神经胶质瘤临床个体化疗上具有使用价值。

甲状腺癌中p53基因的突变与病理学特征及预后的关系研究

为探讨p53基因突变与甲状腺癌的发生、发展及预后的关系，应用PCR单链构象多态性（SSCP）分析技术，对p53基因第7，8外显子突变进行了检测和分析。结果显示，在31例甲状腺癌中有10例发生突变，突变率为32.3%。p53基因突变在复发的患者中显著高于未复发的患者；p53基因突变与转移，组织学类型和分化状况无显著差异，表明p53基因的突变可能是甲状腺癌发生的一个重要因素。

胃肠道恶性肿瘤患者治疗前后血清CEA水平的动态分析

目的 :探讨治疗前后不同时期胃肠道恶性肿瘤患者血清CEA水平的变化规律及临床意义。方法 :采用CEA单克隆抗体酶联免疫检测试剂盒 ,检测患者血清CEA水平 ,用统计学方法对检测结果进行比较分析。结果 :胃肠道恶性肿瘤患者手术前CEA水平显著高于健康人(P<0.005) ,手术后CEA普遍降低至较低水平。当患者再进行化疗时 ,化疗结束后60天内81.8%(18/22)的患者血清CEA有升高现象 ;61天～180天再次复查时 ,其中13例患者CEA水平又降至化疗前的水平。结论 :手术治疗可降低胃肠道恶性肿瘤患者的血清CEA水平 ;化学药物治疗可使患者出现短暂的(60天内)、可恢复的血清CEA升高过程 ,在此期间内CEA值尚不能作为肿瘤复发或转移的指征。动态分析患者CEA水平对肿瘤诊断和疗效评价有重要意义 ,化疗后患者CEA水平升高的机制待进一步研究。

视网膜母细胞瘤的遗传研究(摘要)

视网膜母细胞瘤(简称RB)是儿童期常见的眼内恶性肿瘤,是研究肿瘤遗传学的理想模式。本文总结了本课题组自1982年以来对RB遗传学的研究工作。1.RB的临床遗传学研究(1)总结了1958年至1986年本院327例RB患者发病和随访情况。单眼患者占77％,双眼患者占23％;平均发病年龄单眼患者为31.3±22.4个月,双眼患者为14.5±12.2个月;随访发现5年以上存活率为29.4％。

p53基因在甲状腺癌中的突变研究

目的 :为探讨 p53基因突变与甲状腺癌的发生、发展及预后的关系。方法 :应用PCR单链构象多态性(SSCP)分析技术 ,对p53基因第7,8外显子突变进行了检测和分析。结果 :在37例甲状腺癌中有11例在第7.8外显子发生突变 ,突变率为29.9 %。p53基因突变在复发的患者中显著高于未复发的患者 ;p53基因突变与转移、组织学类型和分化状况无显著差异。结论

毫米波辐射对急性早幼粒白血病细胞增殖及分化的影响

目的：探讨毫米波（millimeter wave）对急性早幼粒白血病细胞增殖及分化的影响。方法：将体外培养的NB4细胞株接种于培养瓶，24小时后应用波长7．1mm、功率密度分别为1mW／cm2和5mW／cm2的毫米波辐射培养细胞30分钟，连续4天，每天观察细胞形态及数量改变，流式细胞术测定细胞增殖分化相关基因p53、p21、c－myc、c－fos及TGF－β1表达的改变。结果：1mW／cm2和5mW／cm2毫米波辐射能明显抑制NB4细胞增殖，辐射4天后的抑制率分别为35．6％和25．8％，1mW／cm2毫米波可诱导NB4细胞向终末细胞分化，诱导分化率为45．0％，主要为中、晚幼粒细胞；流式细胞术分析发现，经1mW／cm2毫米波辐射后，NB4细胞增殖分化相关基因p53、p21、c－fos表达增加，而c－myc和TGF－β1表达降低。结论：毫米波辐射能抑制体外培养的NB4细胞增殖并诱导其分化，作用机制可能与调控细胞增殖、分化相关基因的表达有关。

转化生长因子-β对骺软骨细胞增殖和PCNA表达的影响

采用 14天鸡胚股骨无血清培养、5 -溴尿嘧啶核苷 (Brd U)掺入标记和细胞核增殖抗原 (PCNA)免疫染色方法 ,研究转化生长因子 - β(TGF- β)对骺软骨细胞增殖的作用。结果显示 :Brd U阳性软骨细胞数目与分布部位与 TGF- β作用剂量和时间密切相关 ,TGF- β可以促进骺板成熟区和肥大区软骨细胞增殖 ,与 Brd U标记相比 ,PCNA阳性细胞分布区域和数目远多于前者 ,根据染色情况可以将 PCNA阳性细胞分为 S期和非 S期细胞两种。结论 :TGF- β参与和调节骺软骨各部位软骨细胞增殖活动 ,并能诱导非增殖软骨细胞表达 PCNA,用 PCNA作为细胞增殖的指标是不适宜的。

化疗药物敏感试验与乳腺癌经验化疗

采用MTT法体外药敏试验检测了 30例乳腺癌肿瘤细胞对 15种临床常用化疗药物的敏感性。结果显示乳腺癌细胞对CBP、BLM、 5 Fu、DDP、MMC、HCPT、MTX、EPI、DTIC、ADM、THP敏感 ,其中 80 %为临床经验化疗中单药有效的药物 ,提示经验化疗的正确性。另结果显示对CBP、HCPT、DDP、BLM中度敏感率较高 ,对临床联合化疗方案中药物的选择具有重要的参考价值。

诱发肝癌肝细胞病理改变与^(125)I-胰岛素摄取率的动态观察

为探索肝细胞癌变导致摄取125I－胰岛素增加的可能机理，用二乙基亚硝胺（DENA）诱发大鼠原发性肝细胞癌，动态观察癌变过程中大鼠肝脏浓聚125I－胰岛素能力增强与肝细胞病理改变之间的关系。将SD大鼠80只随机分为实验组（n=40）和对照组（n=40）。两组均饲以普通饲料，实验组按70mg/kg的剂量每周1次灌胃给予DENA。实验第6、11、15和20周，由尾静脉注射125I胰岛素溶液后1小时断头处死对照组和实验组的大鼠各10只，收集血、肝、肺、脾、肾、肌和骨，称重并测量放射性，计算% ID/g。肝组织作病理组织学检查。结果显示：所有对照组大鼠肝脏组织学观察均正常。第6周实验组肝脏表面粗糙，镜下发现肝细胞增生活跃。实验组125I－胰岛素摄取率是对照组的1.86倍；第11周肝脏颜色变浅，边缘稍钝，其中1只大鼠的肝脏呈弥漫性细小颗粒，病检表现为重度增生和肝硬变，125I－胰岛素摄取率是对照组的1.50倍；第15周，除以上的病理改变外，6只实验大鼠肝脏镜下可见肝癌细胞，125I－胰岛素摄取率是对照组的1.56倍；第20周，所有实验组的肝脏长大变形、质硬、弥漫性大小不等的灰白色结节，有坏死、液化和出血，10只实验组大鼠肝脏均发现肝癌细胞，125I－胰岛素摄取率是对照组的1.46倍。

丹参酮ⅡA诱导早幼粒细胞白血病细胞分化及其分子机制研究

目的 探讨丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA ,TanⅡA)对急性早幼粒细胞白血病 (APL)细胞诱导分化的作用及其分子机制。方法 将APL细胞株NB4细胞与TanⅡA在体外共同培养 5天 ,观察细胞形态变化 ,并检测药物作用前后细胞NBT还原能力 ,用流式细胞术测定细胞增殖周期、c myc、bcl 2、p5 3、c fos、CD3 3 及CD11b表达。结果 0 .5 μg/mlTanⅡA可诱导 (91.3± 2 .1) %的NB4细胞向终末细胞分化。其中 ,中、晚幼粒细胞占 0 .2 6 ,杆状及分叶核细胞占 0 .6 8;细胞生长明显抑制 ;NBT还原能力显著增强 ;CD3 3 表达下降 ,CD11b表达升高 ;与全反式维甲酸 (ATRA)相比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。流式细胞术分析发现 ,TanIIA处理组细胞被阻滞于G0 /G1期 ,S期细胞数明显减少 ,增殖指数降低 ,c myc、bcl 2基因蛋白表达降低 ,c fos、p5 3基因蛋白表达增加。结论 TanⅡA体外能使NB4细胞分化成熟 ,增殖能力下降。其机制可能是通过调控与NB4细胞增殖、分化相关的基因表达 ,抑制细胞DNA合成 ,从而抑制细胞增殖 ,诱导细胞分化。

MTA1、nm23H_1 mRNA表达及突变与卵巢癌淋巴结转移的关系

目的 研究MAT1、nm2 3H1mRNA表达及突变与卵巢癌淋巴结转移的关系。 方法 应用逆转录 PCR(RT PCR)和逆转录 PCR 单链构像多态性分析 (RT PCR SSCP)技术 ,对 8例正常卵巢、2 0例卵巢癌及其相应的 2 0例淋巴结组织 ,进行MTA1和nm2 3H1mRNA表达及突变的检测。 结果 转移卵巢癌原发灶MTA1mRNA高表达率为 10 0 % (7/ 7) ,无转移为 38 5 % (5 / 13) ,P =0 0 10 3;有癌转移淋巴结高表达率为 87 5 % (6 / 7) ,无癌转移为 2 3 % (3/ 13) ,P =0 0 118。有转移卵巢癌原发灶nm2 3H1mRNA低表达率为 10 0 % (7/ 7) ,无转移为 30 % (4 / 13) ,P =0 0 0 43;有癌转移淋巴结低表达率为 10 0 %(7/ 7) ,无癌转移为 38 5 % (5 / 13) ,P =0 0 10 2。MTA1/nm2 3H1mRNA表达的相对吸光度值 (A值 ,曾称光密度OD值 )的比值随转移而增加。单链构像多态性分析 (SSCP)未发现突变。 结论 MTA1、nm2 3H1基因的转录表达与卵巢癌淋巴结转移呈正负相关关系 ,起着正负调控的重要作用。这两个基因的异常表达是卵巢癌转移中的频发事件而与基因突变无关。

儿童小阴茎和正常阴茎皮肤细胞内雄激素受体的观察

目的 观察青春期前后包皮细胞内雄激素受体 (AR)分布的规律 ,并探讨AR在小阴茎患儿包皮细胞内表达的特征。方法 采用间接酶联免疫组化方法测定 42例不同年龄段正常人及 6例小阴茎患儿阴茎包皮细胞内AR的含量 ,并用放射免疫法对小阴茎患儿作了血清睾酮 (T)、卵泡刺激素 (FSH)、黄体生成素 (LH)的测定。结果 所有阴茎皮肤组织AR均呈阳性表达 ;正常阴茎皮肤细胞内AR的分布为 ,青春期以前AR含量处于稳定的较低水平状态 ,青春期开始明显增加 ,成年期达到高峰 ;小阴茎病例组的AR含量均低于正常阴茎各组。结论 阴茎皮肤细胞内AR含量与阴茎发育的年龄、生理功能及血中雄激素水平相关 ,小阴茎患儿的阴茎皮肤细胞内低AR含量可能与外周血中雄激素水平低有关 ,而不是小阴茎的主要病因。